NOVEDADES EN CLSI 2010
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- Miguel Ángel Salas Campos
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1 NOVEDADES EN CLSI 2010 VIII CURSO DE MICROBIOLOGIA CLINICA SOCIEDAD CHILENA DE INFECTOLOGIA 3-4 MAYO 2010 Dra. Rossanna Camponovo Medico Microbiólogo Laboratorio Integramedica
2 Revisión basada en: M100-S * Para ser usado en conjunto con los documentos que explican como realizar test M2 A Difusión en disco** M07 - A CIM** * Actualización anual **Actualización c/3años
3 Cómo utilizo el CLSI M100- S20? Previo a analizar las Novedades y cambios del CLSI M100-S20 quiero ver con Uds. el análisis de un examen que contiene múltiples errores en el informe del antibiograma, con el fin de aprender a utilizar las herramientas que nos entrega este documento para poder realizar e informar en nuestros laboratorios antibiogramas confiables, útiles al paciente y que sean una herramienta eficaz de apoyo al medico en la elección de la terapia antimicrobiana adecuada.
4 Paciente embarazada Muestra : Flujo vaginal Informe: Hubo desarrollo de Enterococcus spp Antibiotico Susceptibilidad Antibiotico Susceptibilidad Penicilina Ampicilina Amox- Clavulanico Cloxacilina S R S R Trimetoprin sulfa Clindamicina Amikacina Eritromicina R S S S Cefadroxilo S CTX/CTR S Ciprofloxacino S
5 Qué errores detectamos? 1. Haber informado Enterococcus en Flujo vaginal es el primer error porque forma parte de la Flora comensal y no es causa de vaginitis Esto debe formar parte de nuestro conocimiento microbiológico general. Cada tipo de muestra se debe analizar de acuerdo a su origen y solo informar los microoganismos que son causa de infección o cuando su portación tiene importancia clínica. Con el fin de que sea de utilidad este examen, dejemos de lado su origen y analicemos el antibiograma efectuado a este Enterococcus, veamos que fue lo incorrecto y que seria lo correcto a informar si hubiera sido aislado de una verdadera infección. Ej. bacteriemia
6 Qué errores hay en el informe de este antibiograma? El haber informado Penicilina y Ampicilina es correcto, lo incorrecto es que sea resistente a Ampicilina y sensible a Penicilina. El informar Amoxicilina/ac clavulanico no esta mal pero es innecesario dado que los entreococos en forma excepcional producirán B-lactamasa por lo tanto este antimicrobiano no aporta nada al tratamiento por sobre la amoxicilina, El informar Cloxacilina es un error, no es útil para enterococos y no existen puntos de corte para darlo por S o R por lo tanto no sabemos como pudo ser interpretado. El informar cefalosporinas es un error, los enterococos son resistentes naturales El informar ciprofloxacino es un error, dado que los enterococos son resistentes naturales y su utilidad esta solo a nivel urinario donde puede ser una alternativa de tratamiento por los niveles de concentración que alcanza
7 Qué errores hay en el informe de este antibiograma? Cont El informar trimetoprin sulfa y clindamicina es un error, los enterococos son resistente naturales, in vitro pueden dar sensibles, pero no tienen utilidad clínica y su informe como sensible puede llevar a error de tratamiento El informar amikacina es un error, no hay puntos de corte para darlo como S o R. Los enterococos son resistentes a los aminoglicosidos. Solo se debe informar en infecciones sistémicas Gentamicina o Estreptomicina, con disco de mayor carga para determinar si serán sinérgicos con antimicrobianos que actúan sobre la pared (Penicilina, Ampicilina, Vancomicina) Eritromicina, tiene punto de corte para enterococo, pero no tiene utilidad clínica, por lo tanto tampoco es correcto su informe
8 Qué es lo correcto de informar en Enterococcus spp y como me apoyo en CLSI M100-S20?
9 En las Tablas 1 y 1 A están los antimicrobianos sugeridos para cada microorganismo clasificados en Grupo A para reporte primario, Grupo B para reporte selectivo primario, Grupo C para reporte suplementario y Grupo U para ser informado solo a nivel urinario
10 En nuestro ejemplo para Enterococcus la Tabla 1 sugiere: De esta tabla debemos establecer en nuestro laboratorio que informaremos como reporte primario o suplementario dependiendo del sitio de infección y de los antimicrobianos disponibles en nuestra institución.
