LA PODREDUMBRE ÁCIDA DE LOS RACIMOS DE LA VID

Tamaño: px

Comenzar la demostración a partir de la página:

Download "LA PODREDUMBRE ÁCIDA DE LOS RACIMOS DE LA VID"

Pilar Miguélez Espejo
hace 6 años
Vistas:

1 LA PODREDUMBRE ÁCIDA DE LOS RACIMOS DE LA VID RODRIGUEZ ROMERA, M. 1 ORIOLANI, E. 1 ; COMBINA, M. 1,2 1 EEA Mendoza INTA, 2 CONICET San Martín (5505) Luján de Cuyo. Mendoza. mrodriguez@mendoza.inta.gov.ar

2 INTRODUCCIÓN En Francia fue detectada hace más de 100 años. Presente en otros países Europeos, Americanos y en Sudáfrica En Francia y Chile comenzó a ser importe hace más 15 años. Causa pérdidas de producción en Mendoza y San Juan. La incidencia y la severidad se incrementó en los últimos tiempos. Esta enfermedad frecuentemente se confundía con la podredumbre de los racimos (Botrytis cinerea, Aspergillus sp., Penicillium sp., Rhizopus, Cladosporium sp. y Alternaria sp.)(oriolani, E et.al 1982),

3 INTRODUCCIÓN Investigadores de distintos países han asociado esta enfermedad a un complejo de microorganismos que incluye: Levaduras Bacterias Hongos filamentosos

El origen etiológico y la secuencia de aparición de cada patógeno no han sido aclaradas totalmente: Algunos investigadores señalan que los hongos son los principales responsables de esta enfermedad y

4 El origen etiológico y la secuencia de aparición de cada patógeno no han sido aclaradas totalmente: Algunos investigadores señalan que los hongos son los principales responsables de esta enfermedad y que las levaduras y bacterias actuarían como patógenos secundarios. (LATORRE, B. Et al 2002 ). Otros afirman que la presencia de microfisuras o heridas en la epidermis de la baya es el factor desencadenante permitiendo la entrada de levaduras y bacterias, las que actuarían como patógenos primarios, siendo los hongos los secundarios. (GRAVOT,E. et al 2001),( LAURENT J.C 1998 ), (SNOWDON A. L. et al 1990 ).

5 SINTOMAS Comienzan en el racimo después del envero hasta poscosecha. En bayas aisladas o en grupos.

6 SINTOMAS Oxidación de la cutícula u hollejo Ablandamiento y maceración de la pulpa Vaciamiento de la baya, Pérdida de mosto Fuerte olor a ácido acético

7 SINTOMAS Presencia de larvas y adultos de la mosquita del vinagre (Drosophila melanogaster).

8 PODREDUMBRE DE LOS RACIMOS Vs PODREDUMBRE ÁCIDA Podredumbre de los racimos Podredumbre ácida de los racimos

9 PODREDUMBRE DE LOS RACIMOS

10 PODREDUMBRE DE LOS RACIMOS

11 PODREDUMBRE DE LOS RACIMOS

12 PODREDUMBRE ACIDA

13 PODREDUMBRE ACIDA

14 PODREDUMBRE ACIDA

15 PODREDUMBRE ACIDA

16 PODREDUMBRE ACIDA

17 PODREDUMBRE ACIDA

18 PODREDUMBRE ACIDA

19 PODREDUMBRE ACIDA

20 CONSECUENCIAS Mostos con elevada acidez volátil Uva de mesa no comercializable PODREDUMBRE ÁCIDA Vinos inestables Perdida de producción en poscosecha en uva de mesa

21 ESTUDIOS REALIZADOS DESDE EL EN EEA-MZA Se determinó e identificó el complejo etiológico que produce la podredumbre ácida de los racimos en las condiciones ecológicas de los viñedos de las provincias de Mendoza y San Juan. Parte I - AISLAMIENTO DE PATÓGENOS. Parte II - PRUEBA DE PATOGENICIDAD.

22 Parte I - AISLAMIENTO DE PATÓGENOS.

23 MATERIALES Y MÉTODOS Aislamientos 2004/05 de bayas sintomáticas y asintomáticas Cultivares Chenín, Bonamico, Tempranilla, Pedro Gímenez y Red Globe Procedencia Lavalle, San Martín, Luján de Cuyo y Tunuyán de la provincia de Mendoza El Zonda de la provincia de San Juan.

MATERIALES Y MÉTODOS Bayas sin síntomas, sin y

Bayas con síntomas, sin y Siembra en placas de

Siembra en placas de Petri en AEM modificado para

Purificación de levaduras en WL nutriente agar.

24 MATERIALES Y MÉTODOS Bayas sin síntomas, sin y con desinfección (hipoclorito de calcio). Bayas con síntomas, sin y con desinfección (hipoclorito de calcio). Siembra en placas de Petri en Bergey modificado para bacterias. Siembra en placas de Petri en AEM modificado para levaduras. Purificación de bacterias en GYCa. Purificación de levaduras en WL nutriente agar. Conservación bacterias : - GYCa a 4ºC. - glicerol 30 % a -18º C. Conservación levaduras: -YPD a 4ºC. - glicerol 30 % a -18º C.

