Control microbiológico de las aguas. de las aguas. aguas

Transcripción

1 Control microbiológico aguas 1

2 Como empresa perteneciente al grupo SCHAR- LAU SCIENCE GROUP, Scharlab, distribuye en exclusiva para España la marca Scharlau. Corresponde a nuestra fábrica, Scharlau Chemie S.A., la responsabilidad de la fabricación de las dos divisiones de producto: la Química y la Microbiológica. La experiencia acumulada de más de 20 años fabricando medios de cultivo deshidratados, junto con la juventud de nuestra red de distribuidores, hace que Scharlau Microbiology concentre en su catálogo de productos medios tradicionales y novedosos, adaptándonos a las más estrictas normativas. Estamos en contínua inversión de esfuerzos para poder ofrecer excelente calidad a un precio justo, mejorando nuestro proceso de fabricación y nuestros envases. Ejemplo de ello, son nuestras nuevas instalaciones en Sentmenat, para la fabricación de medios de cultivo. Desde 1995, Scharlau Chemie S.A. trabaja bajo la normativa de calidad ISO Y en el 2002, se obtuvo la acreditación ISO 14001, o sea, manufacturamos respetando el medio ambiente. PLACAS DE 55 MM PARA LA FILTRACIÓN CON MEMBRANA Placas preparadas de medio sólido para su uso en la técnica de filtración con membrana en el estudio de la contaminación presente en aguas, bebidas y líquidos en general. Presentación en cajas con 5 blister de 6 placas. VENTAJAS Disponibilidad de placa unitaria Almacenaje a temperatura ambiente Larga caducidad Amplia gama de referencias Crecimiento más exuberante Mayor tasa de recuperación Fácil manipulación PROPIEDADES Bolsa de celofán adicional Se sirven con certificado de análisis FRASCOS CON AGARES Larga vida útil: 12 meses desde su fabricación Volúmenes disponibles: 90 ml, 100 ml y 200 ml Suministrados en cajas de 10 uds. CONDICIONES ESPECIALES Test de esterilidad con cepas control Esterilidad garantizada Cierre con septum pinchable para evitar contaminaciones Trazabilidad de los lotes Lotes suficientemente grandes PRESENTACIÓN CON SENDAS VENTAJAS MEDIOS DE CULTIVO DESHIDRATADOS Disponibles en frascos de100 g y de 500 g Cada frasco viene en el interior de una bolsa individual que lo proteje del polvo y la suciedad. Frasco con excelente cierre hermético que asegura la calidad del producto durante largos periodos de tiempo. Cada frasco se adjunta con su respectivo certificado de análisis, y el certificado de garantía de ausencia de encefalopatía espongiforme bovina en nuestra materia prima de origen animal. TUBOS CON MEDIOS SÓLIDOS MEDIOS DE CULTIVO PARA REFUNDIR Larga vida útil: 12 meses desde su fabricación Disponibles en: 15 ml Suministrados en cajas de 15 uds. Existen ocasiones donde se precisa la siembra en masa, por lo que es preceptivo partir de un medio fundido, para añadir la muestra y posteriormente vertirlo en placa. De forma general, el recalentamiento de los medios está contraindicado siempre, no obstante, por necesidades del proceso, este hecho es inevitable para minimizar los efectos indeseables. Los medios que fabricamos para refundir son sometidos a las mínimas temperaturas necesarias para garantizar la esterilidad. Recomendamos la utilización del microondas para su fusión por lo que estos productos llevan un tapón de polipropileno en lugar de uno metálico. Nuestros frascos cumplen todos estos requisitos, y además incorporan una doble etiqueta desplegable que permite traspasar datos a otro documento evitando errores de transcripción. Nuestro cierre consiste en un tapón de PP, un septum de butilo, un capuchón y sleever. De forma que podemos garantizar: La hermeticidad La esterilidad del septum pinchable La no apertura accidental del frasco 2