11 Tablas 2 A a 2 L En las tablas 2 encontraremos para cada microorganismo: Condiciones para realizar antimicrobiano: Medio, Inoculo, Incubación Recomendación de Control de calidad mínimo: Cepas ATCC requeridas Puntos de corte para interpretación de S, I, R, NS en cada antimicrobiano utilizado por método de difusión y/o dilución. Comentarios que apoyan la realización e interpretación de resultados Para el caso de nuestro ejemplo debemos analizar la Tabla 2 D
12 Tabla 2 D, Enterococcus spp Condiciones del test: Medio: MHA difusión Inoculo; Método de crecimiento o directa suspensión de colonia. Mc F 0.5 Incubación: hrs 24 horas para vancomicina QC; Difusion S aureus ATCC Dilucion E faecalis ATCC Comentarios: (2) Advertencia Para Enterococcus spp, cefalosporinas, aminoglicosidos (excepto screen de resistencia de alto nivel), clindamicina y trimetoprin sulfa, pueden aparecer activos in vitro Pero ellos no son efectivos clínicamente y no deben ser reportados como S
13 Tabla 2 D, Enterococcus spp, cont (6) Enterococo susceptible a penicilina son predeciblemente Susceptioble a Ampicilina, amox clavulanico y ampicilina sulbactam Sin embargo, enterococos susceptibles a ampicilina, no se puede asumir que lo sean a Penicilina Analizando la tabla podrán ver además de acuerdo a nuestro ejemplo: No hay puntos de corte para amikacina y cloxacilina Eritromicina esta marcada con O, lo que indica que no se debe colocar de rutina Ciprofloxacino esta marcado con U, lo que refuerza su uso solo en orinas En la tabla D-5S esta descrito el test para Screening de alto nivel a aminoglicosidos
14 Apendice A: Sugerencia para verificación de test de susceptibilidad y confirmación de identificación de organismos E faecalis Categoria I Fenotipos que no han sido reportados, son poco comunes y/o resultan de errores técnicos Ampicilina o Penicilina R Captomicina NS Linezolid R Categoria II Fenotipos que pueden ser poco comunes en una institución dada y/o resultan de errores técnicos Aminoglicosido de alto nivel R Este Apendice, nos indica para cada microroganismos cuales son los resultados que debemos verificar ya sea porque no han sido reportados, son raros, o pueden corresponder a error. Aca mostramos lo relacionado a Enterococcus
15 Tabla 3-3 A y 4 4 A Se encuentran los limites aceptables para las cepas de control de calidad tanto para difusion (T 3) como por dilucion (T 4)
16 Apéndice B Características de cada una de las cepas de control de calidad que se utilizan Para nuestro ejemplo
17 Veamos ahora NOVEDADES EN CLSI 2010
18 Cambio mayor de formato CLSI 2010
19 Revisión de definición No sensible Esta categoría se utiliza para microorganismos que solo tienen categoría de interpretación Sensible, debido a la ausencia u ocurrencia poco frecuente de cepas resistentes. Los aislamientos que presenten CIM mayores o halos menores deben ser reportados como No sensible Nota 1; Un aislamiento que es interpretado como No sensible, no necesariamente presenta un mecanismo de resistencia. Es posible que estos aislamientos en que falta el mecanismo de resistencia correspondan a distribución de cepas encontradas con posterioridad al establecimiento del punto de corte Nota 2: Para las cepas que resulten en categoría no sensible, los resultados de identificacion y antibiograma deben ser conformados (Ver apéndice A)
20 Repetir identificación y susceptibilidad Guardar cepa Enviar a laboratorio de referencia
