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1 UNIVERSIDAD PERUANA CAYETANO HEREDIA Facultad de Ciencias y Filosofía Departamento Académico de Microbiología Sección Inmunología Departamento Académico de Bioquímica, Biología Molecular y Farmacología SILABO I. DATOS GENERALES 1.1. Nombre de la asignatura TÉCNICAS DE INVESTIGACIÓN EN INMUNOLOGÍA 1.2. Código 1.3. Año Semestre Académico 1.5. Créditos Tipo de asignatura CURSO CORTO 1.7. Prerrequisitos INMUNOLOGIA I o AFINES 1.8. Semestre/Año de estudios/nivel / / 1.9. N de horas lectivas Teoría 13 h 42 h Duración de la asignatura Profesor coordinador/ responsable Del 01 de Febrero de 2010 Al 11 de Febrero de 2010 DR. JOSÉ LUIS AGUILAR OLANO II. SUMILLA Dentro del desarrollo de conocimientos en Inmunologìa se está experimentando un vertiginoso avance. Junto al progreso de esta especialidad, paralelamente se ha logrado un explosivo desarrollo en el área de la inmunología básica, la que actualmente complementa a la inmunología clínica para el entendimiento del comportamiento del sistema inmune en muchas enfermedades. A nivel mundial los inmunólogos emplean diversas técnicas inmunológicas y diseñan experimentos para obtener información de los mecanismos inmunológicos implicados en el comportamiento del sistema inmune frente a todo aquello que lo altera. Por tal motivo, es importante conocer las técnicas para aplicarlas en el campo de interés. En este curso se brindan técnicas básicas que sin embargo, pueden responder a cuestiones inmunológicas de manera eficiente. III. OBJETIVOS EDUCATIVOS OBJETIVOS GENERALES DEL CURSO: Entregar el fundamento de las principales técnicas inmunológicas aplicadas en investigación Realizar las técnicas inmunológicas mediante diseños experimentales que permitan enseñar los detalles de las mismas e interpretar los resultados obtenidos. Evaluar agentes estimuladores de los mecanismos inmunológicos y medir sus efectos

2 IV. CONTENIDOS DÍA 1: Lunes :00 10:00 h Introducción. Aplicación de las técnicas inmunológicas en Clase Dr. José L. investigación 10:00 13:00 h Aislamiento de CMSP Lozada 13:00 14:00 h Criopreservación de CMSP Lozada DÍA 2: 15:00 17:00 h Discusión de resultados y Clase planificación ensayos Lozada Miércoles 08:00 10:00 h Descongelamiento de CMSP y tratamiento con fitofármaco para ensayos de MTT Lozada 10:00 12:00 h Ensayos de citotoxicidad Clase Dr. José L. 12:00 13:00 h Almuerzo 13:00 14:00 h Ensayo MTT: Adición de MTT Lozada 14:00 15:00 h Descongelamiento de CMSP e inicio de ensayo de apoptosis por naranja de acridina (inmunofluorescencia) Lozada 15:00 17:00 h Apoptosis Clase Dr. José L. 17:00 18:00 h Ensayo MTT: Lectura Lozada

3 DÍA 3: Jueves 08:00 10:00 h Discusión de resultados Clase Dr. José L Ensayo MTT 10:00 13:00 h Ensayo de apoptosis por naranja de acridina (inmunofluorescencia) 13:00 14:00 h Discusión de resultados Ensayo Apoptosis 15:00 19:00 h Aislamiento y criopreservación de CMSP Lozada Lozada Dr. José L. Lozada DÍA 4: Lunes :00 10:00 h Descongelamiento de CMSP y tratamiento con fitofármaco para ensayos de ELISA para IL-12 10:00 12:00 h ELISA (Enzyme Linked Clase Dr. José L. ImmunoSorbent Assay) 12:00 13:00 h Estímulo con LPS de las CMSP tratadas con fitofármaco 13:00 14:00 h Almuerzo 14:00 16:00 h Citometría de flujo Dr. José L. 16:00 18:00 h Obtención y almacenamiento de sobrenadantes para medición de IL-12 DÍA 5: Miércoles 08:00 10:00 h Inicio ELISA Descongelamiento de CMSP y tratamiento con fitofarmaco para ensayos de ELISA (caspasa 3) y citometría de flujo 10:00 11:00 h Estímulo con LPS de las CMSP tratadas con fitofármaco

4 13:00 14:00 h Inicio ELISA para IL-12 15:00 18:00 h Lisis celular para ensayo de ELISA (caspasa 3) Ensayo de citometría de flujo DÍA 6: Jueves :00 11:00 h Ensayos de ELISA para IL-12 y Caspasa 3 11:00 13:00 h Lectura de resultados en citometro de flujo 13:00 14:00 h Almuerzo 14:00 15:00 h Manejo de Software para citometría de flujo 15:00 18:00 h Lectura y análisis de resultados de ELISA para IL- 12, caspasa 3 y citometría de flujo 18:00 19:00h Interpretación de resultados Clase Dr. José L. V. ESTRATEGIAS DIDÁCTICAS El curso comprende 06 sesiones, que se desarrollarán en un formato de clases teóricas y prácticas de laboratorio realizadas por los profesores del curso. Los alumnos contarán con información pertinente sobre las clases y protocolos de ensayo. Así como también se estimulará la discusión durante y después de la obtención de los resultados de cada una de las técnicas realizadas en el presente curso.

5 VI. EVALUACIÓN Componentes de la nota: NOTA (%) 01 EXÁMEN TEÓRICO 100 % Durante el desarrollo del curso, se tomará en cuenta la asistencia, participación, desarrollo y aporte del alumno en la clase. Para ser aprobado en un curso se requiere obtener como mínimo la Nota Final 11. Sólo para efectos del cálculo de la Nota Final del curso (NF), la fracción 0.50 se redondeará a la unidad inmediata superior a favor del alumno. VII. BIBLIOGRAFÍA 1. Immunobiology: The immune system in health and disease. Charles Janeway y Paul Travers, Mark Walport, Mark J. Shlomchik. 6ta. Edición Current Protocols in Immunology. Coligan JE et al. John Wiley and Sons INC Cellular and Molecular Immunology. Abdul K. Abbas, Andrew H. Lichtman, Jordan S. Pober. 6th edition. Saunders ELSEVIER Inmunología: Roit Ivan, Brostoff Jonathan, Male David; 9º Edicion; Harcourt- Brace; España; Inmunopatología molecular. Gabriel Rabinovich. Editorial Panamericana Advanced Immunology: David Male; Ed Gower Medical Publishing. ANEXO 1 DOCENTES PARTICIPANTES Grado ó Título Nombre Apellidos MD José Luis MSc Iván Lozada Álvarez

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