3 ANÁLISIS DE LAS AGUAS SEGÚN NORMATIVAS UNE-EN-ISO TÉCNICA DE FILTRACIÓN CON MEMBRANA La muestra se filtra a través de un filtro de membrana de 0,45 µm. De manera que los microorganismos quedan retenidos en su superficie. A continuación la membrana se deposita en una placa de 55 mm que contiene el agar apropiado. Después del periodo de incubación a una determinada temperatura, las colonias que han crecido en la superficie de la membrana pueden ser contadas directamente. La técnica de filtración con membrana ofrece una serie de ventajas sobre la tradicional técnica del número más probable (NMP): Muestreo mucho más representativo. La membrana permite recuperar menos concentración de microorganismos en mayores volúmenes de líquido. Siendo útil en aguas muy poco contaminadas. Resultados definitivos en menos tiempo. Enumeración de colonias directa y más precisa. Indicada para aguas muy mineralizadas que pueden producir reacciones no deseadas en las colimetrias con medios líquidos. Las membranas pueden ser guardadas por largos periodos de tiempo con fines testimoniales, sanitarios o legales. Ahorro considerable de espacio en el laboratorio comparado con la técnica del NMP. Esta técnica ha sido adoptada también para el control de aguas no destinadas al consumo humano, por ejemplo, en agua de uso en procesos de fabricación. También se usa para el control microbiológico de otras muestras líquidas como zumos, leche, etc. TOMA DE MUESTRAS El muestreo debe ser hecho con contenedores estériles. Opción 1: frascos o botellas de vidrio borosilicato o de plástico no tóxico (PP) resistentes al calor. Opción 2: bolsas de plástico no tóxico estériles de un sólo uso. Opción 3: frascos o botellas de plástico no tóxicas (PE) que no resisten el calor, pero que han sido esterilizadas por radiación gamma. Las muestras de aguas cloradas deben ser recogidas con un frasco que contenga tiosulfato sódico. Propiedades/Ventajas Tapón sin obturador > cierre hermético que evita la evaporación del agua. Producto Irradiado > garantiza la esterilidad de la muestra. FRASCOS RECOLECTORES Frasco cuadrado de PE, boca ancha. Caducidad 5 años. Esterilizados por irradiación. Dimensiones de los frascos de 500 ml: base 80 x 65 mm, altura 120 mm. REFERENCIA CAPACIDAD PRESENTACIÓN 064-BA ml BA2140* 500 ml BA ml BA21401* 1000 ml 15 *RECOLECTOR DE AGUAS CLORADAS. LOS FRASCOS DE 500 ML Y 1 L CONTIE- NEN RESPECTIVAMENTE 0,4 ML Y 0,8 ML DE UNA SOLUCIÓN AL 3% DE TIOSUL- FATO SÓDICO. Frasco cuadrado de PEHD con tiosulfato, boca estrecha. Caducidad 2 años. Esterilizados por irradiación. Dimensiones de los frascos: base 70 x 70 mm, altura 160 mm. REFERENCIA CAPACIDAD PRESENTACIÓN 630-FTC522* 500 ml 100 *RECOLECTOR DE AGUAS CLORADAS. CONTIENE 10 MG DE TIOSULFATO SÓDICO. DEBIDO A LA IMPORTANCIA DE ASEGURAR LAS CUALIDADES FÍSICOQUÍMICAS, ORGANOLÉPTICAS Y MICROBIOLÓGICAS DEL AGUA DESTINADA AL CONSUMO HUMANO, SE HA PUBLICADO RECIENTEMENTE EL REAL DECRETO (RD) 140/2003, DE 7 DE FEBRERO (BOE Nº 45 DE 21 DE FEBRERO DE 2003); CON EL FIN DE ESTABLECER UNA UNIFORMIDAD EN LOS MÉTODOS DE ANALISIS EMPLEADOS PARA TAL FIN. DICHO RD ESTABLECE LA UTILIZACIÓN DE LOS SIGUIENTES MEDIOS DE CULTIVO PARA LA OBTENCIÓN DE LOS VALORES PARA LOS PARÁMETROS MICROBIOLÓGICOS ESTABLECIDOS. BACTERIAS COLIFORMES Y Escherichia coli UNE EN ISO :2000 CHAPMAN TTC AGAR (TERGITOL 7 AGAR) Enterococos UNE EN ISO :2001 SLANETZ - BARTLEY AGAR ENUMERACIÓN DE MICROORGANISMOS CULTIVABLES - RECUENTO DE COLONIAS A 22 C UNE EN ISO 6222:1999 EXTRACTO DE LEVADURA AGAR Clostridium perfringens (INCLUIDAS LAS ESPORAS) Directiva Europea 98/83/CE Real Decreto 140/2003 m-cp AGAR EL ANÁLISIS HA DE HACERSE POR EL MÉTODO DE LA FILTRACIÓN CON MEMBRANA. 3

