EXTRACCIÓN DE ADN (Doyle & Doyle, 1987)
|
|
- María Rosario Quiroga Piñeiro
- hace 6 años
- Vistas:
Transcripción
1 EXTRACCIÓN DE ADN (Doyle & Doyle, 1987) MATERIALES Y REACTIVOS (Grado biología molecular a analítico) Cloroformo Alcohol Isoamilico Isopropanol. Etanol al 70%. Bloques de Hielo Microcentrifuga Bloque de calentamiento Vortex Tubos de microcentrifuga (1,5 ml) Micropipetas Puntas para micropipeta TAMPÓN DE EXTRACCIÓN DOYLE Y DOYLE 1987 Reactivo Concentración final Para 500 ml de tampón D&D CTAB 2% 10 g PVP 2% 10 g Tris HCl 1 M ph 1 M 50 ml 8 EDTA 0.5 M ph 0.5 M 25 ml 8 NaCl 5 M 200 ml Agua destilada estéril completar PROCEDIMIENTO 1. Separar el tejido vegetal a extraer (Hojas jóvenes plantas sanas) 2. Macerar 100 mg en nitrógeno líquido utilizando mortero y pestillo. Colocar en un tubo de microcentrifuga (1,5 ml) 3. Añadir 400 L de bufer de extracción y agitar brevemente en un vortex 4. Incubar a 65 C durante 30 min 5. Dejar a temperatura ambiente y añadir 400 L de cloroformo-isoamilalcohol 24:1. Agitar suavemente por inversión durante 5 min. 6. Centrifugar a 14 mil rpm por 5 min. 7. Retirar el sobrenadante y transferir a un tubo limpio (aproximadamente 200 L). 8. Añadir 200 L isopropanol frío y homogeneizar por inversión durante 1 min. 9. Incubar a -20 C por 30 min mínimo a 2 h. 10. Centrifugar a 14 mil rpm por 5 min. Descartar el sobrenadante, sin desprender el precipitado del tubo. 11. Adicionar 200 L de etanol al 70% frío. 12. Centrifugar a 14 mil rpm por 5 min.. Descartar el sobrenadante, sin desprender el precipitado del tubo. Dejar secar en papel toalla por aproximadamente 30 min. También se puede incubar a 50 C por 45 min con la tapa del microtubo abierta en una estufa. 13. Resuspender el ADN en 100 L de bufer TE. 14. Tratar con ARNasa (5 mg/ml). Incubar a 37 C por 30 min. Esta reacción se detiene calentando a 65 C por 15 min o añadiendo 2 L de EDTA 0.5 M. 15. Almacenar a 8-12 C por más de 6 h para resuspender. 16. Adicionalmente se puede medir la concentración del ADN en un espectrofotómetro y verificar su calidad corriendo un gel (5 L ADN más 2 L bufer de carga). 17. Almacenar a -20 C hasta su uso.
2 CUANTIFICACIÓN DE ADN EN EL QUANTUS DE PROMEGA MATERIALES Muestras vegetales: Genotipos (Ejemplo). PROCEDIMIENTO: Preparar solución de trabajo con el Quantifluor DNA System Calcular # de muestras a utilizar más muestra blanco más muestra estándar de concentración conocida más 4 muestras extra por error de pipeteo= Volumen a preparar de la solución de trabajo QFS 1X. En alta concentración se prepara dilución 1:200 En baja concentración 1:1000. Ejemplo: Son 10 muestras vegetales + Estándar + Blanco + 4 error = 16 muestras QFS 1X = 100 L x 16 = 1600 L Utilizar 1.6 L QFS dye más L bufer TE 1X para preparar la solución de trabajo. Esta solución es estable a temperatura ambiente pero debe conservarse en oscuridad o protegida de la luz con papel aluminio. Para la lectura se prepara cada muestra de la siguiente manera: Se utiliza un tubo de PCR de 0.2 ml. Añadir 1 L de la muestra + 99 L de 1X TE L QFS solución de trabajo. Estándar: Añadir 1 L del estándar + 99 L de 1X TE L QFS solución de trabajo. Blanco: Añadir 100 L de 1X TE L QFS solución de trabajo. Aplicar vortex por 5 seg. Centrifugar. Incubar 5 min en oscuridad. Leer. 2
3 CONDICIONES DE PCR Muestras 10 muestras de ADNs cuantificados en el Quantus de Promega más un control negativo. Primers Utilizaremos los cebadores Operon Technologies: OPC20, OPF04, OPF09, OPF10, OPF11, OPF12, OPF13, OPF14, OPF15, OPF16, OPF17, OPF19, OPM01, OPM03, OPM04, OPM05, OPM06, OPM07, OPP01, OPP07, OPK11. Para la amplificacion del ADN se emplea un termociclador, en este caso un Agilent Technologies (Applied Biosystems). PROGRAMACIÓN DEL CICLO PCR Primer paso 94,0ºC por 5:00 min (desnaturalización) Segundo paso 94,0ºC por 30 s Seguido por hibridación de primers a 36º - 42 C por 30 s Extensión a 72ºC por 2:00 min Se repite del paso 2 al 4 por