Serie XS. Reporte de casos clínicos. Analizador hematológico automatizado. Scientific Affairs. Supervisor. Published by

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1 Supervisor Analizador hematológico automatizado Serie XS Reporte de casos clínicos Published by Scientific Affairs 132 Murotani, Nishiku, Kobe, , Japan URL : Copyright 2008 by SYSMEX CORPORATION No part of this publication may be reproduced or transmitted, in any form or by any means without the prior written permission of the publisher. Printed in Japan.

2 XSSERIES Clinical Case Report Introducción It gives me great pleasure to introduce this first series of clinical case studies describing the graphical output from the newly introduced Sysmex XSseries of haematology analysers. Despite the compact size of the XS it utilises the same fluorescence flow cytometry technology for identifying white blood cells and generating "flags" when abnormal cells are present as the XE2100, the top of the range haeamtology analyzer. Modern analysers no longer simply provide numerical values for CBC and differential, there is significant additional information which can be provided by the analysis of the histograms and scattergrams generated on each sample. This information often overlaps some of that obtained by the microscopic examination of a stained peripheral blood film. Over the following pages the principle of measurement and the information provided by the XS is concisely explained along with several beautifully illustrated clinical cases, demonstrating abnormalities detected by the XS for white blood cells, red blood cells and platelets. This series of cases will help laboratories to recognize histogram and scattergram abnormalities and aid in the interpretation of instrument flags on their own population of patients. These cases demonstrate that this information has real clinical utility in the diagnosis and treatment monitoring of disease. Many of these clinical cases came from University College Hospital London and personally, I find the use of abnormal histograms and scattergrams in the identification of abnormal circulating blood cells fascinating. I am quite sure that we still have a great deal to learn and as we become more experienced the position of other abnormal cells in the scattergram will be identified and more specific flags will then be generated, and perhaps abnormal cells will be reported numerically. I hope this booklet helps in the daily work in the laboratory and stimulates an interest in histogram and scattergram interpretation. Me causa un gran placer el presentar esta primera serie de estudios de casos clínicos describiendo la los gráficos de la nueva Serie XS de analizadores de hematología. A pesar del tamaño compacto del XS utiliza la misma tecnología de citometría de flujo fluorescente para identificar los leucocitos y generar alarmas cuando se encuentran presentes células anormales como el XE2100, el analizador de hematología más avanzado. Los analizadores modernos no solamente proporcionan los valores numéricos para el CBC y el diferencial, existe información adicional significativa que puede ser obtenida del análisis de los histogramas y dispersogramas generados en cada muestra. Esta información generalmente coincide con la obtenida de la observación al microscopio de un frotis de sangre periférica. En las siguientes páginas el principio de medición y la información proporcionada por el XS, es explicada concisamente junto con varios casos clínicos bellamente ilustrados, demostrando anormalidades detectadas por el XS para leucocitos, eritrocitos y plaquetas. Esta serie de casos ayudará a los laboratorios a reconocer las anormalidades en los histogramas y dispersogramas y ayudarán en la interpretación de las alarmas del instrumento en su propia población de pacientes. Estos casos demuestran que esta información tiene utilidad clínica real en el diagnóstico y tratamiento de una enfermedad. Muchos de estos casos clínicos provienen del Hospital universidad colegio de Londres y personalmente, encuentro fascinante el uso de histogramas y dispersogramas anormales en la identificación de células sanguíneas circulantes anormales. Estoy segura que todavía tenemos mucho que aprender y mientras más expertos nos volvamos, se identificarán las posiciones de otras células anormales en el dispersograma y más alarmas específicas serán entonces generadas, y posiblemente las células anormales serán reportadas numéricamente. Espero que este folleto ayude en el trabajo diario en el laboratorio y estimule el interés en la interpretación de histogramas y dispersogramas. Carol Briggs Department of Haematology Evaluations University College London Hospital 60 Whitfield Street, London W1T 4EU, UK

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4 Contenido Introducción 1 Información del XS 4 Diagrama de flujo de los parámetros de análisis y principios de medición 4 Principios 5 Información de los datos del XS 6 Patrones anormales 7 Lista de mensajes interpretativos (IP) 8 Despliegue de datos e interpretación 9 Ejemplo de una muestra normal 10 Ejemplos de leucocitosis 11 Casos de anormalidades en la línea de leucocitos 17 Casos de anormalidades en la línea de eritrocitos 29 Casos de anormalidades en la línea de plaquetas 39

5 Información del XS Diagrama de flujo de los parámetros de análisis y principios de medición Detector de porcentaje de diluciones Método Parámetros (CBC) 1:92 (CBCDIFF) 1:95 Citometría de flujo utilizando un láser semiconductor #, #, #, #, #, %, %, %, %, % / 1:501 Métodos de detección de enfoque hidrodinámico y corriente directa,,,, RDWSD, RDWCV,,,, PLCR HCH, 1:751 Método SLS