4 ANÁLISIS DE LAS AGUAS SEGÚN NORMATIVAS UNE-EN-ISO Coliformes y Escherichia coli AGAR CHAPMAN TTC (AGAR TERGITOL 7) (AGAR DE LACTOSA TTC CON HEPTADECILSULFATO DE SODIO) Medio selectivo para la detección y enumeración de coliformes, coliformes termotolerantes y Escherichia coli mediante el método de filtración por membrana. Este medio es el recomendado por las normativas UNE EN ISO :2000. COMENTARIOS El Tergitol 7 inhibe el crecimiento de las bacterias Gram positivas. La solución de TTC añadida al medio sirve como indicador del crecimiento bacteriano y para un reconocimiento previo de E. coli y Enterobacter aerogenes. E. coli INSTRUCCIONES Filtrar 100 ml de la muestra de agua a través de una membrana con un tamaño de poro de 0,45 µm. Usar pinzas estériles para colocar, con cuidado, la cara filtrada de la membrana boca arriba dentro de la placa de filtración. Otras bacterias INCUBACIÓN Incubar durante (21 ± 3) horas a (36 ± 2) C, evitando una excesiva deshidratación de la placa controlando el grado de humedad. SUPLEMENTOS TTC INTERPRETACIÓN Las colonias capaces de fermentar la lactosa con la consiguiente producción de ácido, provocando un cambio de color del medio de verde a amarillo, son consideradas sospechosas. CONFIRMACIÓN Todas las colonias sospechosas deben ser confirmadas mediante la prueba de la oxidasa y del indol. Deben ser consideradas coliformes todas las colonias características que son oxidasa negativas. Las colonias oxidasa negativas e indol positivas son consideradas Escherichia coli. CHAPMAN TTC AGAR BASE CHAPMAN TTC AGAR * * 064-PA PF *NECESITA LA ADICIÓN DE TTC ( )

5 Enterococos Control microbiológico ANÁLISIS DE LAS AGUAS SEGÚN NORMATIVAS UNE-EN-ISO AGAR SLANETZ-BARTLEY Medio selectivo para la enumeración y detección de Enterococos en agua de bebida, agua residual y bebidas mediante el método de filtración por membrana. De acuerdo con UNE EN ISO : COMENTARIOS El medio contiene azida sódica que inhibe el crecimiento de las bacterias Gram negativas. La solución de TTC que se añade al medio facilita el recuento. INSTRUCCIONES Filtrar 100 ml de la muestra de agua através de una membrana con un tamaño de poro de 0,45 µm. Usar pinzas estériles para colocar, con cuidado, la cara filtrada de la membrana boca arriba dentro de la placa de filtración. Slanetz-Bartley sin crecimiento INCUBACIÓN Incubar durante (44 ± 4) horas a (36 ± 2) C, es conveniente mantener un determinado grado de humedad en la estufa con el fin de evitar una excesiva desecación de la placa. Enterococcus sp. INTERPRETACIÓN Las colonias capaces de crecer en presencia de azida sódica y de reducir el TTC a formazán dando lugar a color rojo, marrón o rosa se consideran sospechosas. SUPLEMENTOS TTC CONFIRMACION Confirmar las colonias sospechosas por transferencia de membrana sobre agar bilis esculina azida (01-592) observando todas aquellas colonias que sean capaces de hidrolizar la esculina en un plazo de unas 2 horas dando lugar a una coloración que va desde marrón a negro. SLANETZ-BARTLEY AGAR BASE SLANETZ-BARTLEY AGAR * * ** ** 064-PA PF0004 *NECESITA LA ADICIÓN DE TTC ( ) **LLEVA EL TTC INCORPORADO EN LA FORMULACIÓN 5