n veces (generalmente veces) Posteriormente se realiza una extensión final a 72ºC por 7 min Y se programa un paso para conservación a 15 C hasta retirar del aparato CÓCTEL PCR MIX PARA RAPD Se elabora un coctel con todos los ingredientes necesarios para una amplificación exitosa del ADN de interés, generalmente buffer de reacción (1X), MgCl2 (2,42mM), dntp s (0,45mM), iniciador o primer (1,33mM), enzima taq polimerasa (0,067 u/ µl), BSA (0,67 mg/ml), ADN y agua para un volumen final de reacción de 15 µl. Mezcla (1 reacción) Mezcla (100 reacciones) Reactivo Volumen (ul) Volumen (ul) Buffer (5x) MgCl dntp s Primer Taq BSA H2O ADN ul 1200 ul 3
4 PREPARACIÓN DE GELES DE AGAROSA La electroforesis en gel de agarosa es de las más utilizadas para analizar y caracterizar ácidos nucleicos de distintas procedencias. Los geles se comportan como un tamiz molecular y permiten separar moléculas cargadas en función de su tamaño y forma. Así, moléculas de ADN de diferente tamaño van a emigrar de forma distinta en una electroforesis en gel de agarosa. En dicha electroforesis se aplican marcadores de peso molecular (fragmentos de ADN de tamaño conocido) para poder estimar el tamaño aproximado del ADN en estudio. Preparación del gel de agarosa 1. Preparar un gel de agarosa al 1,5% disueltos en buffer TBE 0,5X. Para ello pesaremos la cantidad adecuada de agarosa y se vierte en el volumen de buffer utilizando un matraz. 2. Fundir la solución de agarosa en un microondas por 1 min 30 s 3. Enfriar hasta que la solución alcance unos 50ºC aproximadamente. 4. Preparar durante este período la cámara de electroforesis donde se verterá la solución colocando correctamente un peine, formando los pocillos del gel, donde se colocará cada muestra de ADN amplificado por PCR. 5. Permitir la polimerización durante unos 30 min 4
5 Tampón de electroforesis 10X TBE Trizma Base 108 g Ácido Bórico 55 g EDTA 0.5 M 40 ml Llevar el ph a 8.3. Ajustar volumen final a 1 L con agua destilada. CORRIDA Se conectan los polos de la cámara electroforética y se establecen las condiciones de corrida, utilizando 100 Voltios constantes, 400 mamperios. La corrida se realiza hasta que el color amarillo en la escalera de ADN patrón alcance menos de 2 cm del final del gel. TINCIÓN El gel se retira de la cámara y se coloca en una bandeja con Diamond Dye (1:10000) de Promega con agitación suave por 20 min. DIGITALIZACIÓN Para visualizar las bandas amplificadas (Promega) el gel se coloca en un aparato Enduro GDS y se activa la luz UV. Se fotografía digitalmente el gel para el análisis correspondiente de las bandas obtenidas. 5
Construcción de la biblioteca en cósmidos de Azospirillum brasilense CBG 497.
Construcción de la biblioteca en cósmidos de Azospirillum brasilense CBG 497. Extracción de DNA genómico El DNA de A. brasilense CBG 497 se extrajo siguiendo el método descrito por la casa comercial distribuidora
Más detallesPCR Múltiplex. Listeria monocytogenes
PCR Múltiplex Listeria monocytogenes PCR-múltiplex En una sola reacción de PCR se amplifican al mismo tiempo 2 o más genes Condiciones similares de PCR para los genes amplificar: Desnaturalización Alineamiento
Más detallesANEXOS. Anexo 1 Transformación mediante electroporación
Anexo 1 Transformación mediante electroporación ANEXOS En este método de transformación de E. coli se requieren células electrocompetentes. La preparación de estas células consta de los siguientes pasos:
Más detallesDANAGENE BLOOD DNA KIT
Ref. 0601 100 ml Ref. 0602 200 ml DANAGENE BLOOD DNA KIT 1.INTRODUCCION DANAGENE BLOOD DNA Kit provee un método para la extracción de ADN genómico de alta calidad a partir de sangre total o médula ósea.
Más detallesPCR gen 16S ARNr bacteriano
PCR gen 16S ARNr bacteriano Ref. PCR16S 1. OBJETIVO DEL EXPERIMENTO El objetivo de este experimento es introducir a los estudiantes en los principios y la práctica de la Reacción en Cadena de la Polimerasa
Más detallesAnexo Conservar a 4 o C.