6 Información del XS Principios Enumeración de leucocitos () en el modo hemograma sin diferencial (CBC) Para el conteo de leucocitos, todos los eritrocitos son completamente lisados por el Stromatolyser 4DL. Las diferencias volumétricas entre las plaquetas remanentes y los leucocitos, pueden ser analizadas utilizando la información de la luz de la dispersión frontal. Dicha luz indica el tamaño de la célula (ejemplo a mayor tamaño de la célula, mayor intensidad de la luz de dispersión frontal). La distribución del tamaño de partícula de los leucocitos se muestra en el histograma de leucocitos (). Conteo y diferenciación de leucocitos en el modo hemograma y diferencial (CBCDIFF) El canal de /DIFF enumera y hace la diferenciación de todos los leucocitos utilizando dos señales diferentes: fluorescencia e intensidad de luz de la dispersión lateral generada por el láser semiconductor. Fig. 4: Histograma de leucocitos () Se requieren de dos diferentes reactivos para la diferenciación de los leucocitos en el canal /DIFF. Primero, todos los eritrocitos son completamente lisados por el Stromatolyzer 4DL y la membrana de los leucocitos es perforada. Después, un colorante fluorescente, Stromatolyser 4DS, penetra en los leucocitos a través de la membrana perforada uniéndose específicamente a los ácidos nucleicos del citoplasma y núcleo. Cuando son expuestos a la luz del láser de 633 nm, la intensidad de fluorescencia detectada es directamente proporcional al contenido de ácidos nucleicos de la célula (ARN/ADN). La intensidad de luz de la dispersión lateral depende de la complejidad de la lobulación nuclear y de la presencia de gránulos en el citoplasma. La intensidad de la fluorescencia y la información de la dispersión lateral, es mostrada en el dispersograma del diferencial (/DIFF). Fig. 5: Dispersograma /DIFF Método de detección de corriente directa y enfoque hidrodinámico para conteo de eritrocitos () y plaquetas () La dilución de eritrocitos y plaquetas es inyectada en el detector de /. La dilución de la muestra pasa por el centro de la apertura, con ayuda del principio de enfoque hidrodinámico. El flujo laminar asegura que las células no son contadas dos veces. A medida que las células pasan a través de la apertura, generan una resistencia eléctrica, que es registrada como un impulso de impedancia. El tamaño de la célula es proporcional a la altura del pulso. Los histogramas de eritrocitos y plaquetas son generados a partir de este principio de detección. Fig. 1: Enfoque hidrodinámicob Método de hemoglobinasls Fig. 2: Histograma de eritrocitos Fig. 3: Histograma de plaquetas El método de hemoglobina SLS, utiliza el surfactante lauril sulfato sódico. La medición de la hemoglobina se lleva a cabo mediante los siguientes pasos de reacción química: el surfactante lisa los eritrocitos para liberar las moléculas de hemoglobina, luego las moléculas de hierro son oxidadas (Fe3 3 Fe2) resultando en una formación colorimétrica estable de lauril sulfato sódico (SLS: C12H25SO4Na). La SLSHb es medida por un método fotométrico y tiene su máxima absorbancia a 535 nm. Este método es libre de cianuro y no utiliza ninguna otras sustancias toxica. Ya que el SLS es un reactivo saponificante, la interferencia por turbidez, debida a grasa o a un alto número de leucocitos, puede ser reducida en gran medida.

7 Información del XS Información de los datos del XS La Serie XS proporciona información como un monitor para valores cuantitativos y como fuente de información de alarmas para los médicos a ser usadas en el diagnóstico y tratamiento. Monitoreo del valor cuantitativo Neutrofilia Infección (bacterial aguda) Tejido dañado (infarto cardiaco, cirugía) Hemodiscracia (CML) Medicamentos (GCSF, epinefrina, esteroides) Cetoacidosis diabética Incremento fisiológico (embarazo, ejercicio, alimentos) Linfocitosis Hemodiscracia (ALL, CLL) Infección (Mononucleosis infecciosa, tosferina, rubéola) Estrés (falla cardiaca, infarto cardiaco, alergia) Enfermedad autoinmune, cáncer, tabaquismo Monocitosis Infección (bacteriana, sepsis) Colagenosis Agranulocitosis inducida por fármacos Leucocitosis gestacional Enfermedad de Hodgkin Enfermedad tumoral (AMLM4, M5, CMMoL) Eosinofilia Neutropenia Linfopenia Alergias (medicamento, urticaria) Enfermedad parasitaria Dolor respiratorio (asma bronquial, rinitis aguda) Enfermedad de la piel Enfermedad alimentaria (gastroenteritis eosinofilica pancreatitis, colitis ulcerativa crónica) Endocrinoma Infección (tuberculosis, pneumocistis carini, neumonía) Infección (bacterial severa) Leucemia, cáncer metastático de médula ósea Medicamentos Hemodiscracia (Anemia aplásica, síndrome míelodisplástico) Choque anafiláctico Abuso de alcohol Infección (influenza, sepsis) Medicamentos (fármaco anti cáncer, hormona adrenocorticotrófica) Radiación Cáncer terminal, enfermedad de Hodgkin Colagenosis (lupus eritromatoso sistemico, Artritis reumatoide) Las siguientes tablas de leucocitos, plaquetas y eritrocitos muestran el efecto en el resultado numérico de leucocitos, plaquetas y eritrocitos en presencia de anormalidades o interferencias. () el resultado numérico podría ser incorrectamente alto () el resultado numérico podría ser incorrectamente bajo Leucocitos Plaquetas Eritrocitos Agregación plaquetaria () Aglutininas frías () Eritroblastos () Lisis insuficiente de eritrocitos () Crioglobulinas () Agregación plaquetaria () Plaquetas gigantes () Esquizocitos () Microcitosis () Albumina fría () Esquizocitos () Aglutininas frías () Microcitosis () Leucocitosis () (: más de 100x10 9 /L) Plaquetas gigantes () Información de alarmas Leucocitos Plaquetas Eritrocitos Leucopenia y leucocitosis Leucocitos inmaduros Tipo y proceso de observación de leucemias Eritroblastos Estimado de la función plaquetaria interna Confirmar el efecto del tamaño de las plaquetas Anemia microcítica y macrocítica Anisocitosis Efecto de una transfusión sanguínea