6 ANÁLISIS DE LAS AGUAS SEGÚN NORMATIVAS UNE-EN-ISO Enumeración de microorganismos cultivables Recuento de colonias a 22 C AGAR TRIPTONA EXTRACTO DE LEVADURA Medio sólido para la enumeración de microorganismos cultivables en aguas. De acuerdo con UNE EN ISO 6222:1999. Más de 300 colonias COMENTARIOS Los nutrientes de la triptona y las vitaminas del extracto de levadura favorecen el crecimiento de la mayoría de las bacterias. INSTRUCCIONES Se utiliza la técnica de la siembra en masa, se hacen dos series de 2 placas cada una. En una de las series depositaremos 1 ml de muestra en cada placa y en la otra 0,1 ml. Una vez fundido y atemperado el medio (45 ± 1) C, vertir este sobre la muestra en cada placa. Evitar la formación de burbujas colonias INCUBACIÓN: Según la ISO 6222:1999, se realiza a dos temperaturas: una placa de cada serie a (36 ± 2) C durante (44 ± 4) horas, y las otras dos placas a (22 ± 2) C durante (68 ± 4) horas. Esta última incubación es la única que figura en el Real Decreto 140/2003. INTERPRETACIÓN: Se cuentan todas las colonias, expresando el resultado en número de colonias por ml. Sólo son significativas para la enumeración las placas que presenten recuentos entre colonias. CONFIRMACIÓN: Si el recuento es superior a 300 colonias por ml, debera repetirse el ensayo aumentando las diluciones. TRIPTONA EXTRACTO DE LEVADURA AGAR TRIPTONA EXTRACTO DE LEVADURA AGAR TA PF0013 6

7 ANÁLISIS DE LAS AGUAS SEGÚN NORMATIVAS UNE-EN-ISO Clostridium perfringens (incluidas las esporas) AGAR m-cp Medio sólido para la enumeración y aislamiento de Clostridium perfringens en agua de consumo humano por el método de la filtración de membrana. De acuerdo al RD 140/2003 y a la Directiva Europea 98/83/CE. COMENTARIOS Los clostridios hidrolizan la sacarosa formando colonias de color amarillo. Tras la exposición a vapores de amoniaco las colonias cambian a color rojo. Clostridium perfringens antes del revelado INSTRUCCIONES Filtrar 100 ml de la muestra de agua através de una membrana con un tamaño de poro de 0,45 µm. Usar pinzas estériles para colocar, con cuidado, la cara filtrada de la membrana boca arriba dentro de la placa de filtración. INCUBACIÓN Incubar en anaerobiosis durante (21 ± 3) horas a (44 ± 1) C. INTERPRETACIÓN Se consideran sospechosas todas laquellas colonias de color amarillo opaco. Proceso de revelado Soporte placa filtración Ref Q7080 m-cp revelador: Amoníaco 25% para síntesis, AM0257 Clostridium perfringens después del revelado CONFIRMACIÓN La placa se somete a los efectos de los vapores de hidróxido amónico (AM0257) durante un periodo de segundos. Se cuentan todas las colonias que siendo amarillas cambien a color rosa o rojo. SUPLEMENTOS Mezcla selectiva y cromogénica CASE m-cp AGAR BASE m-cp AGAR AMONÍACO, SOL. 25% SUPLEMENTO * * AM CASE 064-PF0030 *NECESITA LA ADICIÓN DEL SUPLEMENTO INHIBIDOR PARA M-CP CASE 7

8 ANÁLISIS DE LAS AGUAS SEGÚN NORMATIVAS UNE-EN-ISO FILTRACIÓN TIOSULFATO SÓDICO TRANSFERIR MEMBRANAS A LAS PLACAS AGAR CHAPMAN TTC (TERGITOL 7 AGAR) (36 ± 2) C - (21 ± 3) H. AGAR SLANETZ-BARTLEY (36 ± 2) C - (44 ± 4) H. AGAR m-cp (44 ± 1) C - (21 ± 3) H. ANAEROBIOSIS OXIDasa + -- RECHAZAR INDOL + -- E. coli RECHAZAR COLONIA NEGRA = Enterococcus sp. AGAR BILIS ESCULINA AZIDA (44 ± 0,5) C - 2 H. COLONIA SIN CAMBIO = RECHAZAR AMONÍACO CAMBIO A ROJO = Clostridium Perfringens SIN CAMBIO = RECHAZAR 8

