Vigilancia Laboratorial de Neisseria meningitidis. PARAGUAY 1996 a Vigilancia de Meningitis y Neumonías Bacterianas (VIMENE)

Transcripción

1 Vigilancia Laboratorial de Neisseria meningitidis PARAGUAY 1996 a 2015 Vigilancia de Meningitis y Neumonías Bacterianas (VIMENE) Gustavo Chamorro Cortesi

2 Tendencias, Neisseria meningitidis Pequeños conglomerados de casos con variaciones estacionales que explican una proporción variable de las meningitis bacterianas epidémicas. Vigilancia, detección e investigación de los casos hasta su confirmación por laboratorio. reforzando la vigilancia y la capacidad del laboratorio para detectar tempranamente las epidemias. Respuesta a las epidemias, tratamiento rápido y apropiado de los casos y la vacunación reactiva en masa en los distritos afectados por las epidemias. (Efectividad hasta un 70% de los casos) OMS

3 SIREVA II VIMENE 1. Centros Regionales de Referencia Instituto de Salud Carlos III, España 2. Centros Subregionales de Referencia Instituto Adolfo Lutz, Brasil 3. Centros Nacionales de Referencia: 21 países 4. Centros Centinelas: 453 (7 centros, Paraguay) Centros Colaboradores: 1. Centro de Emergencias Médicas 2. INERAM 3. Hospital Barrio Obrero 4. Hospital Militar

4 Antecedentes, Neisseria meningitidis 1996 Inicio de la Vigilancia epidemiológica de N. meningitidis - Escaso numero de aislamientos por año - Predominio del serogrupo B 2002/2003 estandarización de métodos de diagnóstico / Vigilancia Centinela 2007 / Se ha documentado un aumento de los serogrupos W135 e Y. Record Histórico de aislamientos Implementación de Biología Molecular para el diagnostico y tipificación.

5 Vigilancia Laboratorial Neisseria meningitidis. Paraguay Agosto/2015 DISTRIBUCION POR AÑO N = PCR Agost/ FA

6 Distribución de Neisseria meningitidis aislados por Establecimienos de Salud a Agosto/2015 Distribución por Institución APA CDE CEM HC IPS CLINICAS HGP HNI IMT LA COSTA LCSP LAB MEYER MIGONE HR PILAR

7 Neisseria meningitidis. Paraguay a Agosto/ ,5 0,9 5,2 12,1 3, , ,2 18,4 9, B C W135 Y

8 Neisseria meningitidis. Paraguay a Agosto/2015 B C W135 Y TOTAL DX FA % FA % FA % FA % FA % MBA 52 58, , ,35 6 6, ,00 MBA/ MENINGOC 1 100,00 0 0,00 0 0,00 0 0, ,00 MENINGOCOC 5 83,33 0 0,00 0 0, , ,00 SEPSIS 9 64, , ,29 1 7, ,00 ASINTOMATICA 1 25, , , ,00 TOTAL

9 Neisseria meningitidis. Paraguay a Agosto/2015 B C W135 Y

10 Casos Neisseria meningitidis. Paraguay a Agosto/2015 SEXO 55% 45% FEM MASC ,6 Frecuencia por Edad agrupada ,3 % ,2 7,3 7,3 8,2 7, ,6 2,7 1,8 1, MENOR A 5 5 a 9 10 a a a a a a a a y más

11 Neisseria meningitidis, Edad agrupada por Serogrupo. Paraguay a Agosto/ % 90% 80% 70% % % 40% 30% 20% % % Menor a 5 5 a 9 10 a a a24 25 a a a a a y más B C W135 Y

12 Técnicas aplicadas. Neisseria meningitidis. PARAGUAY a % 90% 80% BM CULTIVO 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% %

13 70.00% 60.00% 60% 50.00% 40.00% 30.00% 26,7% Resultados/cepas INVASIVAS Nm. Paraguay a % 10.00% 6,7% 6,7% 0.00% B C W135 Y Complejo Clonal FA FR ST-103 complex ST-11 complex/et-37 complex ST-167 complex ST-32 complex/et-5 complex ST-35 complex Total