Anexo 1 Purificación de ADN viral 1. Partir de un sobrenadante de un cultivo celular infectado y clarificado. 2. Concentrar las formas brotantes de los baculovirus por centrifugación (centrifugrar 1,5
Más detallesEXTRACCIÓN DE ADN DE HONGOS FILAMENTOSOS
EXTRACCIÓN DE ADN DE HONGOS FILAMENTOSOS Los hongos poseen un genoma complejo consistente en: ADN nuclear (n ADN) ADN mitocondrial (mt ADN) en algunos casos ADN plasmídico EXTRACCIÓN DE ADN DE HONGOS FILAMENTOSOS
Más detallesTaller Ciencia para Jóvenes CIMAT 2012 Bachillerato julio 8 14 Cinvestav Campus Guanajuato
Introducción Taller Ciencia para Jóvenes CIMAT 2012 Bachillerato julio 8 14 Cinvestav Campus Guanajuato Visita al CINVESTAV - Irapuato. 19 julio, 2012. Las bacterias son los organismos más abundantes que
Más detallesREACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR) Microbiología de los Alimentos Ingeniería en alimentos
REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR) Microbiología de los Alimentos Ingeniería en alimentos 2015 Desarrollada por Kary Mullis en 1986 Técnica in vitro que permite amplificar enzimáticamente una región
Más detallesMateriales para la secuenciación de ADN
Introduccion La Secuenciación Sanger es un método de secuenciación de ADN en el que el ADN diana se desnaturaliza y se hibrida con un cebador de oligonucleótidos, que se extiende entonces gracias a la
Más detalles41. Comprobación de colonias transformantes mediante PCR y electroforesis
41. Comprobación de colonias transformantes mediante PCR y electroforesis Aurora Galván Cejudo, Manuel Tejada, Antonio Camargo, José Javier Higuera, Vicente Mariscal, Emilio Fernández Reyes Departamento
Más detallesREACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR)
REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR) Lic. en Bioquímica Lic. en Biotecnología Microbiología de los Alimentos 2016 Desarrollada por Kary Mullis en 1986 Técnica in vitro que permite amplificar enzimáticamente
Más detallesREACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR)
REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR) Microbiología General Microbiología M de los Alimentos Licenciatura en Bioquímica i Ingeniería en alimentos c Microbiología r 2015 Licenciatura en Biotecnología
Más detallesIV Curso Avanzado WHO GSS 2006 Buenos Aires 15 al 24 de mayo de 2006
IV Curso Avanzado WHO GSS 2006 Buenos Aires 15 al 24 de mayo de 2006 REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR) EN EL DIAGNOSTICO DE Campylobacter jejuni/coli Viernes 19 de mayo María Rosa Viñas Servicio
Más detallesSSI DERMATOPHYTE PCR KIT PRUEBA PCR DERMATOFITO
SSI DERMATOPHYTE PCR KIT PRUEBA PCR DERMATOFITO 2 Prueba de PCR para la detección de dermatofitos y Trichophyton rubrum Para uso diagnóstico in vitro Aplicación La prueba de PCR para dermatofitos en uñas
Más detallesMétodos para la determinación de grasas
Practica 4 Métodos para la determinación de grasas Antecedentes Los lípidos se encuentran ampliamente distribuidos en animales y vegetales, formado parte fundamental de membranas celulares. En los alimentos
Más detallesESTUDIO DE POLIMORFISMOS ALU HUMANOS POR PCR
ESTUDIO DE POLIMORFISMOS ALU HUMANOS POR PCR Ref. PCRALU 1. OBJETIVO DEL EXPERIMENTO El objetivo de este experimento es introducir a los estudiantes en los principios y práctica de la Reacción en Cadena
Más detalles5. DETECCION DE GENES DE VIRULENCIA MEDIANTE HIBRIDACIÓN CON SONDAS DE ADN
5. DETECCION DE GENES DE VIRULENCIA MEDIANTE HIBRIDACIÓN CON SONDAS DE ADN Materiales - Eppendorf de 1,5 ml estériles - Eppendorf de pared fina para PCR - Puntas de pipeta estériles desechables - Guantes
Más detallesCURSO DE EXTENSIÓN TEÓRICO PRÁCTICO HERRAMIENTAS EFICIENTES PARA LA IDENTIFICACIÓN DE LEVADURAS DE INTERÉS AGROINDUSTRIAL
LIBRO DE MEMORIAS 2 CURSO DE EXTENSIÓN TEÓRICO PRÁCTICO HERRAMIENTAS EFICIENTES PARA LA IDENTIFICACIÓN DE LEVADURAS DE INTERÉS AGROINDUSTRIAL Santiago de Cali, 23 al 28 de agosto de 2010 3 Libro de memorias
Más detallesInvestigando los genes FRAUDE CANINO
FRAUDE CANINO Ahora vamos a actuar como policías científicos. No se trata de un caso humano, sino de perros. El protocolo seguido es similar al de la Huella Genética o Huella de ADN, es decir, vamos a
Más detallesDETERMINACIÓN DEL MAPA DE UN PLÁSMIDO CON ENZIMAS DE RESTRICCIÓN
DETERMINACIÓN DEL MAPA DE UN PLÁSMIDO CON ENZIMAS DE RESTRICCIÓN 6 grupos de estudiantes 1. OBJETIVO DEL EXPERIMENTO El objetivo de este experimento es desarrollar un conocimiento del mapaje de ADN determinando
Más detallesInstrucciones de uso. BAG Cycler Check. Kit de para la validación de la uniformidad de la temperatura en los termocicladores
Instrucciones de uso BAG Cycler Check Kit de para la validación de la uniformidad de la temperatura en los termocicladores listo para usar, prealicuotado REF 7104 (10 tests) REF 71044 (4 tests) Contenidos
Más detallesELECTROFORESIS AVANZADA