8 Información del XS Patrones anormales Dispersograma del diferencial (DIFF) Fluorescencia Blasts (Blastos) Dispersión lateral Los blastos aparecen en el área indicada como Blasts/Atypical Lympho en el dispersograma del DIFF. Immature Gran (Granulocitos inmaduros) En el dispersograma del DIFF, los granulocitos inmaduros aparecen en el área indicada como Immature Gran. Left Shift (Desv. Izq.) Las bandas aparecen en el área indicada como Left Shift en el dispersograma del DIFF. Atypical Lympho (Linf. Atípicos) Los linfocitos atípicos o blastos aparecen en el área indicada como Blasts/Atypical Lympho en el dispersograma del DIFF. Abn Lympho (Linf. Anormales) Los linfocitos anormales aparecen en el área indicada como Abn Lympho en el dispersograma del DIFF. N (N) Los eritroblastos aparecen en el área indicada como N en el dispersograma del DIFF. Clumps (Cúmulos de ) Los cúmulos de plaquetas aparecen entre el área de fantasma y el área de de basófilos/neutrófilos en el dispersograma del DIFF ( Clumps ).

9 Información del XS Lista de mensajes interpretativos (IP) ITEM Objeto Canal de Análisis Parámetros Clave Regla de Alarma/Fórmula <Abnormal> Abn Scattergram <Anormal> Dispersograma anormal de leucocitos /, DIFF Dispersograma Determinado de las áreas de alarma del dispersograma del diferencial W BC Neutropenia Neutrophilia Lymphopenia Lymphocytosis Monocytosis Eosinophilia Basophilia Leukocytopenia Leukocytosis Neutropenia Neutrofilia Linfopenia Linfocitosis Monocitosis Eosinofilia Basofilia Leucopenia Leucocitosis #, % #, % LINFO#, LINFO% LINFO#, LINFO% #, % #, % #, % # < 1.00x10 9 /L (o %) # > 11.00x10 9 /L (o %) LINFO# < 0.80x10 9 /L LINFO# > 4.00x10 9 /L (o %) # > 1.00x10 9 /L (o %) # > 0.70x10 9 /L (o %) # > 0.20x10 9 /L (o %) < 2.50x10 9 /L > 18.00x10 9 /L <Suspect> Blasts? Immature Gran? Left Shift? Abn Lympho? N? Atypical Lympho? <Sospecha> Blastos? Gran. Inmad.? Desv. Izda.? Linfocitos anormales? Eritroblastos? Linfocitos atípicos? DIFF Dispersograma Determinado de las áreas de alarma del dispersograma del diferencial <Abnormal> Abn Distribution Dimorphic Population <Anormal> Distribución anormal de eritrocitos Población dismórfica Alarmas RL, RU, MP, DW Alarma MP(histograma) Determinado de la forma de la curva de distribución de eritrocitos R B C Anisocytosis Microcytosis Macrocytosis Hypochromia Anemia Erythrocytosis Anisocitosis Microcitosis Macrocitosis Hipocromia Anemia Eritrocitosis RDWSD,RDWCV RDWSD > 65 fl o RDWCV > 20% < 70 fl > 110 fl < 29.0 g/l < 10.0 g/l > 6.50x10 12 /L <Suspect> Agglutination? Turbidity/ Interference? Iron Deficiency? Defect? Fragments? <Sospecha> Aglutinación? Turbidez/Interferencia en? Deficiencia de hierro? Defecto de hgb? Fragmentos?,,,,RU (%),,RDWCV RDWCV, RDWSD,PU,PU(%),,RL, Determinado de valores numéricos y de la forma de la curva de distribución de eritrocitos > 36.5 g/l Determinado de valores numéricos y cálculos de la curva de distribución de eritrocitos Determinado de valores numéricos y cálculos de la curva de distribución de eritrocitos Determinado de valores numéricos y de la forma de la curva de distribución de eritrocitos y plaquetas <Abnormal> Abn Distribution <Anormal> Distribución anormal de plt,pl(%),pu(%),pmfv,,plcr,,pu Determinado a partir de valores numéricos y de la forma de curva de distribución de las plaquetas P LT Thrombocytopenia Thrombocytosis Trombocitopenia Trombocitosis < 60x10 9 /L > 600x10 9 /L <Suspect> Clumps? Clumps (S)? <Sospecha> Cúmulos de plaquetas? Cúmulos de plaquetas (S)? DIFF Dispersograma, PL(%), PU(%), PMFV,, PLCR,, PU Determinado de las áreas de alarma del dispersograma del diferencial Determinado de valores numéricos y de la curva de distribución de plaquetas Nota 1) Los límites de decisión de mensajes anormales basados en reglas numéricas, pueden ser cambiados por el usuario. Nota 2) Las reglas y fórmulas están sujetas a cambio para mejorar. RL: Posición del discriminador bajo de eritrocitos RU: Posición del discriminador alto de eritrocitos PU: Posición del discriminador alto de plaquetas PL(%): Porcentaje de intersección entre el discriminador bajo de y la curva de distribución del tamaño celular; se asume que el pico del histograma es 100%. PU(%): Porcentaje de intersección entre el discriminador alto de y la curva de distribución del tamaño celular; se asume que el pico del histograma es 100%. Alarma MP: El histograma de eritrocitos muestra múltiples picos debido a dos poblaciones de con diferente tamaño. Alarma DW: El RDWSD no puede ser obtenido, el Valor de RDWSD no puede ser mostrado.