9 Medios de cultivo deshidratados empleados en el análisis de aguas DETECCIÓN DE COLIFORMES TOTALES Y FECALES Para la detección de coliformes totales incubar a 37 C y para los fecales a 44 C. Chapman TTC Agar (Tergitol 7 Agar) g (ISO :2000) g E. coli Direct Agar (ECD Agar) g g Endo Agar Base g g Endo DEV Agar Base g g Endo LES Agar Base g g Endo MF Caldo Base g g Coliformes Fecales Agar (FC Agar) g g Coliformes Fecales Caldo (FC Broth) g g M 7 h FC Agar g g DETECCIÓN DE ENTEROCOCOS Bilis Esculina Azida Agar g (ISO :2001) g Kenner Fecal Agar (KF Agar) g g Kenner Fecal Caldo (KF Broth) g g Slanetz-Bartley Agar g (TTC incorporado) g Slanetz-Bartley Agar Base g (ISO :2001) g RECUENTO TOTAL DE AEROBIOS Nutritivo Agar g g Nutrietivo DEV Agar g g Recuento en Placa Agar (PCA) g g R2A Agar Ph. EU g g m-tge Caldo g g Triptona y Soja Agar (TSA) g g Tryptona Extracto de Levadura Agar g (ISO 6222:1999) g 9

10 Medios de cultivo deshidratados empleados en el análisis de aguas DETECCIÓN DE CLOSTRIDIOS m-cp (Clostridium perfringens) Agar Base g (RD 140/2003) (Directiva Europea 98/83/CE) g Hierro Sulfito Agar g g SPS AGAR (Clostridium Agar Selectivo) g g DETECCIÓN DE PSEUDOMONAS Cetrimide Agar (Pseudomonas Agar Selectivo) g g CN Pseudomonas Agar Base Selectivo g (EN ISO 12780:2002) g King B Agar (F Agar) g (EN ISO 12780:2002) g RECUENTO DE MICROORGANISMOS HETEROTRÓFICOS m-hpc g g DETECCIÓN DE ESTAFILOCOCOS Manitol Hipersalino Agar (Chapman Agar) g g DETECCIÓN DE MOHOS Y LEVADURAS Sabouraud Cloranfenicol Agar g g Sabouraud Dextrosado Agar g g 10

11 Medios sólidos preparados empleados en análisis de aguas Placas de filtración de 55 mm. Presentación en blister embolsado y sellado, que alarga la vida útil del producto; evitando el riesgo de deshidratación y la contaminación. DETECCIÓN DE COLIFORMES FECALES Y TOTALES Para la detección de coliformes totales incubar a 37 C y para los fecales a 44 C. Placas de filtración Chapman TTC Agar (Tergitol 7 Agar) (ISO :2000) 064-PF pl. 55 mm ø Coliformes Fecales Agar (FC Agar) 064-PF pl. 55 mm ø Las recientes normativas relativas al análisis de aguas de consumo humano, recomiendan el uso de medios de cultivo sólidos. Estos medios permiten más precisión en el recuento, evitan el exceso de agua y las colonias pueden crecer perfectamente separadas presentando la morfología típica. Una ventaja añadida respecto a la manipulación es que no necesita incubación en cámara húmeda. DETECCIÓN DE ENTEROCOCOS Bilis Esculina Azida Agar (ISO :2001) 064-PF pl. 55 mm ø Slanetz-Bartley Agar (ISO :2001) 064-PF pl. 55 mm ø RECUENTO TOTAL DE AEROBIOS Nutritivo Agar 064-PF pl. 55 mm ø recuento en Placa Agar (PCA) 064-PF pl. 55 mm ø Triptona y Soja Agar (TSA) 064-PF pl. 55 mm ø Tryptona Extracto de Levadura Agar (ISO 6222:1999) 064-PF pl. 55 mm ø DETECCIÓN DE CLOSTRIDIOS m-cp (Clostridium Perfringens) Agar 064-PF pl. 55 mm ø m-cp (Clostridium Perfringens) Agar 064PF0030C 12 pl. 55 mm ø SPS Agar (Clostridium Agar Selectivo) 064-PF pl. 55 mm ø DETECCIÓN DE PSEUDOMONAS Cetrimide Agar (Pseudomonas Agar Selectivo) 064-PF pl. 55 mm ø DETECCIÓN DE ESTAFILOCOCOS Manitol Hipersalino Agar (Chapman Agar) 064-PF pl. 55 mm ø DETECCIÓN DE MOHOS Y LEVADURAS Sabouraud Cloranfenicol Agar 064-PF pl. 55 mm ø Sabouraud Dextrosado Agar 064-PF pl. 55 mm ø 11