21 Apéndice A: Sugerencias para Verificación de resultados de Test de sensibilidad antimicrobiana y confirmación de identificación de organismos Esta tabla refleja la lista de antimicrobianos a testear para los respectivos organismos en tabla 2 A 2 J La lista incluye fenotipos que: Nunca han sido documentados Son poco comunes en algunas aéreas geográficas Representan resultados que pudieran fácilmente ocurrir por error técnico y que pudieran tener consecuencias clinicas significativas Esta dividida en 2 categorías I: Fenotipos que no han sido reportados, son infrecuentes, y/o resultan de error de técnica II: Fenotipos que pueden ser poco comunes en una institución y/o resultan de error de tecnica
22 Apéndice A:
23 Apéndice A: cont
24 Agrega al listado de antimicrobianos que no se deben reportar en LCR las cefamecinas
25 Cambios en enterobacterias M100-S
26 Adiciona información: Cefalotina y enterobacterias La cefalotina debería ser usada solo para predecir resultados de agentes orales: cefadroxilo, cefpodoxima, cefalexina y loracarbef. Los datos antiguos que sugerían que pudiera representar a otras cefalosporinas (ej cefradina) pueden seguir siendo correctos, pero no hay datos recientes para confirmarlo Pag 30. Nota a de Tabla 1
27 Cefalotina y enterobacterias Cambios: Se cambia su indicación de uso desde el Grupo A (test primario de rutina) a Grupo U, para uso urinario solamente CLSI 2009 CLSI 2010 En relación a enterobacterias las cefalosporinas orales se usan primariamente en ITU
28 Enterobacterias Revisan puntos de corte para difusión en disco y CIM para: Cefazolina, cefotaxina, ceftizoxima, ceftriazona, ceftazidima y aztreonam Eliminan la necesidad de hacer screen de BLEE y test confirmatorios cuando se usan los puntos de corte revisados Con los nuevos puntos de corte cada cefalosporina se interpreta por separado a pesar de ser cepa BLEE (+) (no se edita de S a R)
29 Entrobacterias: Puntos de corte revisados CIM EUCAST 2009 ATB S R Cefotaxima 1 2 Caftazidima 1 8 Ceftriazona 1 2
30 Entrobacterias: Puntos de corte revisados DD ND: No disponible Estudios que correlacionaron zona de diámetro y CIM con puntos de corte revisados fueron no concluyentes
31 Enterobacterias: Puntos de corte revisados y no cambiados Nota: Cefalosporinas de uso limitado como moxalactam, cefoperazona no fueron revisados sus puntos de corte. SI se informan el screen de BLEE debe ser realizado
32 En que se baso el CLSI para revisar y definir los nuevos puntos de corte? J Hindler
33 Por qué CLSI bajo los puntos de corte de cefalosporinas y aztreonam Los puntos de corte previo se establecieron 20 años atrás Se ha Incrementado el conocimiento de mecanismos de resistencia Nuevas herramientas para establecer puntos de corte: Farmacodinamia y farmacocinetica Detección de BLEE Test fenotípico no es optimo. La presencia de multiples mecanismos de resistencia lo puede enmascarar: BLEE + Amp C BLEE+ Mutación de porinas BLEE tambien esta en otras enterobacterias fuera de E coli, Klebsiella y Proteus Algunos Laboratorios no lo realizan Optimiza la detección de resistencia en enterobacterias con una variedad de mecanismos de resistencia CIM se correlaciona mejor con el resultado que el conocimiento del mecanismo de resistencia
34 Enterobacterias Los criterios de interpretación son basados en dosis determinada del antimicrobiano que viene indicada en cada antimicrobiano en los comentarios de la Tabla 2A EJ: Ceftriazona 1 gr c/24 horas Cefotaxima 1 gr cada 8 horas Cefipime; 1 gramo cada 8 horas o 2 gr cada 12 horas Esto basado en que se consideró la farmacodinamia y farmacocinetica para determinar los nuevos puntos de corte