10 Información del XS Despliegue de datos e interpretación Datos en pantalla En caso de error de análisis o interferencias en el análisis, se pueden ver las siguientes opciones en pantalla Categoría En pantalla Interpretación (1) Imposible de analizar (2) Fuera de rango (3) Datos con baja confiabilidad (4) Error de análisis Debido a que se encontraron un número alto de anormalidades no se pudo realizar el análisis Se excedió el rango establecido para datos mostrados en pantalla El asterisco () indica baja confiabilidad del resultado debido a anormalidades encontradas (ver el mensaje interpretativo). Los datos deberán ser revisados y pueden ser utilizados como referencia Los datos no pueden ser analizados debido a un error funcional de equipo Mensajes interpretativos de alarma La unidad procesadora de información muestra información designada para ayudar en la separación de resultados de datos POSITIVOS o NEGATIVOS. Todas las muestras analizadas sin errores de análisis, pueden ser separadas en POSITIVAS O NEGATIVAS de acuerdo a los criterios preestablecidos. El juicio está basado en revisiones de datos numéricos, distribuciones del tamaño de partícula, dispersogramas, etc., y proporciona mensajes fáciles de entender que indican los hallazgos del instrumento. Estos alarmas/mensajes se conocen como mensajes IP (interpretativos) LINF RDW SD RDW CV PLCR Abn Scattergram 1) Linf, Mono 2) Neut, Eo 3) Mono,Neut 4) Linf, Neut 5) Linf, Baso 6) Mono, Eo 7) Fantasma, Baso 8) Fantasma, Linfo 9) Fantasma, Neut 10) Baso:Neut, Baso:Linf 11) Neut: Baso 12) Abn Distribution 13) Los datos de la DIFF no pueden ser calculados 14) <0.5x10 9 /L Blastos? Granulocitos Inmaduros? Left Shift? Linfocitos atípicos? Linfocitos anormales Eritroblastos Distribución anormal de eritrocitos 1) Picos múltiples 2) Anormalidad RDWSD 3) Otros 4) <0.5x10 12 /L Población dimórfica Aglutinación de eritrocitos Turbidez/Interferencia? Abn Distribution 1) Anormalidad 2) Otros Cúmulos de plaquetas Cúmulos de plaquetas (s) Supresión de alarmas (1) Si los parámetros requeridos para la determinación no pueden ser calculados, se presenta el error [] o []. (2) Si el número de < 0.50x10 3 /ul, el mensaje de sospecha de no se determinará. (3) Si el número de < 0.50x10 6 /ul, los mensajes interpretativos de, excepto el de Abn Distribuition, no se determinarán. (4) Muestras analizadas en un modo de análisis especial como en el control de calidad.

11 Información del XS Ejemplo de una muestra normal Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i (1) RDWSD RDWCV PLCR [10 12 /µl] [g/dl] LINFO FANTASMAS (6) (7) (8) IP Message(s) IP Message(s) IP Message(s) (1) Datos del análisis (2) El histograma del leucocitos sólo aparece con el modo CBC (3) Histograma de eritrocitos (4) Histograma de plaquetas (5) El dispersograma del diferencial aparece cuando se utiliza el modo CBCDIFF (6) Mensajes IP de leucocitos (7) Mensajes IP de eritrocitos (8) Mensajes IP de plaquetas 10

12 Ejemplos de leucocitosis Neutrofilia 12 Linfocitosis 13 Monocitosis 14 Eosinofilia 15 Basofilia 16 11

13 Ejemplos de leucocitosis Neutrofilia Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR Neutrófilos Neutrofilia Linfopenia Leucocitosis Eritroblastos? Anemia LINFO N 1.00/100 La revisión al microscopio de esta muestra resultó en un porcentaje de neutrófilos del 90.25%. Esto fue verificado posteriormente por el dispersograma del diferencial que mostró un gran número de células en la región de los neutrófilos ( ). El mensaje de alarma Neutrofilia aparece, si el porcentaje del número absoluto de neutrófilos excede los límites predefinidos. La pequeña población de células entre la región fantasma y la región de los linfocitos, indica la presencia de eritroblastos, que fueron confirmados con la revisión al microscopio. 12

14 Ejemplos de leucocitosis Linfocitosis Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR Linfocitos Linfocitosis Eritroblastos? LINFO La revisión al microscopio de esta muestra, mostró un porcentaje de linfocitos de 52.75%. Esto fue verificado posteriormete por el dispersograma del diferencial que mostró un aumento de células en la región de los linfocitos ( ). Cuando el porcentaje o el número absoluto de linfocitos exceden los límites predefinidos, el mensaje de alarma linfocitosis aparece. 13

15 Ejemplos de leucocitosis Monocitosis Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR Monocitos Monocitosis Trombocitosis LINFO La revisión al microscopio de esta muestra, mostró un porcentaje de monocitos de 15%. Esto fue verificado posteriormente por el dispersograma del diferencial que mostró un aumento de células en la región de los monocitos ( ). Cuando el porcentaje o el número absoluto de monocitos exceden los límites predefinidos, el mensaje de alarma monocitosis aparece. 14

16 Ejemplos de leucocitosis Eosinofilia Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR SINÓFILOS Eosinofilia LINFO META 0.25 La revisión al microscopio de esta muestra, mostró un porcentaje de eosinófilos de 32.5%. Esto fue verificado posteriormete por el dispersograma del diferencial que mostró un aumento de células en la región de los eosinófilos ( ). Cuando el porcentaje o el número absoluto de eosinófilos exceden los límites predefinidos, el mensaje de alarma eosinofilia aparece. 15