14 Prevalencia y caracterización de las cepas de Neisseria meningitidis circulantes entre pobladores asintomáticos en edad escolar (3 a 21 años) en Asunción y Central. Paraguay, Chamorro G., Ivarz-Pavón A., Kawabata A., León M. Laboratorio Central de Salud Pública Con apoyo de la OPS-OMS Prof. Dr. Gustavo Adolfo Chamorro Cortesi chamorroga@hotmail.com

15 Prevalencia y caracterización de Neisseria meningitidis Objetivos 1) Conocer las frecuencias de portación nasofaríngea de N. meningitidis en la población de edades comprendidas entre los 3 y 21 años de edad en la ciudad de Asunción y Dpto. Central. 2) Describir las características fenotípicas y genéticas de las cepas de N. meningitidis circulantes en esta población. 3) Determinar la frecuencia de distribución de aislados no capsulados y detectar entre éstos, la proporción que presenta del locus capsulle null (cnl), que imposibilita la expresión de la cápsula. 4) Determinar la asociación de algunos factores de riesgo con el desarrollo del estado de portador.

16 Prevalencia y caracterización de Neisseria meningitidis Materiales y Métodos Identificación y caracterización genotípica de N. meningitidis Preparación de suspensiones de ADN que se utilizaron para determinar el linaje genético (en proceso) Determinación de los genes ctra y cgra de N. meningitidis específicos para especie por medio de PCR cgra es un gen regulador de contacto que codifica para una proteína involucrada en la adhesión de N. meningitidis a las células blanco y genera un producto de 230 pb. ctra es un gen responsable del transporte de la capsula de N. meningitidis que genera un producto de 550 pb.

17 Prevalencia y caracterización de Neisseria meningitidis Figura 2. Detrminación de genes cgra y ctra. PCR convencional. Se detectó la presencia de los genes cgra y/o ctra en el 35,1 % (N=132) del total de las cepas estudiadas (N=376).

18 Prevalencia y caracterización de Neisseria meningitidis Determinación de serogrupo por PCR multiplex / PCR convencional Figura 3. Determinación de serogrupo. PCR multiplex.

19 Prevalencia y caracterización de Neisseria meningitidis La caracterización de los serotipos y serosubtipos se realizó por la técnica de Dot Blott con células enteras y anticuerpos monoclonales.

20 Prevalencia y caracterización de Neisseria meningitidis Resultados Aislamiento de N. meningitidis y otras Neisserias de interés. Aislamiento Total % Sin aislamiento ,3 Neisseria meningitidis 26 1,3 Neisseria cinerea 41 2 Neisseria sicca 12 0,6 Neisseria elongata 4 0,2 Neisseria lactamica 49 2,4 Neisseria mucosa 2 0,1 Neisseria polisacharea 4 0,2 Neisseria sp ,9 Total

21 Prevalencia y caracterización de Neisseria meningitidis Tipificación molecular Determinación de serogrupo de N. meningitidis por técnicas moleculares N. meningitidis Otras Neisserias TOTAL PCR N % N % N % No Agrupable 3 11, , ,7 A B 11 42,3 10 9, C 1 3,8 2 1,9 3 2,3 W ,2 10 9, ,4 Y 4 15,4 1 0,9 5 3,8 X 1 3,8 4 3,8 5 3,8 Z 1 3, ,7 29E , ,3 TOTAL

22 Aislamiento por Grupos de Edades Aislamiento Grupos de edades 3a 6 7 a a a a 21 Total Sin aislamiento Neisseria meningitidis Neisseria cinerea Neisseria sicca Neisseria elongata Neisseria lactamica Neisseria mucsosa Neisseria polisacharea Neisseria sp Total

23 CONCLUSIONES Sobre 2011 muestras procesadas, la prevalencia encontrada corresponde a un 5,0%. El predominio fue del serogrupo B. La frecuencia de aparición de los serogrupos W135, Y, C se encuentra en aumento. Las técnicas moleculares constituyen un aporte importante para el Dx. La vigilancia continua es muy importante para prevenir brotes epidémicos y apoyar la toma de decisiones en salud pública.

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