TEÓRICO PRÁCTICO 2 HEMOGLOBINA HEMATÓCRITO ÍNDICES HEMATIMÉTRICOS VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN GLOBULAR ALTERACIONES MORFOLÓGICAS DE LOS ERITROCITOS
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- Luz Ponce Rivas
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1 TEÓRICO PRÁCTICO 2 HEMOGLOBINA HEMATÓCRITO ÍNDICES HEMATIMÉTRICOS VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN GLOBULAR ALTERACIONES MORFOLÓGICAS DE LOS ERITROCITOS BIOQUÍMICA CLÍNICA I. INSTITUTO DE BIOQUÍMICA APLICADA. FACULTAD DE BIOQUÍMICA, QUÍMICA Y FARMACIA. UNT. HEMOGLOBINA HEMOGLOBINA A 1 HEMOGLOBINAS NORMALES 1.HbA 1 : >95%-α 2 β 2 2.HbA 2 : 1,5-3,5%-α 2 δ 2 3.HbF: <2%-α 2 γ 2 1
2 DETERMINACIÓN DE HB FUNDAMENTO DEL MÉTODO DE CIANMETAHB Hemoglobina + ferricianuro de K metahemoglobina (Hi) Hi + cianuro de K cianmetahemoglobina (HiCN) pigmento estable que se lee a 540 nm TÉCNICA Blanco Estándar Desconocido Reactivode Hb 5mL 5mL 5mL H 2 Odest 20µL - - Estándar de Hb - 20 µl - Muestra µl Mezclar los tubos y luego de 3 minutos leer en espectrofotómetro a 540 nm, llevando el aparato a 0 con H 2 Odestilada. El color es estable por 24 hs. DETERMINACIÓN DE HB EN CONTADORES HEMATOLÓGICOS MÉTODO: Lauril sulfato sódico Reactivo libre de cianuro No causa daño al medio ambiente Menor interferencia en muestras: Lipémicas Ictéricas Recuentos altos de leucocitos Proteínas anormales 2
3 Método Lauril Sulfato de Sodio Fe 2+ Fe 3+ Fe 3+ SLS Grupo hidrofílico del SLS se une a la molécula de globina Ocurre un cambio de configuración Oxidación de Fe 2+ --> Fe 3+ Grupos Hidrofílicos de SLS se unen a Fe --> SLS-Hb. Lectura a 580 nm Reactivos no son utilizados para otra medición, de acción fuerte que lisan todas las células impidiendo interferencias VALORES DE REFERENCIA DE HB EDAD sangre de cordón 1-3 días 1 semana 2 meses 6 meses 1 año 5 años HEMOGLOBINA (g/l) años adultos mujeres varones
4 HEMATÓCRITO DEFINICIÓN Relación entre el volumen de eritrocitos con respecto al volumen de sangre total. MÉTODOS DE DETERMINACIÓN DEL HEMATÓCRITO CENTRIFUGACIÓN 1. MACROMÉTODO 2. MICROMÉTODO TUBOS CAPILARES TUBO DE WINTROBE ELECTRÓNICO 4
5 MICROHEMATÓCRITO MÉTODO ELECTRÓNICO PARA DETERMINACIÓN DEL HTO Calculado Hto= VCM x Número de GR Medido como sumatoria de los volúmenes de los glóbulos rojos en una cantidad de muestra fija. 5
6 VALORES DE REFERENCIA DEL HTO EDAD HEMATÓCRITO (L/L) Sangre de cordón 0,46-0, días 1 semana 2 meses 6 meses 1 año 5 años 8-13 años 0,48-0,68 0,44-0,60 0,31-0,45 0,31-0,41 0,30-0,40 0,32-0,42 0,34-0,44 Adultos mujeres varones 0,37-0,47 0,42-0,52 ÍNDICES HEMATIMÉTRICOS VOLUMEN CORPUSCULAR MEDIO (VCM) HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIA (HCM) CONCENTRACIÓN DE HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIA (CHCM) 6
7 VOLUMEN CORPUSCULAR MEDIO VCM= Hematócrito (L/L) Nº de GR (T/L) VR: fl Ejemplo: Hto: 45% (0,45 L/L) GR: 5 x /L VCM= 0,45 (L/L) 5 x /L 0,090 x L = = 90 x L 90 fl HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIA HCM= Hemoglobina (g/l) Nº de GR (T/L) VR: pg Ejemplo: Hb: 15 g/dl (150 g/ L) GR: 5 x /L HCM= 150 g/l 5 x /L = 30 x g 30 pg 7
