Análisis Bacteriológico del Caño Martin Peña y las Lagunas del Estuario de San Juan

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1 Análisis Bacteriológico del Caño Martin Peña y las Lagunas del Estuario de San Juan Click to edit Master subtitle style Estudiantes de Investigación: 9/8/20 Inea E. García Arisha Crespo Ivangs M. Rivera Consejera y Profesora Catedrática: Mayra Rolón

2 Fase I 9/8/20

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4 Introducción 9/8/20 Estudio realizado en el Caño Martín Peña y las Lagunas del Estuario Ubicación del Caño: Conecta la Bahía de San Juan con la Laguna San José Latitudes N 18 25'59.68"N longitud W 66 3'31.29"W

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6 Propósito 9/8/20 Realizar análisis bacteriológicos en cuerpos de agua del estuario de la Bahía de San Juan Detectar grados de contaminación en los cuerpos de agua

7 Historia del Caño Martín Peña El caño en el pasado: 1917-Tanques del ejército transitaban se rellenan con tierra partes del caño Huracán San Ciprián

8 Historia del Caño Martín Peña Primeras comunidades en adelante- Proyecto Enlace Caño Martín Peña USC se integra al monitoreo de la calidad del agua Caño Martín Peña

9 Trasfondo Histórico Dimensione s

10 Comunidad en el pasado y actual 9/8/20

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13 (2 colonias/ml) Marco Teórico 9/8/20 Calidad del agua Satisfactoria para consumo humano debe estar libre de microbios Coliformes :

14 Marco Teórico 9/8/20 Indicadores de contaminación Apariencia Heces Fecales Desechos

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16 Click to edit Master subtitle style 9/8/20

17 Qué es un Coliforme? Bacterias bacilos Gram-negativas, Son indicadores de contaminación en aguas y alimentos. No son productoras de esporas Capaces de

18 Analizó las lagunas del Estuario de San Juan. Monitoreo del Caño y las Lagunas 9/8/20 por Jorge Bauzá Jorge Bauzá - científico ambiental del Estuario de la Bahía de San Juan. Analizó muestras en septiembre y octubre 2008 del Caño Martín Peña. En el Caño Martín Peña encontró 200,000colonias de bacterias/0ml de muestra.

19 Metodología Métodos y Materiales

20

21 Técnicas Utilizadas Determinación del Número Más Probable(MPN) Método de Filtración Diluciones en Serie

22 Determinación del Número 9/8/20Más Probable(MPN) Basado en probabilidad estadística. Consiste de tres fases : Fase presuntiva Fase confirmatoria Fase Completa

23 I Fase Presuntiva (MPN) Presunción Fermentación de azúcar lactosa Inoculación de 15 tubos con Durhan para detención de gas. Se inoculan diferentes

24 I Fase Presuntiva (MPN) Observación de fermentación de lactosa Cambio colorimétrico Presencia de gas

25 II Fase Confirmatoria (MPN) Confirmación de coliformes en la muestra. Fermentación de Lauril Sulfato Producción de gas Incubación 18 a 24 hrs C

26 II Fase Confirmatoria (MPN) Observación de fermentación del Lauril Sulfato Cambio colorimétrico Presencia de Gas

27 Procedimiento del (MPN)

28 III Fase Completa(MPN) Se identifican los tubos fermentados con gas. Calcular el índice del NMP con tablas de referencias. Se estima el índice mas probable /0ml de muestra.

29 Tabla MPN 9/8/20

30 Otras Técnicas Bacteriológicas Método de Filtración Diluciones en Serie

31 Método de Filtración /8/20 micras Técnica para aislar las bacterias presentes en la muestra. Consiste en la separación física de las bacterias por medio de membranas Facilita conteo de

32 Método de Filtración /8/20 micras Observación y cuantificación Filtros de acetato de nitrocelulosa policarbonatos de 0.45 micras. Se filtra el agua de la muestra. Se remueve asépticamente la membrana

33 Método de Filtración 0.45 micras Identificación Taxonómica LF+ Se coloca en un medio nutritivo selectivo para coliformes. (EMB) Se incuba de 18 a 24 hrs en C

34 Método de Filtración 0.45 micras Observación y cuantificación de colonias en membrana Texturas Formas Cantidad de colonias Colores (purpuras o rosadas)

35 Identificación Taxonómica Prueba de enterotubos Identificación de bacterias aisladas LF+

36 Diluciones en serie 9/8/20 Es un análisis cuantitativo para calcular #bacteria/ml de agua B0= (D)Dilución(C) Colonias contadas Se utiliza el método

37 Diluciones en Serie Se emplea agar selectivo para coliformes como el EMB Se realizan diluciones desde 2 hasta 7 Diferentes volúmenes son mezclados con agar derretidos en platos petri.