35 J. Hindler 2010
36 Puntos de corte CAZ : 8 4 CTR: 8 1 Cefip: 8 8 J Hindler 2010
37 J Hindler 2010
38 Pero.. Todas las cepa productoras de BLEE darán resistentes a las cefalosporinas y aztreonam con los nuevos puntos de corte revisados? NO. Los puntos de cortes están focalizados en la CIM y farmacocinetica de la droga y NO en el mecanismo de resistencia. Como sabemos algunas BLEE hidrolizan mas eficientemente una cefalosporina que otra así la CIM para un agente (ej.cefotaxima) puede ser considerablemente mas alto que para otro (ej Ceftazidima) o al revés También puede cambiar la cantidad de BLEE producida lo que también repercutirá en la CIM La recomendación actual del CLSI es informar uno Sensible y el otro resistente porque estudios indican que la CIM es el mejor predictor de la respuesta clínica en pacientes con cepas BLEE positivas
39 Pero 2.. Todas las cepa productoras de Amp C darán resistentes a las cefalosporinas y aztreonam con los nuevos puntos de corte revisados? NO. Así como las BLEE, no todas las Amp C daran resistentes con los puntos de corte revisados Existen cepas de enterobacterias que producen Amp C en bajo nivel y puede dar sensible, y otras con produccion de alto nivel de Amp C que dará resistente La recomendación es informar como da el Test Esto es lo que actualmente hacemos porque de rutina no se busca la presencia de Amp C.
40 Enterobacteriaceae and 3 rd generation cephalosporin breakpoints - European and US (CLSI) current and pending breakpoints Gunnar Kahlmeter EUCAST El se pregunta: Debería la detección y caracterización de BLEE ser abandonada? Los nuevos puntos de cortes predicen respuesta clínica La detección de BLEE tiene implicancia para el control de infección y la epidemiologia de la resistencia en los hospitales
41 Veamos como en los siguientes graficos como se comporta la CIM de distintos antimicrobianos dependiendo de la BLEE que este presente en determinado microorganismo
42 30 MIC distribution E.coli CTX-M group 1 (n=29) Courtesy Arnfinn Sundsfjord, Tromsö, Norway 25 Number Ceftazidime Cefotaxime Cefpodoxime 5 0 0,75 1 1, MIC Gunnar Kahlmeter EUCAST
43 MIC distribution E.coli CTX-M group 9 (n=15) Courtesy Arnfinn Sundsfjord, Tromsö, Norway Ceftazidime Cefotaxime Cefpodoxime Number ,06 0,09 0,13 0,19 0,25 0,38 0,5 0,75 1 1, MIC Gunnar Kahlmeter EUCAST
44 Cefepime Cefotaxime Ceftazidime Cefoxitin Cefpodoxime Gunnar Kahlmeter EUCAST
45 MIC distribution plasmid mediated AmpC E.coli (n=10) Courtesy Arnfinn Sundsfjord, Tromsö, Norway Number Cefepime Cefotaxime Ceftazidime Cefoxitin Cefpodoxime 1 0 < 0,25 0,25 0,38 0,5 0,75 1 1, MIC Gunnar Kahlmeter EUCAST > 256
46 Cómo se comportan cepas Chilenas? Veamos el comportamiento de 70 cepas de E coli BLEE positivas aisladas de orinas durante marzo-abril 2010 en Laboratorio Integramedica-Santiago
47 Distribución de halos (mm) de Cefotaxima de 70 cepas de E coli BLEE + Lab. Integramedica OLD CLSI 2009 S 23 R 14 CLSI 2010 S 26 R 22 Screen BLEE 27 Con el punto de corte nuevo, todas las cepas son I o R
48 Distribución de halos (mm) de Ceftazidima de 70 cepas de E coli BLEE + Lab. Integramedica OLD NEW CLSI 2009 S 18 CLSI 2010 S 21 R 17 Screen BLEE 22 Frente a Ceftazidima, E coli BLEE (+) presenta una gran dispersión de halos, dando S, I o R