Ref. ELECAVANZADA (4 prácticas) 1. OBJETIVO DEL EXPERIMENTO ELECTROFORESIS AVANZADA El objetivo de este experimento es introducir a los alumnos en el conocimiento de la teoría electroforética y familiarizarse
Más detallesTrabajo práctico 1: Ecología microbiana
Trabajo práctico 1: Ecología microbiana Las bacterias y las arqueas presentan una increíble diversidad metabólica que excede ampliamente la encontrada en organismos superiores. Los procariotas mantienen
Más detallesELABORACIÓN N DE MEZCLA PARA PCR. Raquel Asunción Lima Cordón
ELABORACIÓN N DE MEZCLA PARA PCR Raquel Asunción Lima Cordón PCR Polymerase Chain reaction (reacción en cadena de la polimerasa) Sintetizar muchas veces un fragmento de ADN PCR: simulación de lo que sucede
Más detallesMódulo 1 Biología Molecular Genética Molecular II 2009. Módulo 1. Amplificación de un fragmento de ADN genómico por PCR
Módulo 1 Amplificación de un fragmento de ADN genómico por PCR En este primer módulo se amplificará por PCR, mediante el uso de oligonucleótidos específicos, un fragmento de ADN genómico de Aspergillus
Más detallesConceptos y técnicas en ecología fluvial
Conceptos y técnicas en ecología fluvial Edición a cargo de: ARTURO ELOSEGI Profesor titular de Ecología en la Universidad del País Vasco SERGI SABATER Catedrático de Ecología en la Universidad de Girona
Más detallesPRÁCTICO 3: SOLUCIONES
Curso de Laboratorio Página: 1/6 DEPARTAMENTO ESTRELLA CAMPOS PRÁCTICO 3: SOLUCIONES Bibliografía: Química, La Ciencia Central, T.L. Brown, H.E.LeMay, Jr., B.Bursten; Ed. Prentice-Hall Hispanoamericana,
Más detallesAnexo A: Métodos de extracción de RNA
Anexo A: Métodos de extracción de RNA Anexo A.1: Extracción de RNA total con Trizol (Invitrogen) Anexo A.1.1 Extracción: 1. Pulverizar 100mg de material vegetal con Nitrógeno líquido. 2. Homogenizar el
Más detallesPROPIEDADES FISICOQUÍMICAS DE LOS ÁCIDOS NUCLEICOS. Es un ácido capaz de formar sales con iones cargados
Extracción de ADN Genética molecular PROPIEDADES FISICOQUÍMICAS DE LOS ÁCIDOS NUCLEICOS Es un ácido capaz de formar sales con iones cargados positivamente (cationes). Es soluble en soluciones concentradas
Más detallesAPLICACIÓN DE LA PCR: DIAGNÓSTICO DE PARÁSITOS
Prácticas docentes en la COD: 10-71 APLICACIÓN DE LA PCR: DIAGNÓSTICO DE PARÁSITOS FUNDAMENTO TEÓRICO La PCR es una técnica que permite llevar a cabo la síntesis in vitro de fragmentos de ADN. Está basada
Más detalles38. Purificación de ADN plasmídico y electroforesis del mismo en gel de agarosa
38. Purificación de ADN plasmídico y electroforesis del mismo en gel de agarosa José Luis Caballero Repullo, Enriqueta Moyano, Juan Muñoz Blanco Departamento de Bioquímica y Biología Molecular, Campus
Más detallesReacción en cadena de la Polimerasa (PCR)
Explicación de TP Nº 3 Reacción en cadena de la Polimerasa (PCR) Química Biológica Patológica Bioq. Mariana L. Ferramola 2013 Definición de PCR Es la amplificación enzimática de un fragmento de interés
Más detallesPerfiles metabólicos por cromatografía gaseosa acoplada a espectrometría de masas (GC-MS) en plantas. Dra. Mariana G. López
Perfiles metabólicos por cromatografía gaseosa acoplada a espectrometría de masas (GC-MS) en plantas Dra. Mariana G. López mglopez@cnia.inta.gov.ar PROTOCOLO PARA LA OBTENCIÓN DE PERFILES METABOLICOS EN
Más detallesUNIVERSIDAD NACIONAL DE MISIONES Facultad de Ciencias Exactas Químicas y Naturales TRABAJO PRÁCTICO Nº 4 REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR)
TRABAJO PRÁCTICO Nº 4 REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR) INTRODUCCIÓN La reacción en cadena de la polimerasa o PCR (del inglés Polymerase Chain Reaction) es una técnica relativamente simple y poderosa
Más detallesTEST de PATERNIDAD. Ref.PCR paternidad (4 prácticas) 1.OBJETIVO DEL EXPERIMENTO
Ref.PCR paternidad (4 prácticas) 1.OBJETIVO DEL EXPERIMENTO TEST de PATERNIDAD Este experimento introduce a los alumnos en el uso del ADN y la PCR para simular una determinación de paternidad. Los estudiantes
Más detallesEXTRACCIÓN Y CUANTIFICACION DEL ARN DE LA LEVADURA
EXTRACCIÓN Y CUANTIFICACION DEL ARN DE LA LEVADURA Objetivos: Al finalizar el trabajo práctico los cursantes estarán en capacidad de: - Extraer ARN a partir de células de levadura. - Realizar la hidrólisis
Más detallesRegulación de la expresión genética en plantas: Movilización de lípidos y carbohidratos durante la germinación de semillas de girasol
Regulación de la expresión genética en plantas: Movilización de lípidos y carbohidratos durante la germinación de semillas de girasol Objetivos Conocer un mecanismo de modificación de la expresión genética
Más detallesDANAGENE RNA PURIFICATION KIT
DANAGENE RNA PURIFICATION KIT REF.0801.1 100 EXTRACCIONES REF.0801.2 500 EXTRACCIONES 1.INTRODUCCION Este kit permite la permite la obtención de ARN total a partir de cultivos celulares, tejidos animales,
Más detallesEasy PDF Creator is professional software to create PDF. If you wish to remove this line, buy it now.