8 CONCENTRACIÓN DE HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIA CHCM= Hemoglobina (g/l) Hematocrito (L/L) VR: g/l Ejemplo: Hb: 15 g/dl (150 g/l) Hto: 0,45 L/L CHCM= 150 (g/l) 0,45 (L/L) = 333g/L AMPLITUD DE DISTRIBUCIÓN DE LOS ERITROCITOS SEGÚN EL VOLUMEN Dos fórmulas matemáticas usadas para describir la variación de tamaño de los eritrocitos (Anisocitosis) ADE-CV: % ADE-DE: <55 fl ANISOCITOSIS SEGÚN RDW 1+ (ó variación mínima) 55 fl a 64.9 fl 2+ (ó variación moderada) 65 fl a 74.9 fl 3+ (variación máxima ó considerable) >75 fl 8
9 AMPLITUD DE DISTRIBUCIÓN DE LA CONCENTRACIÓN DE HEMOGLOBINA Índice de Anisocromía Valor de Referencia: g/dl ADH ó HDW elevado: Anemia ferropénica, Talasemia menor (RDW normal y HDW aumentado), Regeneración medular, etc. ERITROSEDIMENTACIÓN Velocidad Longitud en un tiempo determinado Factores plasmáticos Factores eritrocitarios Factores técnicos 9
10 Fases de la VSG Inicial Sedimentación Final MÉTODOS DE DETERMINACIÓN DE LA VSG Método de Westergreen Micrométodo de Chattás Reactivo: Citrato de Na % Proporción 1:4 (1parte de anticoagulante + 4partes de sangre) Muestra: sangre venosa o capilar Pipeta de Westergreen mm 2.5 mm Pipeta de Chattás 40 0 S 1 mm 13 mm 10
11 MÉTODO CLÁSICO MÉTODO AUTOMATIZADO VALORES DE REFERENCIA DE LA VSG Niños 0-10 mm/h Adultos Varones < 50 años 0-15 mm/h > 50 años 0-20 mm/h Mujeres < 50 años 0-20 mm/h > 50 años 0 30mm/h 11
12 SITUACIONES QUE MODIFICAN LA VSG Aumento Disminución Fisiológico Policitemia Vera embarazo Esferocitosis, cél falciformes puerperio Hipofibrinogenemia envejecimiento ciclo menstrual Patológico infecciones procesos inflamatorios crónicos anemias crioaglutininas gammapatías monoclonales ALTERACIONES MORFOLÓGICAS ERITROCITARIAS Alteraciones del tamaño Alteraciones del color Alteraciones de la forma Presencia de inclusiones eritrocitarias 12
13 ALTERACIONES DEL TAMAÑO Localización de GR en el histograma Reticulocitos RBC Microcitos y fragmentos cel Macrocitos VCM (fl) Plaquetas Agregados Celulares TAMAÑO NORMAL ANISOCITOSIS 13
14 Anemia Microcítica hipocrómica Anemia megaloblástica 14
15 MICROCITOSIS MACROCITOSIS ALTERACIONES DEL COLOR Anisocromía Hipocromía Policromasia Pseudohipercromía 15
16 ANISOCROMÍA HIPOCROMÍA PSEUDOHIPERCROMÍA POLICROMASIA 16
17 DISCROMÍA CÉLULAS EN DIANA (TARGET CELL) ESTOMATOCITOS ALTERACIONES DE LA FORMA Poiquilocitosis: coexistencia de eritrocitos de diversas formas - Esferocitos - Drepanocitos - Eliptocitos - Equinocitos - Acantocitos - Dacriocitos - Esquistocitos o esquizocitos 17
18 NORMAL POIQUILOCITOSIS POIQUILOCITOSIS 18
19 ESQUISTOCITOS ESFEROCITOS- ESQUISTOCITOS 19
20 ESFEROCITOS DREPANOCITOS ELIPTOCITOS 20
21 PRESENCIA DE INCLUSIONES ERITROCITARIAS Punteado basófilo Cuerpos de Howell-Jolly Anillos de Cabot Parásitos: Plasmodium falciparum, Plasmodium malariae, Babesias PUNTEADO BASÓFILO 21
22 CUERPOS DE HOWEL JOLLY ANILLOS DE CABOT 22
23 ERITROBLASTOS LEUCOCITOS REALES= LEUCOCITOS CONTADOSX100 EB(%)+100 FORMAS PARASITARIAS EN ERITROCITOS MALARIA (FORMA ANILLADA DEL Plasmodium malariae) 23
24 PARÁSITOS EN SANGRE PERIFÉRICA Toxoplasma Tripanosoma Filaria AGRUPACIÓN DE LOS GR AGLUTINACIÓN ERITROCITARIA FORMACIÓN DE ROULEAUX 24
25 Crioaglutininas-Crioglobulinas GRACIAS POR SU ATENCIÓN 25
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