17 Ejemplos de leucocitosis Basofilia Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR Basófilos Basofilia Anisocitosis Trombocitosis LINFO La revisión al microscopio de esta muestra, mostró un porcentaje de basófilos de 4.75%. Esto fue verificado posteriormete por el dispersograma del diferencial que mostró un aumento de células en la región de los basófilos ( ). Cuando el porcentaje o el número absoluto de basófilos exceden los límites predefinidos, el mensaje de alarma basofilia aparece. 16

18 Casos de anormalidades en la línea de leucocitos Presencia de mieloblastos (1) AML 18 Presencia de mieloblastos (2) CMMoL 19 Presencia de granulocitos inmaduros (1) AML 20 Presencia de granulocitos inmaduros (2) 21 Presencia de granulocitos inmaduros y linfocitos atípicos (1) 22 Presencia de granulocitos inmaduros y linfocitos atípicos (2) PCL 23 Presencia de granulocitos inmaduros y linfocitos atípicos (3) Mieloma 24 Presencia de linfoblastos ALL 25 Presencia de linfocitos anormales CLL 26 Presencia de cuerpos de Döhle 27 17

19 Casos de anormalidades en la línea de leucocitos Presencia de mieloblastos (1) AML Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR Blastos Dispersograma anormal de leucocitos Leucocitosis Blastos? Gran. Inmad.? Desv. Izda.? Eritroblastos? Anemia Distribución anormal de plt Trombocitopenia 8.50 LINFO BLASTOS MIELO 0.75 META 1.75 N 1.25/100 La revisión al microscopio de esta muestra, reveló un 86.25% de blastos con características mieloides. El dispersograma del diferencial revela un grupo de células dominante que aparece en el área de linfocitos y monocitos, así como la región de alarma de los blastos. La mayoría de estos blastos muestran un elevado contenido de ARN/ADN debido a su actividad de proliferación, que es reflejada por su alta señal de fluorescencia en el dispersograma del diferencial. Por consecuencia, el mensaje de sospecha Blastos? es generado. 18

20 Casos de anormalidades en la línea de leucocitos Presencia de mieloblastos (2) CMMoL Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR Plaquetas grandes Blastos Dispersograma anormal de leucocitos Basofilia Leucocitosis Blastos? Desv. Izda.? Distribución anormal de plt 4.50 LINFO BLASTOS PRO MIELO 1.25 MIELO 5.75 META 2.75 La revisión al microscopio de esta muestra, reveló un 75.25% de blastos con características mieloides. El dispersograma del diferencial revela un grupo de células dominante que aparece en el área de linfocitos y monocitos, así como la región de alarma de los blastos. La mayoría de estos blastos muestran un elevado contenido de ARN/ADN debido a su actividad de proliferación, que es reflejada por su alta señal de fluorescencia en el dispersograma del diferencial. El mensaje de sospecha Blastos? es disparado coincidiendo con lo encontrado en el frotis. La presencia de plaquetas gigantes en la muestra, se puede ver en el histograma entre la fracción de plaquetas y eritrocitos. 19

21 Casos de anormalidades en la línea de leucocitos Presencia de granulocitos inmaduros (1) AML Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR Plaquetas Granulocitos inmaduros Monocitosis Gran. Inmad.? Desv. Izda.? Linfocitos anormales? Anemia Trombocitosis Parámetros de investigación IG LINFO BLASTOS 0.50 MIELO 5.75 META 2.00 N 0.25/100 La revisión al microscopio de esta muestra, reveló un 2% de metamielocitos y 5.75% de mielocitos. En el dispersograma del diferencial el centroide de los neutrófilos se extiende hacia la región de alarma de IG de intensidad de fluorescencia más alta, indicando la presencia de granulocitos inmaduros (IG). Dichas células pueden ser distinguidas de los neutrófilos maduros por su elevado contenido de ácidos nucleicos en particular en el citoplasma. En este caso se contaron 5.3% de metamielocitos, mielocitos y promielocitos en la región de granulocitos inmaduros (parámetro de investigación: IG). 20

22 Casos de anormalidades en la línea de leucocitos Presencia de granulocitos inmaduros (2) Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR Granulocitos inmaduros Monocitosis Gran. Inmad.? Desv. Izda.? Linfocitos atípicos? Anemia Parámetros de investigación IG LINFO BLASTOS 0.25 MIELO 3.25 META 3.75 N 0.25/100 Granulación tóxica Bandas Linfocitos atípicos En esta muestra, se detectaron por revisión microscópica metamielocitos, mielocitos y neutrófilos con granulación tóxica. En el dispersograma del diferencial el centroide de los neutrófilos se extiende hacia la región de alarma de IG de intensidad de fluorescencia más alta, indicando la presencia de granulocitos inmaduros (IG). Dichas células pueden ser distinguidas de los neutrófilos maduros por su elevado contenido de ácidos nucleicos en particular en el citoplasma. En este caso se contaron 6.8% de granulocitos inmaduros (parámetro de investigación: IG), representando metamielocitos, mielocitos y promielocitos, y correlacionaron bien con el método manual con una cuenta de 7% de metamielocitos y mielocitos. 21