38 Diluciones en Serie Luego del período de incubación: Observación de crecimiento de colonias desde 7 hasta 2 Conteo colonial para el estimado de B0

39 Diluciones en Serie 9/8/20 Prueba de enterotubos Identificación taxonómica de bacterias aisladas

40 Resultados de pruebas Caño Martin Peña y Estuario de la Bahía de San Juan Fase I y II

41 Resultados Fase I

42 Resultados de Numero Mas Probable 9/8/20 del Caño Martín Peña y Lagunas del Prueba MPN resulta: Estuario de San Juan -Bacterias fermentaron lactosa -Bacterias fermentaron lauril sulfato -Cambios colorimétricos de rojo a amarillo (Lactosa)

43 Resultados de Filtración del Caño 9/8/20 Martín Peña Estación #1: Crecimiento bacterial en membrana Estación #2: Crecimiento bacterial Estación #3: Crecimiento bacterial

44 Tabla de Filtración Caño Martín Peña

45 Resultados de Filtración de 9/8/20las Lagunas del Estuario de San Juan Torrecilla: Crecimiento de colonias bacteriales Corozos: Crecimiento de colonias Canal Suarez: Crecimiento de colonias

46 Tabla de Filtración de las Lagunas del Estuario de San Juan

47 Diluciones en serie del Caño Martín 9/8/20 Peña Estacion#1: (2)(,000,000)= 20,000,000 bacterias/ml de H2O Estacion#2: (2)(0,000)= 200,000 bacterias/ml de H2O Estacion #3: (2)(0,00)=200,000 bacterias/ml de H2O

48 Resultados del Caño Martín Peña

49 Comparación del Caño Martín Peña desde el 2000 al 20

50 Diluciones en serie del Estuario de la Torrecilla= (1)(,000,000)=,000,000 Bahía San Juan C. Suarez= (2)(,000,000)= 20,000,000 Corozos=(3)(,000)= 30,000

51 Resultados Estuario de la Bahía de San Juan

52 Comparación Estuario de la 9/8/20 Bahía de San Juan 2009 al 20

53

54 Bacterias aisladas del Caño Martin Peña Estación #1: -Enterobacter cloacae - E. coli 9/8/20 Estación #2: -Enterobacter aerogenes -E. coli

55 Bacterias aisladas del Estuario E. coli Serratia marcencens Klebsiella pneumoniae Enterobacter cloacae

56 Resultados Fase II

57 Número mas probable (MPN)

58 Fermentación de Lauril Sulfato

59 Filtración de membrana del Caño Martín Peña

60 Filtración de membrana de la laguna Los Corozos

61 Diluciones en serie del Caño Martin Peña

62 Diluciones en serie Caño Martín Peña

63 Diluciones en serie de la laguna Los Corozos

64 Diluciones en serie de la laguna los Corozos

65 Enterotubos 9/8/20 Caño Martín Peña (Bacterias aisladas) - E.coli - Enterobacter cloacae - Klebsiella ozaenae Los Corozos - E. coli - Klebsiella ozaenae

66 Conclusión Click to edit Master subtitle style 9/8/20

67 Conclusión 9/8/20 El alto grado de contaminación se debe a múltiples factores. Entre ellos: Falta de recogido de escombros con mayor regularidad. Depósito continuo de escombros por los mismos residentes y comercios aledaños.

68 Contaminación continua de basura. 9/8/20 Conexión con otros cuerpos de aguas contaminados. (Lagunas del estuario) Agua estancada en muchas áreas. Observamos fluctuaciones del grado de contaminación en algunos años.

69 Los participantes de este proyecto recomiendan lo siguiente: 9/8/20 Priorizar los esfuerzos del proyecto del dragado y limpieza del Caño y todo el estuario. El gobierno debe ser más agresivo en los esfuerzos de recogido de escombro. Se debe hacer mas sistemático en el proceso de

70 Referencias: 9/8/20 Harley & Prescott Microbiology 6th Edition, WCB. Mc Graw Hill. Harley & Prescott Laboratory Exercises in Microbiology 6th Edition, WCB. Mc Graw Hill. Swewzyk, U. Swewzyk, R Manz, W. & Schleider, K Microbiology safety of drinking water. Annu. Rev. Microbiol. 54: Webb, Richard. (1996, March). Sediment and Water Quality of the San Juan Bay Estuary. Paper presented at 3rd Puerto Rican Conference of Sanitary Engineering and Environmental Sciences: Assimilative Capacity of the Environment, Fundamental Element

71 Referencias: 9/8/20 Direcciones electronicas: Rivera Z. (N.D). Comparación de coliformes y colífagos como indicadores microbiológicos de la calidad del agua en los embalses dos bocas y las curias en Puerto Rico. Recuperado en Mayo 4 de (N.A). (2009). Programa del estuario de la bahia de San Juan. Recuperado en Junio 6 de (N.A.). (2006). Puerto DRNA, navega por el ambiente. Departamento de recursos naturales. Recuperado en Junio 6 de Marrero Ortiz, Roberto. (1998). Análisis Inmunológico para la Detección de Compuestos Orgánicos Tóxicos en aguas de la Laguna San José, Estuario de la Bahía de San Juan, PR. Recuperado Febrero 15

72 Referencias: 9/8/20 Martínez V. (N.D.) Estudio preeliminar del sistema estuarino del caño portugués del sector La Playa de ponce. Recuperado en Mayo 4 de López, L. (20). Once municipios en estado de emergencia. Vocero de Puerto Rico. Recuperado en Junio 6 de 20. once-municipios-en-estado-de-emergencia.html Feliú M. (2007). Resurge el Caño Martín Peña. Ciencia PR. Recuperado en Junio 6 de 20. Chacón C. (2009). Enterobacterias. Bacteriología médica. Recibido en Junio 7 de 20.

73 Gracias 9/8/20

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