NUEVOS MARCADORES Y NO TAN NUEVOS EN INMUNOHISTOQUIMICA DRA. ALEJANDRA ZARATE OSORNO HOSPITAL ESPAÑOL DE MEXICO OCTUBRE 2017
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- José Miguel Alarcón Lozano
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1 NUEVOS MARCADORES Y NO TAN NUEVOS EN INMUNOHISTOQUIMICA DRA. ALEJANDRA ZARATE OSORNO HOSPITAL ESPAÑOL DE MEXICO OCTUBRE 2017
2 INMUNOHISTOQUIMICA, REGLAS La IHQ se integra, NO REEMPLAZA a la morfología NO HAY UN ANTICUERPO ESPECIFICO de una entidad Se deben de solicitar perfiles (varios anticuerpos) deben INCLUIR AL MENOS UN ANTICUERPO NEGATIVO Sitio de reacción Filamentos intermedios Antígenos nucleares Marcadores de organelos Antígenos membranosos
3 FILAMENTOS INTERMEDIOS Citoqueratinas Vimentina Proteína ácida fibrilar glial Actina de músculo liso Desmina H-caldesmon CK Desmina
4 ANTÍGENOS NUCLEARES Proteínas relacionadas con el ciclo celular (Ki-67) Factores de transcripción nuclear (TTF-1, CDX-2, PAX-8, SAT-B2) Productos de genes supresores de tumor (p53) Enzimas nucleares (TdT, MLH-1, PMS-2) Receptores de hormonas esteroides (RE, RP) Proteínas que se unen al Ca (S-100) Virus (HSV, CMV, etc) CDX2 TdT
5 MARCADORES ESPECÍFICOS DE ORGANELOS Gp100 (HMB-45): premelanosomas vwf: cuerpos de Weibel-Palade CD68, lisozima: lisosomas Proteína mitocondriales: bcl-2 Gránulos citotóxicos: TIA-1, granzima B, perforina Gránulos de centro denso: cromogranina A sinaptofisina Bcl-2 Sinaptofisina
6 ANTÍGENOS MEMBRANOSOS Moléculas de adhesión celular (ecaderina) y al citoesqueleto (Bcatenina) Receptores de transmembrana (HER-2, EGFR) Antígenos de los leucocitos CD20 CD56
7 INTERPRETACION DE IHQ Casi siempre positivo Usualmente positivo No contributoria Usualmente negativo Casi siempre negativo Dr. Allen Gown Phenopath Laboratories Seattle, Washington
8 MARCADORES DE USO RECIENTE Tracto digestivo: CDX-2, Villina, SAT-B2 y HER-2 Inestabilidad de microsatélites: MLH-1, MSH-2, MSH-6 y PMS-2 Hígado: HepPar-1, Arginasa 1 y Glipican 3 Pulmón: TTF-1 y Napsin-A, proteína p40 Células germinales: OCT-4, SALL4, Glipican 3 Varios: GATA-3, PAX-8 Sarcomas: MUC4, DOG-1, INI1, IDH-1 Y IDH-2 Sistema Nervioso Central: IDH1, IDH2, ATRX y 1p/19Q Linfomas: c-myc
9 CK20 Villina CDX-2
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11 SAT-B2 Proteína 2 especial rica en AT Special AT-rich sequencial binding protein-2 Células epiteliales glandulares de TGI inferior Preservada en neoplasias colorectales Altamente sensible y específico (85%) Con CK20: 95%
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13 SAT-B2 CDX-2
14 HER-2 IN GASTRIC CANCER Path Case Rev 2014;19:
15 HER-2 EN ADENOCARCINOMA GASTRICO CRITERIOS PARA LA INTERPRETACION DEL c-erbb-2 EN CANCER GASTRICO Calificación Especimen quirúrgico-patrón de Biopsia-patrón de tinción tinción Sin reactividad o reactividad Sin reactividad en ninguna de las 0 membranosa en menos del 10% células de las células Reactividad membranosa Un grupo de células neoplásicas con 1+ incompleta débilmente reactividad membranosa incompleta, perceptible en >10% de las células débilmente perceptible, independiente del porcentaje Reactividad membranosa completa débil a moderada, basolateral o lateral en >10% de las células Reactividad membranosa completa, fuerte, basolateral o lateral en >10% de las células Un grupo de células neoplásicas con reactividad membranosa completa, débil a moderada, lateral o basolateral, independiente del porcentaje Un grupo de células neoplásicas con reactividad membranosa completa y fuerte, lateral o basolateral, independiente del porcentaje Sobreexpresi ón Negativo Negativo Equívoco Positivo Rüschoff J, Hanna W, Bilous M y cols. HER2 testing in gastric cancer: a practical approach. Modern Pathology 2012;25:
16 CK 7 CK 20 HER-2
17 MMR INESTABILIDAD DE MICROSATELITES Detección por IHQ de MMR: MLH-1, MSH-2, MSH-6 y PMS-2 Todas se expresan en todos los tejidos MSH2-MLH1 son los constituyentes dominantes de sus pares respectivos (MSH6 y PMS2) 90% de casos de síndrome de Lynch por IHQ
18 MLH1 MSH2 MSH6 PMS2
19 CARCINOMA HEPATOCELULAR MEJORES MARCADORES Hep-Par1 Arginasa-1 CEA+, CD10+ en canalículos biliares CK 7 y 20 negativos MOC 31 negativo
20 (Am J Surg Pathol 2010;34: )
21 Antígeno específico de los hepatocitos Sintetasa fosfatocarbamoil del ciclo de la urea Expresión citoplásmica difusa normal y neoplásico Sensibilidad y especificidad > 90% ARGINASA-1
22 Arginasa-1 HepPar-1 CEA pc CD10
23 GLIPICAN 3 Proteoglicanos heparan-sulfato Embrión: Crecimiento celular Diferenciación Migración TEJIDOS ADULTOS: CELULAS NEOPLASICAS Hepatocarcinoma Melanoma Tumor de senos endodérmicos Carcinoma ovárico endometrioide y células claras Ca de células de Merkel Focal a difuso, débil a fuerte Expresión en hepatocitos: evolución a procesos malignos
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25 MARCADORES DE CANCER PULMONAR NAPSIN-A CK 7 y TTF-1 NAPSIN-A Novel Aspartic Proteinases of the Pepsin Family Más sensible y específico que TTF-1 Tinción citoplásmica granular Positivo en: Tumores renales Ca células claras ovario Macrófagos
26 (Adv Anat Pathol 2012;19:66 73)
27 Pulmón y riñones Expresión regulada por TTF-1 Neumocitos alveolares tipo II Negativos: Neuroendocrinos Mmucinoso Células pequeñas Escamoso NAPSIN-A
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29 CK 5/6 P40
30 ALK Y CARCINOMA DE PULMON DE CELULAS NO PEQUEÑAS
31 PDL-1 EN CARCINOMA DE PULMON
32 PDL-1 IHQ Phenopath Laboratories, Seattle WA
33 PDL-1 Ca Imm Res 2016
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45 MARCADORES DE USO RECIENTE Tracto digestivo: CDX-2 y Villina, HER-2 Pulmón: TTF-1 y Napsin-A, proteína p40, PDL-1 Hígado: HepPar-1, Arginasa 1 y Glipican 3 Células germinales: OCT-4, SALL4, Glipican 3 Sarcomas: MUC4, DOG-1, INI1, IDH-1 Y IDH-2 Sistema Nervioso Central: IDH1 y IDH2 Inestabilidad de microsatélites: MLH-1, MSH- 2, MSH-6 y PMS-2
46 MARCADORES DE USO RECIENTE Tracto digestivo: CDX-2, SAT-B2 y Villina, HER- 2 Pulmón: TTF-1 y Napsin-A, proteína p40 Hígado: HepPar-1, Arginasa 1 y Glipican 3 Células germinales: OCT-3/4, SALL4, Glipican 3 Varios: PAX-8 Sarcomas: MUC4, DOG-1, INI1, IDH-1 Y IDH-2 Sistema Nervioso Central: IDH1 y IDH2 Inestabilidad de microsatélites: MLH-1, MSH-
47 MARCADORES DE USO RECIENTE Tracto digestivo: CDX-2 y Villina, HER-2 Pulmón: TTF-1 y Napsin-A, proteína p40 Hígado: HepPar-1, Arginasa 1 y Glipican 3 Células germinales: OCT-4, SALL4, Glipican 3 Varios: PAX-8 Sarcomas: MUC4, DOG-1, INI1, IDH-1 Y IDH-2 Sistema Nervioso Central: IDH1 y IDH2 Inestabilidad de microsatélites: MLH-1, MSH- 2, MSH-6 y PMS-2