49 Veamos análisis hecho en Argentina, aplicando a las cepas BLEE (+) y (-) del 2009 los puntos de corte 2010
50
51
52 Cont.
53 Cuándo se debe implementar los cambio? La decisión local debe pasar por una revisión en conjunto con el Infectologo, Comité de Control de Infecciones y Farmacia La implementación es dependiente del método utilizado Los sistemas automatizados deben esperar la aprobación del FDA para actualizar sus tarjetas. Los laboratorios pueden seguir con el CLSI 2009 hasta implementar los cambios,
54 Nuestro planteamiento es: Implementar los puntos de corte nuevos para la interpretación de resistencia, con el fin de detectar mejor aquellas resistencias por otro mecanismos como Amp C, defecto porinas o falsos BLEE negativos Continuar detectando e informando la presencia de BLEE hasta obtener mayor información del comportamiento clínico de aquellas cepas BLEE (+) que presentan sensibilidad a alguna cefalosporina.
55 Resumen de las recomendaciones M100-S 20
56 Cambios en Staphylococcus spp M100-S
57 Staphylococcus / Penicilina Frente a cepas sensibles a Penicilina (CIM 0.12 o halo 29) se debe realizar un test B- lactamasa inducible previo a darlo por Sensible. Ocasionalmente puede no detectarse su presencia, por lo que en infecciones serias se debería realizar los test en cada aislamiento Tabla 2C- S3
58 Staphylococcus / Linezolid Adiciona puntos de corte para resistente
59 DEFINICION DE SAMR SAMR son todas las cepas de S aureus que expresan resistencia por mec A u otro mecanismo de resistencia a meticilina tales como cambios en la afinidad a las PBP SAMR= S aureus con Mec A o CIM a oxacilina > 2ug/ml
60 J Hindler
61
62 S aureus tiene punto de corte por difusión y CIM para oxacilina y cefoxitina S lugdunenesis tiene: punto de corte por difusión y CIM para cefoxitina Solo punto de corte por CIM para oxacilina S coagulasa negativo; tiene punto de corte de oxacilina por CIM y tiene punto de corte de cefoxitina por difusión
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64 Cambios en Enterococcus spp M100-S
65 Enterococcus y B lactamasa 2009: (8) Porque resistencia a ampicilina o Penicilina por produccion de B lactamasa no es fácil detectable por DD o CIM un Test de Nitrocefina es recomendado en aislamientos de sangre o LCR 2010 (8) Penilina o ampicilina resistencia de enterococo por B lactamnasa ha sido reportada muy raramente.. Por lo tanto el test de nitrocefina no es necesario realizarlo de rutina
66 Cambios en Streptococcus spp M100-S
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69 Se aclaró cuales son los organismos que estarían incluidos en la Tabla 2H-2. Los Streptococcus grupo viridans incluyen cinco grupos, con varias especies en cada uno: grupo mutans, grupo salivarius, grupo bovis, grupo anginosus (anteriormente llamado grupo "S. milleri") y grupo mitis. El grupo anginosus incluye las cepas β-hemolíticas colonia pequeña con antígenos de los grupos A, C, F, y G.
70 S Grupo viridans Aunque raro, falta de susceptibilidad cruzada con cefalosporinas se ha reportado. Muchos Streptococcus grupo viridans no son susceptibles a B. lactamicos La mayoría de los S viridans testeados son de infecciones serias donde se requiere CIM para su manejo
71 Gracias
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