12 Medios líquidos preparados empleados en el análisis de aguas Los medios líquidos continuan siendo útiles en el análisis microbiológico (no de consumo humano), bebidas y líquidos en general. Nuestra presentación en ampollas monodósis de 2 ml, tiene una caducidad de más de 12 meses desde la fecha de fabricación. Permite su uso con cualquier membrana, para ello debe distribuirse el caldo en una almohadilla. VENTAJAS Larga vida útil Una ampolla por membrana DETECCIÓN DE COLIFORMES TOTALES Y FECALES Para la detección de coliformes totales incubar a 37 C y para los fecales a 44 C m-fc Caldo (Coliformes Fecales Caldo) 064PF0024V 25 Lauril Sulfato MUG Caldo 064PF0260V 25 Tergitol 7 Caldo (Chapman TTC Caldo) 064PF0003V 25 DETECCIÓN DE ENTEROCOCOS Slanetz-Bartley Caldo 064PF0004V 25 Ampollas de monodosis de 2 ml RECUENTO TOTAL DE AEROBIOS Nutrientivo Caldo 064PF0001V 25 Triptona Soja Caldo (TSB) 064PF0010V 25 DETECCIÓN DE CLOSTRIDIOS SPS caldo (Clostridium Caldo Selectivo) 064PF0002V 25 DETECCIÓN DE PSEUDOMONAS m-cetrimide caldo 064PF0005V 25 (Pseudomonas Caldo selectivo) DETECCIÓN DE ESTAFILOCOCOS Manitol Hipersalino caldo (Chapman caldo) 064PF0025V 25 12

13 Medios Cromogénicos Los medios cromogénicos ofrecen diferentes ventajas: son rápidos, selectivos y específicos. C.C. MEDIO CROMOGÉNICO TBX AGAR Medio cromogénico selectivo y diferencial para la identificación directa de Escherichia coli y de los coliformes presentes en aguas y alimentos. Puede usarse en técnicas de filtración. Medio selectivo y diferencial para recuento y detección de Escherichia coli ß-Glucoronidasa positivas en aguas y alimentos deacuerdo con las normas ISO y Puede usarse para el método de siembra en masa y el de filtración. PRINCIPIO Se basa en la detección de dos actividades enzimáticas: ß-D glucuronidasa (ß gluc) ß-D galactosidasa (ß gal) Después de incubar 24 horas a 37 C las colonias de E. coli aparecen de color azuly el resto de coliformes de color salmón. Mientras que el resto de enterobacterias no presentan coloración. PRINCIPIO El crecimiento de la flora acompañante se inhibe por la concentración de sales biliares junto con la incubación a alta temperatura. Después de sembrar la muestra, dilución o membrana, incubar a 44 C durante horas. Las colonias de E. coli ß-Glucoronidasa positiva aparecen de color verde-azulado característico. E. coli Enterobacter VENTAJAS COMUNES RÁPIDO Identificación y enumeración directas de coliformes y Escherichia coli en 24 horas. No necesita pruebas de confirmación FÁCIL DE USAR Fácil disolución LISTO AL USO No requiere aditivos Buen contraste de colores C.C. MEDIO CHROMOGENICO TBX AGAR PA

14 Presencia/Ausencia prueba COLIFORMES PRESENCIA/AUSENCIA CALDO Permite la detección directa, y de una forma sencilla, de la presencia o ausencia de coliformes totales y de Escherichia coli en muestras de agua. Sin crecimiento Crecimiento positivo coliformes COMENTARIOS Caldo cromogénico y fluorogénico que combina la prueba del enzima ß-D-Glucoronidasa y ß-D-Galactosidasa con la prueba del indol en un sólo medio listo al uso. E. coli INSTRUCCIONES Adicionar 100 ml de muestra problema en el frasco con este medio. INCUBACIÓN Incubar la muestra durante horas a C. INTERPRETACIÓN Los coliformes totales viran el medio a color verde. Escherichia coli emite fluorescencia bajo la luz UV, y da resultado positivo a la prueba del indol*. *PARA LA PRUEBA DEL INDOL, ADICIONAR 2-3 ML DE REACTIVO DE KOVACS (REF ). 100 ml 1000 ml PRESENCIA/AUSENCIA CALDO PARA COLIFORMES REACTIVO DE KOVACS 064-BACOLI