1 Virología y Micología Veterinaria Trabajo Práctico No. 4 ELECTROFORESIS La electroforesis es una técnica utilizada para separar grandes moléculas por tamaño a través de la aplicación de un campo eléctrico
Más detallesEQUILIBRIO QUÍMICO: DETERMINACIÓN DE LA CONSTANTE DE PRODUCTO DE SOLUBILIDAD DEL Ba(NO 3 ) 2
Página: 1/5 DEPARTAMENTO ESTRELLA CAMPOS PRÁCTICO 9: EQUILIBRIO QUÍMICO: DETERMINACIÓN DE LA CONSTANTE DE PRODUCTO DE SOLUBILIDAD DEL Ba(NO 3 ) 2 Bibliografía: Química, La Ciencia Central, T.L. Brown,
Más detallesvelocidades de movimiento mediante la aplicación de un campo eléctrico a través de una matriz porosa
INTRODUCCIÓN En general, la electroforesis es una técnica que separa las moléculas en base a sus diferentes velocidades de movimiento mediante la aplicación de un campo eléctrico a través de una matriz
Más detalles3. COMPONENTES. Tampón de electroforesis concentrado 2 x 50 ml 10 X (2 envases 500ml)
PCR SIMULADA Ref.PCR Simulada (4 prácticas) 1.OBJETIVO DEL EXPERIMENTO El objetivo de este experimento es introducir a los estudiantes en los principios y práctica de la Reacción en Cadena de la Polimerasa
Más detalles12.359,04 IMPORTE MAXIMO LOTE 1: ,92 IMPORTE MAXIMO LOTE 2: IMPORTE MAXIMO LOTE 3: ,54 REACTIVOS PARA AISLAMIENTO DE ACIDOS NUCLEICOS
HOSPITAL RAMON Y CAJAL RAZON SOCIAL: SUMINISTROS - PETICION DE OFERTAS C.I.F.: SERVICIO DE GENETICA MEDICA DOMICILIO: LOCALIDAD: TRAMITA: HOSPITAL RAMON Y CAJAL TELEFONO/FAX: Nº DE COMPRA: CONCURSO ABIERTO
Más detallesGuía Práctica 9. Producción de micelio en medio líquido para extracción de ADN. Micelio de hongos. Contenido
Guía Práctica 9 Micelio de hongos Producción de micelio en medio líquido para extracción de ADN Guillermo Castellanos, Experto en Investigación 2 Carlos Jara, Ing. Agr. M.Sc., Asociado en Investigación
Más detallesPRÁCTICA III. AISLAMIENTO DE MITOCONDRIAS: ACTIVIDAD MALATO DESHIDROGENASA
PRÁCTICA III. AISLAMIENTO DE MITOCONDRIAS: ACTIVIDAD MALATO DESHIDROGENASA 1. Fundamento Teórico La mayoría de los procesos bioquímicos que producen energía química se realizan en orgánulos intracelulares
Más detallesSANIDAD ANIMAL (CISA INIA)
Hoja 1 de 10 CENTRO DE PROCEDIMIENTO PARA LA DETECCIÓN DEL VIRUS DE LA PESTE PORCINA AFRICANA (VPPA) MEDIANTE REACCIÓN EN CADENA DE LA Fecha de entrada en vigor: Diciembre 2008 REV. FECHA EPÍGRAFE/S CAUSA
Más detalles3. MATERIALES Y MÉTODOS
3. MATERIALES Y MÉTODOS El proceso general llevado a cabo en la presente tesis se ilustra en el siguiente esquema: Exudado uretral/ cervical y/o biopsias Extracción del ADN PCR Digestión Algoritmo computacional:
Más detalles- Las mezclas de amplificación se presentan en formato monotest en tubos de PCR de 0.2 ó 0.5 ml, identificadas con diferentes colores.
! El diagnóstico de los linfomas malignos es una de las áreas que más dificultad reviste dentro de la histopatología. Si bien muchos casos se diagnostican a través de los datos histomorfológicos e inmunohistoquímicos,
Más detallesMÉTODO MODIFICADO DE OBTENCIÓN DE ADN GENÓMICO EN ORQUÍDEAS (Cattleya spp.) PARA AMPLIFICACIÓN CON MARCADORES MOLECULARES
Bioagro 23(1): 27-34. 2011 MÉTODO MODIFICADO DE OBTENCIÓN DE ADN GENÓMICO EN ORQUÍDEAS (Cattleya spp.) PARA AMPLIFICACIÓN CON MARCADORES MOLECULARES Iris Pérez-Almeida 1, Luis Angulo Graterol 1, Gustavo
Más detallesProtocolos de secuenciación de ADN
1 Protocolos de secuenciación de ADN Introducción El método de secuenciación utilizado aquí es el desarrollado por Sanger en 1975. Este consiste en la incorporación de didesixinucleótidos marcados fluorescentemente
Más detallesPRÁCTICA Nº 3 PROPIEDADES COLIGATIVAS: DETERMINACIÓN DE LA MASA MOLECULAR DE UN SOLUTO PROBLEMA POR CRIOSCOPIA
PRÁCTICA Nº 3 PROPIEDADES COLIGATIVAS: DETERINACIÓN DE LA ASA OLECULAR DE UN SOLUTO PROBLEA POR CRIOSCOPIA OBJETIVOS: El objetivo de la práctica es el estudio del efecto que produce la adición de un soluto
Más detallesKIT PARA ESTUDIO MOLECULAR DE LA TRANSLOCACIÓN t(14;18) Nº CAT. MAD M-2/5 (20 DETERMINACIONES)
KIT PARA ESTUDIO MOLECULAR DE LA TRANSLOCACIÓN t(14;18) Nº CAT. MAD-003997M-2/5 (20 DETERMINACIONES) El diagnóstico de los procesos linfoproliferativos se ha realizado tradicionalmente en base a las alteraciones
Más detallesINFORME DE PRÁCTICAS. Biotecnología. Mónica Benito Muñoz
INFORME DE PRÁCTICAS Biotecnología 1 2 ÍNDICE Introducción... 1 El entorno de trabajo... 1 Distribución del laboratorio Técnicas... 2-5 Electroforesis Purificación del DNA ( GENECLEAN ) Extracción de DNA
Más detallesCUADERNO DE PRÁCTICAS GENETICA MOLECULAR HUMANA. Grado en Medicina
DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA Y BIOLOGÍA MOLECULAR III FACULTAD DE MEDICINA UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID CUADERNO DE PRÁCTICAS GENETICA MOLECULAR HUMANA Grado en Medicina CURSO ACADÉMICO 2014/2015 INDICE
Más detallesManual de Uso (Ref /2)
Fabricado por: BIOTOOLS B&M Labs, S.A. Valle de Tobalina - 52 - Nave 39 28021 Madrid España Tel. (34) 91 710 00 74 Fax (34) 93 843 78 84 e-mail: info@biotools.eu www.biotools.eu Diseñado para la purificación
Más detallesSeparación e identificación de lípidos de membrana