23 Casos de anormalidades en la línea de leucocitos Presencia de granulocitos inmaduros y linfocitos atípicos (1) Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR Linfocitos atípicos Granulocitos inmaduros Neutrofilia Monocitosis Leucocitosis Blastos? Gran. Inmad.? Desv. Izda.? Eritroblastos? Parámetros de investigación IG 5.80 Otros LINFO BLASTOS 0.50 PRO MIELO 0.50 MIELO 6.00 META 1.50 N 1.75/100 Linfocitos atípicos En esta muestra se identificaron al microscopio 8% de mielocitos inmaduros así como linfocitos atípicos (células plasmáticas). La región de los neutrófilos se extiende hacia la región de alarma de IG de intensidad de fluorescencia más alta, indicando la presencia de granulocitos inmaduros (IG). Dichas células pueden ser distinguidas de los neutrófilos maduros por su elevado contenido de ácidos nucleicos en particular en el citoplasma. Esta muestra también revela dos poblaciones separadas de linfocitos. Junto a la población normal de linfocitos, se detecta una población de células con un incremento significativo en el contenido de ácidos nucleicos. En pacientes con enfermedades reactivas, esto representa linfocitos B activados productores de anticuerpos, por ejemplo células plasmáticas o linfocitos plasmocitoides. Su intensidad de fluorescencia es significativamente mayor debido a los ribosomas en su citoplasma asociados con producción de anticuerpos. El parámetro de investigación Otros indica la presencia de 2.4% de estos linfocitosb activados en esta muestra y la alarma de Blastos? es disparada debido al alto número de células en el área de Otros. 22

24 Casos de anormalidades en la línea de leucocitos Presencia de granulocitos inmaduros y linfocitos atípicos (2) leucemia células plasmáticas (PCL) Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR Linfocitos atípicos Granulocitos inmaduros Dispersograma anormal de leucocitos Blastos? Gran. Inmad.? Anemia Parámetros de investigación IG 0.2 Otros LINFO MIELO 0.25 META 0.50 Linfocitos atípicos El dispersograma del diferencial muestra un alto número de células anormales dentro del centroide de los linfocitos y monocitos así como en el área de intensidad de fluorescencia alta, representando células con alto contenido de ácidos nucleicos. Tanto los blastos como los linfocitos reactivos pueden ser detectados en esta área respectiva. En este caso, se confirmó un alto número de células plasmáticas por revisión del frotis al microscopio. Normalmente, las células plasmáticas son detectadas en el área de intensidad de fluorescencia alta debido a su gran cantidad de ribosomas. Sin embargo, en este caso de leucemia de células plasmáticas (LCP), dichas células son casi en su mayoría anormales. La alarma de blastos es disparada para esta muestra debido a la diversidad de células plasmáticas anormales no funcionales que se encuentran formando un centroide que se extiende desde la población de linfocitos normales hacia el área de alarma de linfocitos atípicos. 23

25 Casos de anormalidades en la línea de leucocitos Presencia de granulocitos inmaduros y linfocitos atípicos (3) Mieloma Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR Linfocitos atípicos Monocitosis Gran. Inmad.? Desv. Izda.? Linfocitos atípicos? Anisocitosis Anemia Trombocitopenia Granulocitos inmaduros Parámetros de investigación IG 3.2 Otros LINFO MIELO 1.50 META 2.25 Linfocitos atípicos En esta muestra se identificaron al microscopio un pequeño número de granulocitos inmaduros y linfocitos atípicos. El dispersograma del diferencial confirma esto con un pequeño número de células que aparecen en la región de linfocitos de alta fluorescencia ( ) ( Otros : 0.9%). El centroide de los neutrófilos se extiende hacia la región con fluorescencia más alta, representando 3.2% de granulocitos inmaduros. 24

26 Casos de anormalidades en la línea de leucocitos Presencia de linfoblastos ALL Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR Blastos Dispersograma anormal de leucocitos Leucocitosis Blastos? Gran. Inmad.? Desv. Izda.? Eritroblastos? Anemia Distribución anormal de plt Trombocitopenia 9.50 LINFO BLASTOS MIELO 1.00 META 2.25 N 4.75/100 La revisión al microscopio de esta muestra, reveló un 83.25% de blastos. El dispersograma del diferencial revela un grupo de células dominante que aparece en el área de linfocitos y monocitos, así como la región de alarma de los blastos. La mayoría de estos blastos muestran un elevado contenido de ARN/ADN debido a su actividad de proliferación, que es reflejada por su alta señal de fluorescencia en el dispersograma del diferencial. En consecuencia, el mensaje de sospecha Blastos? es disparado. Durante el progreso de la enfermedad, la cuenta de plaquetas baja drásticamente, indicado por el mensaje de alarma trombocitopenia. Los límites para generar esta alarma pueden ser predefinidos. 25

27 Casos de anormalidades en la línea de leucocitos Presencia de linfocitos anormales CLL Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR CLL Dispersograma anormal de leucocitos Leucocitosis Linfocitos atípicos? Linfocitos anormales? Anisocitosis 0.25 LINFO La revisión al microscopio de esta muestra con una cuenta elevada de leucocitos, mostró un 99.5 % de linfocitos anormales. El dispersograma del diferencial revela una población dominante de linfocitos con intensidad de fluorescencia consistente, sugestiva de un bajo contenido de ARN/ADN en estas células. Morfológicamente los linfocitos anormales generalmente muestran un ligero incremento en la señal de dispersión lateral, indicando una mayor complejidad interna de dichas células en comparación con los linfocitos normales. Aparecen en la región entre los linfocitos y monocitos. La alarma de Linf. Anorm. es generada coincidiendo con lo encontrado en el frotis. 26

