18 Curso de Actualización en el Diagnóstico y Tratamiento de la Tuberculosis en el Niño y el Adulto

Transcripción

1 18 Curso de Actualización en el Diagnóstico y Tratamiento de la Tuberculosis en el Niño y el Adulto 2014

2 Métodos convencionales para el diagnóstico de la Tuberculosis Biol. Susana Balandrano C. Instituto de Diagnóstico y Referencia Epidemiológicos Depto. Bacteriología. Laboratorio de 2014 Micobacterias

3 Tuberculosis La tuberculosis es una enfermedad infecciosa, crónica, curable. Se transmite por vía aérea de un enfermo con Tb pulmonar a una persona sana. La Tb pulmonar es la forma más común de esta enfermedad; ocurre en más del 80% de los casos.

4 Tuberculosis La tuberculosis pulmonar confirmada por baciloscopía es la fuente de infección más frecuente y constituye el objetivo fundamental de las actividades de detección, diagnóstico y tratamiento para el control de la Tuberculosis. NOM-006-SSA Para la prevención y control de la tuberculosis

5 Diagnóstico La confirmación del diagnóstico de la tuberculosis se establece en el laboratorio mediante la observación o el aislamiento e identificación del agente causal en una muestra clínica obtenida del sujeto en estudio.

6 Diagnóstico Baciloscopia BACTERIOLOGÍA Cultivo.

7 Es la técnica de elección para confirmar los casos infecciosos (pulmonares). La Baciloscopia

8 Indicaciones de la Baciloscopia para diagnóstico Cualquier muestra clínica excepto orina. A todo sintomático respiratorio sospechoso de tuberculosis. Contactos sintomáticos de un caso de tuberculosis. Sospechosos de tuberculosis con manifestaciones clínicas o radiológicas. Grupos o poblaciones de alto riesgo. NOM-006-SSA Para la prevención y control de la tuberculosis

9 Baciloscopía Ácido alcohol resistencia Es la propiedad que tienen las micobacterias de captar en su pared fucsina fenicada o auramina y retenerla, aún con la acción decolorante con mezcla de ácido y alcohol. Se debe al alto contenido de lípidos (ácidos micólicos) que poseen las micobacterias en su pared celular.

10 Baciloscopia Muestra Preparación de frotis Tinción de Ziehl-Neelsen Lectura

11 Reporte de la baciloscopia Negativo:No se observan bacilos ácido-alcohol resistentes en 100 campos microscópicos. De 1-9 BAAR: Informar el número de bacilos en 100 campos observados. Positivo (+): Menos de un bacilo por campo en promedio (de 10 a 99 bacilos), en 100 campos observados. Positivo (++): De uno a diez bacilos por campo en promedio en 50 campos observados. Positivo (+++): Más de 10 bacilos por campo en 20 campos observados.

12 Indicaciones de la Baciloscopia para control del tratamiento En el TAES se realiza el seguimiento mediante una baciloscopia mensual. Confirmación de curación. En el control de tratamiento como indicador pronóstico de su eficacia en casos TBMDR(mensual). NOM-006-SSA Para la prevención y control de la tuberculosis

13 Baciloscopía VENTAJAS Simple y poco costosa Detecta rápidamente los casos infecciosos. Bioseguridad. Amplia cobertura. DESVENTAJAS Poca sensibilidad. Poca especificidad.

14 Baciloscopía LIMITACIONES No distingue a M. tuberculosis de otras micobacterias Organismos viables de los no viables. Bacilos sensibles de los resistentes.

15 CONTROL DE CALIDAD DE BACILOSCOPÍAS RELECTURA DE LÁMINAS De los LESP s a los laboratorios locales AÑO Láminas evaluadas Láminas (+) Falsas (+) Concordan cia (%) Láminas (-) Falsas (-) Concordan cia (%) TOTAL Informe Mensual de Microscopía y Cultivo. InDRE RELECTURA DE LÁMINAS Del InDRE a los LESP s Año Meses supervisad os promedio Total de laminillas recibidas Total de laminillas revisada % revisado Positivas Falsas (+) % Concordan cia (+) Negativas Falsas (-) % % Concordan Concordan cia (-) cia total 2009 No disponible , ,3 99, , ,3 99, , ,4 99,

16 PRUEBA DE DESEMPEÑO Del InDRE a la Red de Laboratorios PERÍODO MICROS- COPISTAS APROBADOS CONDICIONADOS REPROBADOS No % No % No % Fuente: Laboratorio de Micobacterias. InDRE Año Instituciones Microscopistas Aprobados Condicionados Reprobados evaluados No. % No. % No. % IMSS PEMEX * ISSSTE Total ** 2010* 2012** IMSS PEMEX ISSSTE Total De los 1190 microscopistasevaluados para este año, 121 fueron de otras instituciones. De los 1180 microscopistasevaluados para este año, 42 fueron de otras instituciones.

17 CULTIVO Mediante esta técnica es posible hacer que los bacilos presentes en una muestra se multipliquen in vitro, hasta formar colonias en un medio sólido, turbidez en uno líquido o hasta que algún sensor incorporado en el medio cambie de color o emita fluorescencia cuando los bacilos consumen O 2 o liberan CO 2

18 CULTIVO Características del M. tuberculosis Crecimiento lento (división binaria de 18 a 22 horas). Crece en presencia de oxígeno, a un ph de 6.8 a 7.2.