15 Pruebas de Diagnóstico PRUEBA DE OXIDASA Para la detección y comprobación de la citocromo oxidasa en los microorganismos productores de oxidasa como Neisseria sp. y Pseudomonas sp. Escobillones estériles e impregnados con reactivo de oxidasa, listos para el uso. Escobilones Prueba Oxidasa uds. ONPG positivo Prueba Oxidasa positiva Reactivo en polvo. Se prepara haciendo una solución acuosa al 1% del reactivo, una vez en solución su caducidad no supera una semana mantenida a abrigo de la luz y a 4 C. Reactivo de Oxidasa g PRUEBA ONPG Para la determinación de la actividad ß-D-galactosidasa en la identificación de enterobacterias. Prueba ONPG 064-TA tubos de 2 ml ONPG negativo PRUEBA DEL INDOL INDOL AGUA DE TRIPTONA Agua de triptona especialmente suplementada con triptófano para hacer la prueba del indol. REACTIVO DE KOVACS Clásica prueba para diferenciar Escherichia coli de las enterobacterias. También se usa para la diferenciación de otros microorganismos no entéricos. COMENTARIOS Muchos microorganismos pueden producir Indol a partir del triptofano gracias a la presencia del enzima triptofanasa, a través de un proceso favorecido por el oxígeno e inhibido por la glucosa. Los medios usados en esta prueba no han de contener glucosa, deben tener un alto contenido de triptófano, y deben ser incubados aeróbicamente. INSTRUCCIONES A partir de un cultivo puro se debe inocular el medio. INCUBACIÓN Incubar durante horas a 35 C. Esta incubación se puede reducir a unas 4 horas si se parte de un inóculo masivo en medio sólido y se siembra en un pequeño volumen de medio de cultivo (Prueba del Indol ref. 064-TA0132). CONFIRMACIÓN Después de la incubación proceder a la identificación con el reactivo de Kovacs. Reactivo de Kovacs ml frasco Reactivo de Kovacs ml frasco Agua de Triptona 064-TA tubos de 2 ml Agua de Triptona 064-TA tubos de 9 ml 15

16 Pruebas de Diagnóstico AGAR BILIS ESCULINA AZIDA Medio sólido para la prueba confirmativa de enterococos en aguas con la técnica de filtración de membrana. De acuerdo con UNE EN ISO :2001. BILIS ESCULINA AZIDA AGAR BILIS ESCULINA AZIDA AGAR PF0008 COLINSTANT TEST RÁPIDO PARA IDENTIFICACIÓN DE E. coli Prueba rápida para la identificación presuntiva de Escherichia coli. Caldo cromogénico de alta estabilidad que combina la prueba del enzima ß-D-Glucoronidasa y ß-D-Galactosidasa con la prueba del indol* en un mismo tubo listo al uso. Rápido, preciso, económico y de fácil manejo. Inoculando la colonia a investigar en el tubo, se puede proceder a la lectura de resultados en 2-3 horas. En caso de que se haya de prolongar la lectura más de 24 horas (cuando no se dispone de suficiente cantidad de microorganismo), no se producen falsos negativos debido a la alta estabilidad del cromógeno. Disponible en 20 tubos de 2 ml. *PARA LA PRUEBA DEL INDOL ADICIONAR UNAS GOTAS DE REACTIVO DE KOVACS (REF ). Coliformes E. coli 100 ml 1000 ml COLINSTANT TEST RAPIDO PARA LA IDENTIFICACIÓN DE E. coli REACTIVO DE KOVACS TACOLI Distribuido por: 16 Gato Pérez, 33. Pol. Ind. Mas d en Cisa Sentmenat, Barcelona Tel. pedidos: Fax pedidos: scharlab@scharlab.com Web: CAT-0AGUAS