Separación e identificación de lípidos de membrana Objetivos Separación e identificación de especies de fosfolípidos por cromatografía de capa fina (TLC, Thin Layer Chromatography) TLC monodimensional
Más detallesCICLO 2 : Fraccionamiento subcelular
Curso de Fisicoquímica Biológica 2010 Licenciatura de Bioquímica Facultad de Ciencias CICLO 2 : Fraccionamiento subcelular OBJETIVOS GENERALES: 1) Obtención de preparados enriquecidos en fracciones subcelulares
Más detallesCaracteristicas del ADN. Se rompen con las siguientes condiciones -Temperaturas >90 - ph >10.5
PCR Caracteristicas del ADN Se rompen con las siguientes condiciones -Temperaturas >90 C - ph >10.5 Baja astringencia tiene uniones parciales o imperfectas. Renaturalización Dependiendo de: -Contenido
Más detallesMANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO
MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO INGENIERIA ENBIOTECNOLOGÍA INGENIERÍA GENÉTICA FICHA TECNICA FICHA TÉCNICA SEMINARIO DE BIOTECNOLOGÍA MÉDICO-FARMACÉUTICA Fecha: Nombre del catedrático: 10-Julio-2012
Más detallesProyecto de Fin de Cursos
Universidad de la República Oriental del Uruguay Proyecto de Fin de Cursos ELECTROFORESIS EN GEL DE MOLÉCULAS DE ADN Noviembre de 2006 Carolina Etchart C.I. 3.757.708-8 Marcelo Lavagna C.I. 3.508.715-8
Más detalles- Las mezclas de amplificación se presentan en formato monotest en tubos de PCR de 0.2 0.5 ml, identificados con diferente color.
! El diagnóstico de los linfomas malignos es una de las áreas que más dificultad reviste dentro de la histopatología. Si bien muchos casos se diagnostican a través de los datos histomorfológicos e inmunohistoquímicos,
Más detallesPRACTICA # 1 DETERMINACION DE FOSFORO OLSEL Y BRAY P-1
PRACTICA # 1 DETERMINACION DE FOSFORO OLSEL Y BRAY P-1 INTRODUCCIÓN El fósforo es un elemento esencial para la vida. Las plantas lo necesitan para crecer y desarrollar su potencial genético. Lamentablemente,
Más detallesConceptos generales de Biología Molecular. Extracción de DNA y Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR).
Conceptos generales de Biología Molecular. Extracción de DNA y Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR). Olga Redondo González MIR 3 Análisis Clínicos Hospital Universitario de Guadalajara, 25 abril 2007
Más detallesDocumentos de Referencia para Diagnóstico de Semilla de Papa de Canadá
SECRETARIA DE AGRICULTURA, GANADERÍA. DESARROLLO RURAL, PESCA Y ALIMENTACIÓN Dirección General de Sanidad Vegetal Centro Nacional de Referencia Fitosanitaria Subdirección de Diagnóstico Fitosanitario Documentos
Más detallesMétodos para la cuantificación de nitrógeno y proteína
Practica 5 Métodos para la cuantificación de nitrógeno y proteína Antecedentes Para la determinación de proteínas en muestras de alimentos se cuenta con una gran variedad de métodos, basados en diferentes
Más detallesQuímica Biológica Patológica Técnicas de Biología Molecular aplicadas a Bioquímica Clínica Tema 2 Dra. Silvia Varas qbpatologica.unsl@gmail.com Tema 2 PCR Historia Bases Optimización de una reacción de
Más detallesOBJETIVO Aprender a preparar disoluciones de concentración dada, ya que la mayor parte de las reacciones químicas tienen lugar en forma de disolución.
OBJETIVO Aprender a preparar disoluciones de concentración dada, ya que la mayor parte de las reacciones químicas tienen lugar en forma de disolución. FUNDAMENTO TEÓRICO Una disolución es una mezcla homogénea
Más detallesCódigo: IDX-016 Ver: 1 TOXO. Sistema para la detección de la presencia de ADN de Toxoplasma gondii. Reg. MSP 21205
Sistema para la detección de la presencia de ADN de Toxoplasma gondii Reg. MSP 21205 Valdense 3616. 11700. Montevideo. Uruguay. Teléfono (598) 2 336 83 01. Fax (598) 2 336 71 60. info@atgen.com.uy www.atgen.com.uy
Más detallesTEST de CSI. Ref. PCR detectives (4 prácticas) 1. OBJETIVO DEL EXPERIMENTO
TEST de CSI Ref. PCR detectives (4 prácticas) 1. OBJETIVO DEL EXPERIMENTO Este experimento introduce a los alumnos en el uso del ADN y la PCR para simular como ADN obtenido de un pelo o saliva de una escena
Más detallesBIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR. LABORATORIO No 2: EXTRACCION DE ADN
BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR LABORATORIO No 2: EXTRACCION DE ADN 1. INTRODUCCION Las características de un organismo están especificadas en su información genética, la cual está representada como una secuencia
Más detallesTRABAJO PRÁCTICO Nº 5: ÁCIDOS NUCLEICOS. DOCENTES: Dr. Andrés Ciochinni, Dra. Gabriela Niemirowicz. DESCRIPCIÓN DE LOS MÉTODOS A UTILIZAR
TRABAJO PRÁCTICO Nº 5: ÁCIDOS NUCLEICOS DOCENTES: Dr. Andrés Ciochinni, Dra. Gabriela Niemirowicz. DESCRIPCIÓN DE LOS MÉTODOS A UTILIZAR Purificación de ácido desoxiribonucleico (ADN). El ADN es un polímero
Más detallesBIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR. LABORATORIO No 7: REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR)
BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR LABORATORIO No 7: REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR) 1. INTRODUCCIÓN La Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) es una técnica in Vitro que imita la habilidad natural
Más detallesTECHNOLOGY. CROSSMATCH TEST canino. primer test inmunocromatografico para reaccion cruzada con antiglobulina canina especifica.