19 CULTIVO: método de Petroff Muestra NaOH 4% Agitar en vortex Incubar a 37ºC Centrifugar a 3000 G Neutralizar Sembrar en medio LJ Incubar a 37ºC

20 Reporte del cultivo Negativo: No se observan colonias. De 1-19 BAAR: Informar el número de colonias. Positivo (+): De 20 a 100 colonias. Positivo (++): Más de 100 colonias, sin cubrir toda la superficie del medio. Positivo (+++): Colonias incontables, crecimiento confluente..

21 Identificación Los cultivos positivos tienen que ser identificados para diferenciar M. tuberculosis de micobacterias no tuberculosas (MNT), cuya prevalencia varía de país a país y que son más comunes en pacientes con VIH. El tratamiento para MNT es totalmente diferente del tratamiento para la TB farmacorresistente. Es indispensable que todo laboratorio que realice PFS identifique prev iamente el cultivo, para diferenciar M. tuberculosis de MNT.

22 Diagnóstico Indicaciones para el cultivo Pacientes con tres baciloscopias negativas y sospecha clínica y radiológica de Tb. Tuberculosis extrapulmonar. Tuberculosis renal o genitourinaria. Tuberculosis en niños. Sospecha de Tuberculosis en pacientes VIH / SIDA y/o diabetes descompensada. NOM-006-SSA Para la prevención y control de la tuberculosis

23 Aporte del cultivo al diagnóstico TB Baciloscopia + Baciloscopia-/ Cultivo + Cultivo -/ diagnóstico por Radiología / clínica / epidemiología 100% 90% 80% 70% 60% Aporte del cultivo al diagnóstico de tuberculosis 50% 94% 40% 30% 20% 10% 0% Todos los casos Tuberculosis pulmonar Tuberculosis pulmonar con cultivo + Tuberculosis infecciosa Manual para el diagnóstico de la tuberculosis Cultivo OPS / OMS

24 Control de tratamiento Indicaciones para el cultivo En pacientes en tratamiento, en quienes al segundo mes persiste la baciloscopía positiva. Para confirmar la curación o fracaso del tratamiento. Pruebas de identificación y sensibilidad. NOM-006-SSA Para la prevención y control de la tuberculosis

25 Control de tratamiento en farmacorresistencia Indicaciones para cultivo Diagnóstico en pacientes previamente tratados. Pacientes que al término de la fase intensiva del tratamiento tienen Bk + Para control bacteriológico de los casos TBMFR (BK mensual y cultivo bimensual) Previo al inicio del tratamiento en pacientes contacto de un caso de Tb MFR En casos de reingreso por recaída o fracaso. En SR con DM descompensada que viven en zonas de alta incidencia de Tb FR Para confirmar y ampliar los estudios de pacientes identificados con nuevas técnicas (Xpert-TB RIF, biología molecular, etc.). Para investigaciones epidemiológicas, terapéuticas y bacteriológicas. NOM-006-SSA Para la prevención y control de la tuberculosis

26 CULTIVO VENTAJAS Técnica más sensible que provee un diagnóstico definitivo. Aumenta significativamente el número de casos confirmados (15-30%). Puede detectar casos más tempranamente, aún antes de llegar a ser infecciosos.

27 Cultivo DESVENTAJAS Mayor tiempo para obtener resultados. Mas costoso. Necesita equipo especial. Mayor preparación de personal Bioseguridad

28 Control de Calidad del cultivo Caminando a la excelencia Año Área Recibidas Rechazadas Discordantes Contaminación Identificación Positivas 2010 País País País País Medio de cultivo Löwenstein Jensen MGIT 31+3 Todos los LESP +INER,HGM y INCMNSZ 15 Ags.,BC.(x2),Coah.,Chis.,Chih.,Jal.,NL.,Mex.,Pue.,SLP, Ver.,INER, HGM y INCMNSZ Manual para el diagnóstico bacteriologico de la tuberculosis. Normas y guia tecnica. Cultivo. OPS / OMS Fuente: Base de datos LRN de Micobacterias, InDRE.

29 Control de Calidad del medio de cultivo Año No. de Round No. de Estados Calidad de Lotes Tipo de medio Invitados Participantes Adecuado Inadecuado Caseros Comerciales Chis, Mex, Gro, Jal, NL, Sin, Son, Ver.(8) Chis, Mex, Gro, NL, Sin, Son, Ver.(7) Ags, Chih, Hgo, Tab.(4) Ags, Chih, Qroo.(3) Chis. Mex. Gro. Jal. N.L. Sin. Son. Ver (8) Chis. Mex. Gro. Jal. N.L. Sin. Son. Ver (8) Ags.Coah. Chih. BC ( Mexicali- Tijuana). Tab. Q.Roo (7) Ags.Chih. BC ( Mexicali- Tijuana). Gto. Hgo. Tab. (7) BC (Tijuana), Chis, Gro, Jal, BC (Mexicali), NL, Sin, Son y Mexy Oax(3) Ver (8) Producción de medio de cultivo Fuente: Laboratorio de Micobacterias. InDRE Medio de Cultivo Año Lowenstein Jensen Stonebrink Total

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