28 Casos de anormalidades en la línea de leucocitos Presencia de cuerpos de Döhle Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR Granulocitos inmaduros Linfopenia Monocitosis Gran. Inmad.? Desv. Izda.? Linfocitos atípicos? Anisocitosis Anemia Parámetros de investigación IG 17.8 Otros LINFO PRO MIELO 0.75 MIELO 1.00 META 2.75 Bandas Linfocitos atípicos Cuerpos de Döhle En esta muestra se identificaron al microscopio granulocitos inmaduros y neutrófilos con cuerpos de Döhle. El XS confirma esto con los mensajes IP de Gran. Inmad.? y Desv. Izda.?. El alto número de IG (datos de investigación 18%) en esta muestra, refleja neutrófilos (maduros) con restos de ribosomas (ARN). Los ribosomas generalmente se encuentran presentes en células inmaduras, pero también pueden verse en neutrófilos maduros si el proceso de maduración de estas células es muy rápido. 27

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30 Casos de anormalidades en la línea de eritrocitos Población de eritrocitos dimórfica (1) 30 Población de eritrocitos dimórfica (2) 31 Presencia de eritroblastos 32 Presencia de eritroblastos muestra con punteado basófilo 33 Presencia de eritroblastos muestra con drepanocitos 34 Anisocitosis muestra con acantocitos 35 Presencia de macro eritrocitos 36 Presencia de Rouleaux 37 29

31 Casos de anormalidades en la línea de eritrocitos Población dimórfica de eritrocitos (1) Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR Hipo Normal Monocitosis Distribución anormal de eritrocitos Población dismórfica Anemia LINFO MIELO 0.50 META 0.25 El histograma de eritrocitos en esta muestra, revela dos picos representando a dos poblaciones de diferente tamaño de eritrocitos con el mensaje de alarma Población dimórfica generado. El volumen corpuscular medio () fue de 76fl. El número y volumen medio de los eritrocitos pequeños (pico izquierdo) y grandes (pico derecho) puede verse en la pantalla de servicio: Información de los eritrocitos pequeños: S#: 1.77x10 12 /L, S: 62.8 fl Información de los eritrocitos grandes: L#: 2.34x10 12 /L, L: fl La revisión manual al microscopio, muestra eritrocitos hipocrómicos así como eritrocitos normales. 30

32 Casos de anormalidades en la línea de eritrocitos Población dimórfica de eritrocitos (2) Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR Hipo y Micro Hipo y Micro N Normal Dispersograma anormal de leucocitos Neutrofilia Monocitosis Leucocitosis Gran. Inmad.? Eritroblastos? Anisocitosis Microcitosis Anemia Distribución anormal de plt Parámetros de investigación IG 0.6 Otros LINFO MIELO 2.00 N 4.00/100 En esta muestra, el histograma de eritrocitos, muestra un pico con un volumen corpuscular medio ( por sus siglas en inglés) de 60 fl y un pequeño pico de aproximadamente 85 fl. Esto representa una población de eritrocitos microcíticos y una población más pequeña de eritrocitos normales. Este ejemplo es representativo de un paciente anémico recibiendo terapia con hierro. 31

33 Casos de anormalidades en la línea de eritrocitos Presencia de eritroblastos (N por sus siglas en inglés) Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR N Dispersograma anormal de leucocitos Leucocitosis Eritroblastos? Anemia Trombocitosis Cúmulos de plaquetas? LINFO MIELO 0.50 N /100 Fragmentos Codocitos En esta muestra se observaron eritroblastos en la revisión al microscopio. El dispersograma del diferencial muestra una población celular anormal en la región entre el fantasma y los linfocitos, generando el mensaje de sospecha N?. Por revisión microscópica se observaron 252 eritroblastos por 100 leucocitos, codocitos y esquizocitos. 32

34 Casos de anormalidades en la línea de eritrocitos Presencia de eritroblastos muestra con punteado basófilo Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR N Linfopenia Monocitosis Gran. Inmad.? Desv. Izda.? Eritroblastos? Hipocromia Anemia Granulocitos inmaduros Parámetros de investigación IG 2.6 Otros LINFO MIELO 3.25 META 2.50 N 4.00/100 Punteado basófilo Este paciente anémico muestra un elevado (103.1 fl) y el histograma de eritrocitos está desplazado hacia la derecha. En el dispersograma del diferencial, los eritroblastos forman una pequeña población en la región de alarma de eritroblastos (N) entre los linfocitos y la región fantasma, generando el mensaje de sospecha de N?. En la región de granulocitos inmaduros, arriba de la región de los neutrófilos, se midieron 2.6% de granulocitos inmaduros (datos de investigación). En la observación al microscopio, se encontraron 4 eritroblastos por 100 leucocitos y 5.75% granulocitos inmaduros. La morfología de los eritrocitos muestra punteado basófilo. Sin embargo, esto no es indicado por el instrumento ya que no interfiere con los resultados. 33

35 Casos de anormalidades en la línea de eritrocitos Presencia de eritroblastos muestra con drepanocitos Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR N Monocitosis Eritroblastos? Anemia Parámetros de investigación IG 0.3 Otros LINFO META 5.00 N 2.00/100 Drepanocitos Este paciente con anemia drepanocítica, revela la presencia de pocos eritroblastos y muchos drepanocitos en el frotis preparado sin oxígeno. El dispersograma del diferencial, muestra una población anormal pequeña en la región entre el fantasma y los linfocitos, que está generando el mensaje de sospecha de N? coincidiendo con lo observado al microscopio. El histograma de eritrocitos es discreto. 34