CROSSMATCH TEST canino primer test inmunocromatografico para reaccion cruzada con antiglobulina canina especifica 20 minutos TECHNOLOGY - ahorra tiempo - facil manipulacion - resultados fiables - facil
Más detallesLaboratorio de Marcadores Moleculares del Programa de Cereales y Granos Nativos
Laboratorio de Marcadores Moleculares del Programa de Cereales y Granos Nativos GUÍA PRÁCTICA: INTRODUCCIÓN AL USO DE MARCADORES MOLECULARES EN EL ANÁLISIS DE DIVERSIDAD GENÉTICA Bloque Práctico (Chirinos
Más detallesEXTRACCIÓN Y DETERMINACIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS DE LA LEVADURA
EXTRACCIÓN Y DETERMINACIÓN DE ÁCIDS NUCLEICS DE LA LEVADURA bjetivos: Al finalizar el trabajo práctico los cursantes estarán en capacidad de: - Extraer ARN a partir de células de levadura. - Realizar la
Más detallesLaboratorio. Objetivos I N T R O D U C C I Ó N. Al finalizar este laboratorio el estudiante podrá:
Laboratorio 12 Biología molecular Objetivos Al finalizar este laboratorio el estudiante podrá: 1. Conocer los principios básicos de la técnica de electroforesis y su aplicación al análisis del ADN. 2.
Más detalles17.- Electroforesis de ácidos nucleicos en geles de agarosa. Aislamiento y caracterización electroforética de DNA plasmídico
17.- Electroforesis de ácidos nucleicos en geles de agarosa. Aislamiento y caracterización electroforética de DNA plasmídico Carmen Alicia Padilla Peña, Jesús Diez Dapena, Emilia Martínez Galisteo, José
Más detallesPRÁCTICA HIGIENE, INSPECCIÓN Y CONTROL DE LA MIEL
PRÁCTICA HIGIENE, INSPECCIÓN Y CONTROL DE LA MIEL Determinación del contenido de humedad Determinación gravimétrica del contenido de sólidos insolubles en agua Conductividad eléctrica Determinación del
Más detallesPRÁCTICAS AMPLIACIÓN DE MICROBIOLOGÍA
PRÁCTICAS AMPLIACIÓN DE MICROBIOLOGÍA Día 1º.- EXPLICACIÓN GENERAL. TRANSFORMACIONES: E. coli, Streptomyces Día 2º.- INOCULAR MINIPREPS (8:45 de la mañana). OBTENCIÓN DE PLÁSMIDO ( MINIPREPS, Lisis alcalina)
Más detallesPractica la genética Ficha didáctica del profesorado Bachillerato
Ficha didáctica del profesorado Bachillerato www.eurekamuseoa.es Extracción de ADN Cuál es la función de cada uno de los ingredientes utilizados para realizar la disolución tampón para la visualización
Más detallesMUESTREO Y DETERMINACIÓN DE LARVAS DE MEJILLÓN CEBRA
MUESTREO Y DETERMINACIÓN DE LARVAS DE MEJILLÓN CEBRA Octubre 2006 ÍNDICE DE CONTENIDO 1. FUNDAMENTO DEL MÉTODO 2. MATERIAL NECESARIO 3. PREPARACIÓN DE LA MUESTRA 4. PROCEDIMIENTO OPERATIVO 5. IDENTIFICACIÓN
Más detallesPráctico: Genética bacteriana 2007.
Práctico: Genética bacteriana 2007. Actividad integrada Departamento de Genética Departamento de Bacteriología y Virología. OBJETIVOS Objetivos generales El estudiante al terminar la actividad práctica
Más detallesTaqMan GMO Maize Quantification Kit. Part No: 4481972
TaqMan GMO Maize Quantification Kit Part No: 4481972 1. Introducción Los organismos modificados genéticamente (OMG) se encuentran ampliamente distribuidos, siendo la soja y el maíz los vegetales que ocupan
Más detallesDANAGENE SALIVA KIT. Ref.0603.4 50 Extracciones / Ref.0603.41 160 Extracciones
DANAGENE SALIVA KIT Ref.0603.4 50 Extracciones / Ref.0603.41 160 Extracciones 1.INTRODUCCION DANAGENE SALIVA Kit provee un método para la extracción de ADN genómico de alta calidad a partir de muestras
Más detallesBIORREACTRES. Estudios básicos y aplicados sobre procesos de fermentación
BIORREACTRES Ing. en Alimentos Estudios básicos y aplicados sobre procesos de fermentación Mg. Anahí V. Cuellas Docente investigadora Universidad Nacional de Quilmes TRABAJO PRACTICO Obtención de enzimas
Más detallesfigura1 : esquema PCR introducción a la PCR termocicladoresnahita
Gracias a sus altas prestaciones e increíble precio, los termocicladores Nahita son los equipos de elección de gran cantidad de laboratorios y centros de investigación para llevar a cabo la reacción en
Más detallesBiología Celular y Molecular. Guía de TP Nro. 5. Actividad proteolítica celular.