48 OCT-4 TUMORES DE CELULAS GERMINALES OCT-4, SALL4 y GLIPICAN 3 FT expresado en células madre y germinales Muy sensible y específico SALL 4 FT, cromosoma 20 Circuito regulatorio con OCT3-4 pluripotencia de células primitivas embrionarias Todos los tumores de células germinales Glipican 3 Tumor de senos endodérmicos Hepatocarcinomas
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50 SALL-4 CK AE1/3 CD30
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52 Glipican 3 CKAE1/3 AFT
53 TUMORES DE CELULAS GERMINALES Disgerminoma/ Seminoma OCT-3/4 SALL 4 CD30 CK AE1/3 Glipican 3 CD117 PLAP /+ - +/- +/- Ca Embrionario Saco Vitelino Coriocarcinoma Teratoma Neoplasia Intratubular -/ /- +/-
54 Factor de transcripción Familia G-A-T-A Urotelio Ductos mamarios Mucosa escamosa Linfocitos T Ca renal cromófobo Mesoteliomas Epitelio escamoso Páncreas GATA-3
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58 GATA 3
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60 MARCADORES DE USO RECIENTE Tracto digestivo: CDX-2 y Villina, HER-2 Pulmón: TTF-1 y Napsin-A, proteína p40 Hígado: HepPar-1, Arginasa 1 y Glipican 3 Células germinales: OCT-1, SALL3, Glipican 3 Varios: PAX-8 Sarcomas: MUC4, DOG-1, INI1, IDH-1 Y IDH-2 Sistema Nervioso Central: IDH1 y IDH2 Inestabilidad de microsatélites: MLH-1, MSH- 2, MSH-6 y PMS-2
61 INI-1 INI1: miembro del complejo remodelante multisubunidad de cromatina SWI/SNF Brazo largo del cromosoma 22 Expresión nuclear en todos los tejidos y células normales (control interno positivo) Inactivación: Tumores rabdoides malignos de la infancia (renal y SNC) Sarcoma epitelioide Tumor fibromixoide osificante de partes blandas Ca mioepitelial de partes blandas Propensión a citomorfología rabdoide
62 (Am J Surg Pathol 2011;35:e47 e63)
63 TUMOR RABDOIDE MALIGNO
64 SARCOMA EPITELIOIDE INI1
65 Modern Pathology (2005) 18,
66 Adhesión y signalización Fibromatosis: Mutación en la vía APC/beta catenina Acumulación nuclear anormal Fibromatosis mesentérica GIST Mesenteritis esclerosante Beta-catenina
67 B-catenina nuclear TUMORES POSITIVOS Fibromatosis de tipo desmoide Tumor fibroso solitario Sarcoma del estroma endometrial Sarcoma sinovial Tumores epiteliales Adenocarcinoma colorrectal Adenocarcinoma endometrial Carcinoma pancréatico sólido pseudopapilar
68 CK 7 TLE-1
69 SARCOMA SINOVIAL: FISH t(x;18)
70 MUC-4 SARCOMA FIBROMIXOIDE DE BAJO GRADO MUC4 AML AEM CD34
71 TUMOR MIOFIBROBLASTICO INFLAMATORIO AML AEM ALK
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73 SISTEMA NERVIOSO CENTRAL IDH ATR-X Deleción 1p/19q Proteína p53 Ki-67
74 IDH-1 Mutación gen isocitrato deshidrgenasa-1 dependiente de NADP+ Citoplasma y núcleo (débil) 70-80% OMS II-III 50-80% GBM secundarios 5% GBM primarios Rara/ausente en niños Oligodendrogliomas: asociación con codeleción (1p/19q) Mejor pronóstico Ausencia no excluye glioma Adv Anat Pathol 2012;19: Adv Anat Pathol 2015;22:50-58
75 ATR-X Proteína mutada en algunos gliomas Alfa talasemia/síndrome de retraso mental ligada a X Deficiencia/pérdida/mutación Crecimiento rápido Inestabilidad genética Más susceptibles a tratamiento (Rx y CHO) Mutuamente excluyentes con la deleción 1p/19q
76
77 OLIGODENDROGLIOMA DELECION 1p/19q
78 C-myc y linfomas
79 FISH PARA C-MYC
80 FISH PARA C-MYC
81 MUCHAS GRACIAS POR SU ATENCION
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