36 Casos de anormalidades en la línea de eritrocitos Anisocitosis muestra con acantocitos Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR Dispersograma anormal de leucocitos Linfocitos anormales? Anisocitosis Anemia Distribución anormal de plt LINFO Acantocitos Este paciente anémico tiene un ligeramente disminuido. El histograma de eritrocitos está ligeramente ensanchado, lo que está representado por los parámetros ancho de distribución eritrocitaria desviación estándar (RDWSD) y ancho de distribución eritrocitaria coeficiente de variación (RDWCV). Debido al incremento en los parámetros de RDW, el mensaje de alarma Anisocitosis es generado. En la revisión al microscopio de la muestra, se observaron eritrocitos hipocrómicos, acantocitos y anisocitosis. 35

37 Casos de anormalidades en la línea de eritrocitos Presencia de macro eritrocitos Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR Monocitosis Gran. Inmad.? Linfocitos atípicos? Anisocitosis Macrocitosis Anemia Parámetros de investigación IG 0.4 Otros LINFO MIELO 0.25 N 1.00/100 Bandas Granulación tóxica Esta muestra de un paciente anémico tiene un de 120 fl. El pico del histograma de eritrocitos está desplazado hacia la derecha y el ancho de distribución (RDWSD, RDWCV) están aumentados significativamente. El frotis de sangre periférica muestra macrocitos abundantes. 36

38 Casos de anormalidades en la línea de eritrocitos Presencia de Rouleaux Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR Monocitosis Gran. Inmad.? Desv. Izda.? Linfocitos atípicos? Linfocitos anormales? Granulocitos inmaduros LINFO MIELO META 1.50 Rouleaux En la revisión al microscopio del frotis, se observan formaciones de Rouleaux. Sin embargo, el análisis automatizado no se ve influenciado en los analizadores hematológicos ya que la muestra es diluida antes de su análisis. Además, las células de diferentes tamaños son claramente separadas por el sistema de enfoque hidrodinámico utilizado en el detector de /. 37

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40 Casos de anormalidades en la línea de plaquetas Trombocitosis ET 40 Trombocitopenia ITP 41 Presencia de plaquetas gigantes 42 Presencia de agregados plaquetarios 43 39

41 Casos de anormalidades en la línea de plaquetas Trombocitosis ET Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR Basofilia Anisocitosis Trombocitosis LINFO Hipersegmentación Codocitos Este paciente padece trombocitemia esencial. La cuenta de plaquetas es elevada. La región del fantasma en el histograma de eritrocitos, indica la presencia de muchos trombocitos. La revisión al microscopio del frotis, confirma la presencia de muchas plaquetas, neutrófilos hipersegmentados, anisocitosis y codocitos. 40

42 Casos de anormalidades en la línea de plaquetas Trombocitopenia ITP Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR gigantes N Linfopenia Gran. Inmad.? Eritroblastos? Anisocitosis Distribución anormal de plt Trombocitopenia LINFO MIELO 0.50 META 1.00 N 4.00/100 Plaquetas gigantes Este es un caso de púrpura trombocitopénica idiopática. El histograma de plaquetas es anormal debido a las plaquetas gigantes. Ya que estas plaquetas tienen casi el mismo tamaño que los eritrocitos y leucocitos, no pueden ser detectadas en la región de conteo de plaquetas en el histograma. Debido a su gran tamaño, las plaquetas gigantes son contadas en la región de la población de eritrocitos. El mensaje de alarma indica una cuenta reducida de plaquetas del instrumento. 41

43 Casos de anormalidades en la línea de plaquetas Presencia de plaquetas gigantes Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR Granulocitos inmaduros Neutropenia Monocitosis Leucocitosis Gran. Inmad.? Desv. Izda.? Distribución anormal de plt Parámetros de investigación IG LINFO MIELO 1.00 META 2.75 N 0.50/100 Plaquetas gigantes En esta muestra, el histograma de plaquetas está ensanchado, sugiriendo anisocitosis plaquetaria. También el resultado elevado del ancho de distribución plaquetaria () indica esto. En la revisión al microscopio, se observan muchas plaquetas gigantes. 42

44 Casos de anormalidades en la línea de plaquetas Presencia de agregados plaquetarios Información del XS1000i Datos de análisis del XS1000i RDWSD RDWCV PLCR Cúmulos de Granulocitos inmaduros Gran. Inmad.? Linfocitos atípicos? Anemia Cúmulos de plaquetas? Parámetros de investigación IG LINFO BLASTOS 2.00 META 3.00 N 6.00/100 Cúmulos de plaquetas El dispersograma del diferencial muestra una pequeña población dentro de la región de alarma de cúmulos de plaquetas localizada entre la región fantasma y los basófilos. Se genera el menaje de sospecha de Cúmulos de plaquetas?. En la revisión al microscopio, se encontraron algunos agregados plaquetarios. Con un alto número de agregados plaquetarios, el resultado de plaquetas podría estar falsamente disminuido. Los resultados deberían ser reconfirmados analizando una nueva muestra o utilizando citrato como anticoagulante en caso de incompatibilidad con el EDTA. 43

45 El propósito de los avisos generados por este instrumento es limitado a la identificación de muestras que contienen células anormales, sujeto a revisiones por personal calificado del laboratorio. Scientific Affairs 132 Murotani, Nishiku, Kobe, , Japan URL : Analizadores hematológicos automatizado Serie XS Reporte de casos clínicos Abril, Primera edición 44