Biología Celular y Molecular. Guía de TP Nro. 5 Actividad proteolítica celular. Introducción La actividad proteolítica secretada por las células es un elemento indispensable para la proliferación y migración
Más detallesPráctica laboratorio: Reacciones de polimerización. Determinación del peso molecular de un polímero mediante análisis de grupos finales
Práctica laboratorio: Reacciones de polimerización. Determinación del peso molecular de un polímero mediante análisis de grupos finales Enrique Dans. Creative Commons. http://www.flickr.com/photos/edans/1239
Más detallesINSTITUTO TECNOLÓGICO DE COSTA RICA ESCUELA DE BIOLOGÍA INFORME DE TRABAJO FINAL DE GRADUACIÓN
INSTITUTO TECNOLÓGICO DE COSTA RICA ESCUELA DE BIOLOGÍA INFORME DE TRABAJO FINAL DE GRADUACIÓN OPTIMIZACIÓN DE UN PROTOCOLO PARA LA EXTRACCIÓN DE ADN DE PLANTAGO MAJOR DIRIGIDA A LA TIPIFICACIÓN MOLECULAR
Más detallesTRBAJO PRÁCTICO N 5: ph. Objetivo: Determinar el ph de soluciones ácidas y básicas de concentraciones diferentes.
QUÍMICA GENERAL Y TECNOLÓGICA 2010 TRBAJO PRÁCTICO N 5: ph Objetivo: Determinar el ph de soluciones ácidas y básicas de concentraciones diferentes. Fundamentos Teóricos: La mayoría de las reacciones químicas
Más detallesDETERMINACION DE CAFEÍNA EN TE, CAFÉ Y YERBA MATE Basado en Método AOAC Modificado
ME-711.02-008 Página 1 de 5 1. OBJETIVO Determinar el contenido de cafeína en fruitivos como té, café o yerba mate por método Bailey y Andrews. 2. CAMPO DE APLICACIÓN Y ALCANCE El método es aplicable a
Más detallesPLANIFICACIÓN DE ASIGNATURA
PLANIFICACIÓN DE ASIGNATURA I IDENTIFICACION GENERAL DE LA ASIGNATURA CARRERA BIOQUIMICA DEPARTAMENTO BIOLOGIA ASIGNATURA BIOLOGIA MOLECULAR II CÓDIGO 1681 PRERREQUISITOS Biología Molecular I CREDITOS
Más detallesPROBLEMAS RESUELTOS SELECTIVIDAD ANDALUCÍA 2012 QUÍMICA TEMA 1: LA TRANSFORMACIÓN QUÍMICA
PROBLEMAS RESUELTOS SELECTIVIDAD ANDALUCÍA 01 QUÍMICA TEMA 1: LA TRANSFORMACIÓN QUÍMICA Junio, Ejercicio, Opción B Reserva 1, Ejercicio 5, Opción A Reserva 1, Ejercicio 5, Opción B Reserva, Ejercicio,
Más detallesPREPARACIÓN DE SOLUCIONES
1. INTRODUCCION Las soluciones se definen como mezclas homogéneas de dos o más especies moleculares o iónicas. Las soluciones gaseosas son por lo general mezclas moleculares. Sin embargo las soluciones
Más detallesPreparación de agua de dilución :
La determinación de la Demanda Bioquímica de Oxígeno es una prueba en la que se determina los requerimientos relativos de oxígeno en aguas contaminadas tal como aguas residuales domésticas e industriales,,
Más detallesLaboratorio de Evolución - Facultad de Ciencias EXTRACCION DE ADN
EXTRACCION DE ADN Soluciones necesarias: Buffer de lisis (50 mm de Tris HCl, 50 mm EDTA ph 8, 1 % de SDS y 50 mm de NaCl), Proteinasa K (10 mg/ml), NaCl ( 5 M), TE 1X ph. 8 (autoclavado), Etanol o isopropanol
Más detallesGrado en Química. 4º Curso Bioquímica. Guión de Prácticas
Grado en Química 4º Curso Bioquímica Guión de Prácticas UTILES A TRAER POR EL ALUMNO Bata Gafas de Seguridad Cuaderno de Laboratorio NORMAS DE TRABAJO Antes de empezar Antes de empezar cada práctica, el
Más detallesLaboratorio Bromatología Balanzas Analíticas
Laboratorio Bromatología Balanzas Analíticas Instrumentos de medida de peso con valor de precisión de lectura de 0.0001 g a 260 g y 0.001 a 220 g Laboratorio Bromatología Mufla Equipo utilizado para incinerar
Más detallesDIGESTIÓN DEL FAGO LAMBDA CON ENZIMAS DE RESTRICCIÓN
DIGESTIÓN DEL FAGO LAMBDA CON ENZIMAS DE RESTRICCIÓN Ref.ER2 (4 PRÁCTICAS) 1. OBJETIVO DEL EXPERIMENTO El objetivo de este experimento es introducir los principios de la digestión del ADN con enzimas de
Más detalles