IDENTIFICACIÓN DE LEVADURAS Técnicas moleculares de identificación Reacción en Cadena de la

8S-ITS Restricción o RFLPs con las endonucleasas Hinf, Cfo y Hae (Esteve-Zarzoso y col.

8S-ITS Los patrones de amplificación y de restricción obtenidos fueron analizados

25 IDENTIFICACIÓN DE LEVADURAS Técnicas moleculares de identificación Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) del fragmento del ADN ribosomal 5.8S-ITS Restricción o RFLPs con las endonucleasas Hinf, Cfo y Hae (Esteve-Zarzoso y col., 1999). Secuenciación del fragmento 5.8S-ITS Los patrones de amplificación y de restricción obtenidos fueron analizados utilizando la base de datos Yeast-Id (Universidad de Valencia-CSIC) lo que permitió una adecuada asignación de las especies. Secuencias obtenidas analizadas por BLAST con base de datos de nucleótidos

26 Zygosaccharomyces baillii Saccharomyces cerevisiae Pichia membranifaciens Especies de levaduras identificadas Dekkera bruxellensis Pichia kluyveri Issatchenkia orientalis Pichia galeiformes Candida apicola Candida sorbosa Candida magnoliae

IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS A nivel de grupo por :

Gluconobacter Etanol ox ácido acetico (amarillo)

27 IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS A nivel de grupo por : Tinción de Gram Reacción de la catalasa Producción de ácido A nivel de género por : Reacción de oxidación o superoxidación del etanol. Gluconobacter Etanol ox ácido acetico (amarillo) Acetobacter Etanol ox ácido acetico (amarillo) ox CO 2 + H 2 O (verde)

28 RESULTADOS Identificación de bacterias a nivel de grupo: Tinción de Gram : 100% Gram negativa Reacción de la catalasa :100% catalasa positiva Producción de ácido : 100% producción de ácido BACTERIAS ÁCETICAS Tabla 3: Identificación de bacterias a nivel de género Géneros de Bacterias Bayas con síntomas Bayas sin síntomas Acetobacter, 71,8 % 85,7% Gluconobacter 6,4 % 14,3% Acetobacter + Gluconobacter 21,8 % - Tabla 4: Desarrollo de hongos filamentosos Géneros de hongos Presencia Aspergillus 10-17% Penicillium 2-9% Botrytris 0-6% Rhizopus 0-2%

29 Parte I - AISLAMIENTO DE PATÓGENOS. Parte II - PRUEBA DE PATOGENICIDAD.

MATERIALES Y MÉTODOS Prueba de patogenicidad cultivar Microrganismos 2005/06 Red Globe Levaduras Agrupadas en 5 categorías por similitud de las colonias Suspensión de 6x10 8 lev /ml Bacterias

30 MATERIALES Y MÉTODOS Prueba de patogenicidad cultivar Microrganismos 2005/06 Red Globe Levaduras Agrupadas en 5 categorías por similitud de las colonias Suspensión de 6x10 8 lev /ml Bacterias Agrupadas en Gluconobacter y Acetobacter Suspensión de UFC/ml Método cámara húmeda 10 grupos de tres bayas c/u, con repetición Se inocularon bayas con levaduras y bacterias, solas o combinadas, con y sin microheridas. se mantuvieron a 27 C, durante tres semanas

31 RESULTADOS Tabla 5: Comparación de medias de bayas infectadas entre muestras con superficie sana y herida Tratamiento Medias Sin heridas 9,7%a* Con heridas 99,6% b *Letras distintas indican diferencias significativas (p 0,05)

32 RESULTADOS sin heridas con heridas

33 RESULTADO DEL RE-AISLAMIENTO DE LA PRUEBA DE PATOGENICIDAD Las bacterias correspondieron al grupo de las acéticas, 83 % al género Acetobacter y 17% a Gluconobacter A partir de las bayas sintomáticas se re-aislaron los microorganismos, recuperando sólo 4 especies de levaduras: 1. Saccharomyces cerevisiae 2. Issatchenkia orientalis 3. Pichia membranifaciens 4.Pichia galeiformes. Tabla 6:Agresividad de las levaduras re-aisladadas de la prueba de patogenicidad MUESTRA Medias Pichia galeiformes. 15% a Testigo 30% a Picchia membranifac iens 58% b Issatchenkia orientalis 88% c Saccharomyces cerevisiae 100 % c

34 DISCUSIÓN Microheridas Azúcares de bayas Levaduras (Degradan) Alcohol Bacterias (Oxidan) Acido acético Perdida de mosto Hongos (Patógenos secundarios)

35 LABORATORIO DE FITOPATOLOGIA EEA MZA

Documentos relacionados

VINIFICACIÓN DE UVAS ALTERADAS

VINIFICACIÓN DE UVAS ALTERADAS EJES FUNDAMENTALES SOBRE LOS CUALES TRABAJAR 1. Dejar atrás el vino soñado 2.Evaluar el daño en el viñedo 3.Ajustar el calendario de cosecha en relación al producto deseado,