Microbiota del tracto gastrointestinal

Transcripción

1 COPROCULTIVO

2 Microbiota del tracto gastrointestinal Se establecen en las primeras semanas de vida y permanece cte. Bacilos gram positivos esporulados y no esporulados anaerobios y bacilos gram negativos anaerobio facultativos.

3 Nat. Med. 22 (7), , 2016

4 De la sopa amarilla al sucedáneo sintético El trasplante fecal es una vieja práctica. Ya en el siglo IV lo realizaban en China, por vía oral, mediante sorbos de lo que llamaban la sopa amarilla. Otras culturas mantienen la costumbre de hacerle tragar al recién nacido una minúscula porción de las heces maternas, para activar lo antes posible el sistema inmunológico del bebé.

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6 Las heces de un adulto normal contienen entre a bacterias en el colon. En el intestino delgado existen entre 100 y 1000 bacterias por ml. En el ileón terminal no excede de 10 7 por ml.

7 Agentes etiológicos del síndrome VIRUS Rotavirus Afecta niños < 2 años Incubación: 2 días Dosis infectiva: <100 virus Vómito y diarrea acuosa 3-8 días, fiebre y dolor abdominal Estable en el ambiente diarreico

8 Parvovirus Tiene un papel incierto en la patogenia No relacionado con el consumo de alimentos contaminados. Pero esta presente en crustáceos y almejas

9 PROTOZOARIOS Giardia lamblia Pacientes pediátricos 20% población mundial infectada de manera crónica Quiste es la forma infectante (infectividad <10) Diarrea abundante por más de una semana

10 Entamoeba histolytica Cualquier edad 1 de cada 10 infectados presenta síntomas Diagnóstico confuso

11 Las bacterias pueden causar cuadros diarreicos a través de 2 mecanismos A) La producción de toxinas. ECET, ECEH, Vibrio cholerae, V. parahemolyticus, C. difficile, Bacillus cereus B) La invasión de la mucosa intestinal. ECEP, ECEA, ECEI, Salmonella enteritidis, Shigella sp, Yersinia enterocolitica y Campylobacter jejuni

12 Clasificación de las diarreas Las diarreas Voluminosas sin sangre, sin leucocitos asociadas a deshidratación, sin fiebre sugieren afectación del intestino delgado Microorganismos toxigénicos.

13 Las evacuaciones frecuentes Poco volumen Material purulento y/o sangre Dolor Fiebre Deshidratación moderada Son indicativas de trastornos en el intestino grueso por bacterias invasivas.

14 Transporte y recolección de la muestra Los especímenes más empleados son Evacuaciones rectales, Contenidos duodenales, Vómito, En algunos casos, médula ósea y sangre.

15 Recolección de muestra de rutina Frasco de vidrio de boca ancha con tapón de rosca, libre de desinfectantes, detergentes y jabones. Recipientes de cartón encerado con tapa hermética de plástico.

16 Cómodos Desventajas contaminación de la muestra con orina o residuos de detergentes.

17 Hisopo rectal Principalmente en paciente pediátricos El hisopo se introduce hasta rebasar el esfínter anal. Se rota cuidadosamente.

18 Proctoscopia o sigmoidoscopia Ventaja: la muestra es obtenida de la región más afectada

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20 Procesamiento de la muestra Los especímenes se analizan tan rápido como sea posible. Shigella es sensible a los cambios de temperatura y ph. Procesamiento de 2-3 h, deben usarse medios de transporte. Amortiguador de fosfatos 0.03 M + glicerol (1:1) ph 7.0. (excepto V. parahemolyticus y C. jejuni) Cary Blair (1:10) + rojo de fenol

21 Si la evacuación es sólida, diluir 1:10 con SSI Cuando la muestra presenta moco o sangre, este material se selecciona y se siembra sin diluir. Coprocultivo convencional: E. coli (pacientes pediátricos) Salmonella o Shigella

22 Detección de E.coli productoras de diarrea Siembra directa en EMB 24 h a 37 C. 6 a 10 colonias nucleadas o con brillo metálico, siembra en gelosa sangre o TSA 24 h a 37 C. Prueba de aglutinación con acriflavina (1:500). Serología a las colonias que no aglutinaron

23 ETAPAS DE UN COPROCULTIVO Detección de Salmonella y Shigella Transporte Cary Blair Enriquecimiento Caldo tetrationato y selenito (o Rapaport Aislamiento Agar SS, XLD, VB, etc. Diferenciación Colonias Lac negativas Identificación Tipificación KIA, Citrato, SIM, Urea, etc. Sueros polivalentes y monovalentes

24 Detección de Salmonella y Shigella Enriquecimiento selectivo. Caldo selenito cistina Caldo tetrationato + lugol + verde brillante Incubar máximo 18 h a 35 C realizar resiembra en medios selectivos y diferenciales

25 Aislamiento en medios selectivos y diferenciales

26 Bioquímicas y serología

27 Vibrio cholerae Causante del cólera Diarreas voluminosas y vómito 2 biotipos: clásico y El Tor 2 serotipos: Inaba y Ogawa (Hikojima) Secreción de CT (colerágeno)

28 El tor En 1905 se aisló por primera vez en una estación de cuarentena El Tor en el golfo de Suez Nombre árabe del monte donde Moisés recibió las "Tablas de la Ley"

29 Detección de V. cholerae. Enriquecimiento selectivo en agua peptonada alcalina (AWP ph 8.5) Aislamiento selectivo en TCBS (Tiosulfato Citrato sales Biliares Sacarosa) Selección de 3 colonias típicas amarillas, grandes, planas con centro opaco. Serología (antígeno O) Prueba de string (desoxicolato de sodio 0.5 %) Bioquímicas: oxidasa (+) KIA, VP

30 Características microscópicas Bacilos Gram (-) en forma de coma Moviles No esporulados

31 Hemolisis

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35 Nat. Rev. Microb. 2009,(7) En base a la antigenicidad del antígeno O existen más de 200 serogrupos Las cepas virulentas contienen un fago lisogénico que produce la toxina

36 Dosis infectiva 10 8 a en voluntarios sanos Dosis 10 4 a 10 8 Cuando se administró bicarbonato

37 Nat. Rev. Microb. 2009,(7)

38 El manejo clínico del paciente no depende del agente etiológico. La restitución de líquidos y electrolitos de forma oral o intravenosa es necesaria para corregir la deshidratación. El conocimiento de la especie, biotipo o serotipo sólo tiene significado epidemiológico

39 SUERO ORAL Ingredientes: 1 litro de agua hervida, el jugo de un limón, dos cucharadas soperas de azúcar, una cucharadita cafetera de bicarbonato y media cucharadita de sal.