CO C U O L U T L ER R ST S KS K

Transcripción

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2 COULTER STKS

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4 DIAGNÓSTICO VS PRONÓSTICA Entrada Sintomas Infección Enfermedad

5 PARACLINICOS Y SU CORRELACION PROBABILIDAD PRETEST LIKELIHOOD RATIO LR TEOREMA DE BAYES LR(+) CONFIRMA 3.0 LR(-) ) DESCARTA 0.1

6 PRUEBAS PRONÓSTICAS PRUEBA ENFERMEDAD PUNTO DE CORTE LR(+) LR(-) PCR SEPSIS 4,0mg/dL. 6,84 (67%) 0 SHOCK SEPTICO 1,50 0,17 LEUCOCITOS FARINGITIS 12000/mm (40%) 0,88 APENDICITIS 3,25 0,15 PCT PANCREATITIS INFECTADA 5,0ng/mL ml. 9,70 (90%) 0,09 GRIPAL 0,88 2,15 TRIGLICERIDOS MENINGITIS 120mg/dL. 0,55 1,50 UCI 3,15 0,45

7 DEFINICIÓN Hto Hematocrito Hb Hemoglobina RBC Recuento Eritrocitos Hematíes, G.Rojos WBC Recuento Leucocitos G. Blancos DIFERENCIAL Ne% Eo% Ba% Mo% Ly%

8 ANTECEDENTES HISTÓRICOS 1950 Wright,Wintrobe 1959 Joseh,Wallace Coulter 1967/75 Van Villa WBC J.England DWBC Coulter Indices Eritrocitarios Mohandas - Laser 1976/80 Wycherley Osea y Combleet, Kessinger Histogramas Electromagnetismo Conductividad Otros Technicon Coulter

9 LÉXICO MÉDICO LEUCOCITOS TOTALES WBC /mm 3 CITOSIS FILIA NEUTRÓFILOS LINFOCITOS EOSINÓFILOS MONOCITOS BASÓFILOS 55-65% 25-35% 1-4% 3-8% 0-1% PENIA Absoluto VS relativo

10 IMPEDANCIA Malas Conductoras eléctricas Interaccion intracelular Con radiaciones de baja Frecuencia(Electromagnetismo, radio, otras) CONDUCTIVIDAD DISPERSION LASER Variabilidad En la Refraccion de luz laser

11 METODOLOGÍAS TÉCNICAS Y CONCEPTO GENERACIONAL 2A SEMIAUTOMATIZADO 3A AUTOMATIZADO, NO DILUCIONES,INDICES SECUNDARIOS 4A SISTEMAS GRAFICOS DISTRIBUCIÓN 5A LEUCOCITOS, DISPERSOGRAMAS, RETICULOCITOS ETC. DISPERSIÓN (Luz - Imagen) IMPEDANCIA (Flujo Eléctrico-Cambios) CONDUCTIVIDAD (Características) CITOMETRÍA DE FLUJO

12 CARACTERÍSTICAS BIOLÓGICAS CELULARES VCM fl HCM 27-33pg Vol 90fl Area 97um 2 2,2-2.8 um 0,5-1.1um 140um um

13 Linfocito Linfocito 7-10um 10um fL 90fL Mononuclear Mononuclear Gr Gránulos nulos azur azurófilos filos Citop.gris Citop.gris-azul azul NC aumentada NC aumentada Adherencias Adherencias Neutr Neutrófilo filo 9-15um 15um fL 140fL Polinuclear Polinuclear Gr Gránulos nulos Espec Específicos ficos Citop.rosado Citop.rosado NC disminuido NC disminuido Adherencias Adherencias Eosin Eosinófilo filo um 17um fL 150fL Binuclear Binuclear PCE PCE-PCM PCM-NDE NDE Citop.azul Citop.azul NC disminuido NC disminuido Adherencias Adherencias Bas Basófilo filo um 14um fL 120fL Polinuclear Polinuclear FAC FAC-Proteasa Proteasa FAL FAL Citop.rosado Citop.rosado NC disminuido NC disminuido Adherencias Adherencias Monocito Monocito um 20um fL 200fL Mononuclear Mononuclear Gr Gránulos nulos azur azurófilos filos Citop.gris Citop.gris NC aumentada NC aumentada Adherencias Adherencias

14 Caracteristicas Nucleares Tamaño Peroxidasa Basófilo

15 FUNCIONAMIENTO TÉCNICO

16 Funcionamiento técnico ERITROS,Hb Y/O PLAQUETAS LEUCOS Reticulocitos Otros PLAQUETAS

17 OSCILOSCOPIO

18 CANTIDAD INTENSIDAD (CANALES)

19 A FL B FL C FL D FL E FL T5 T4 T3 T2 T1 CHANNEL 4 CHANNEL 3 CHANNEL 2 CHANNEL 1

20 350 FL 125 FL 90 FL 55 FL 20 FL T5 T4 T3 T2 T1 CHANNEL 4 CHANNEL 3 CHANNEL 2 CHANNEL 1 UMBRALES ERITROCITARIOS 40 FL 35 FL 30 FL 25 FL 20 FL T5 T4 T3 T2 T1 CHANNEL 4 CHANNEL 3 CHANNEL 2 CHANNEL 1 UMBRALES PLAQUETARIOS

21 6 5 4 Número FENTOLITROS Histograma Moda de partículas Tamaño o de las partículas Distribución n en torno a la media

22 HISTOGRAMAS RBC WBC PLT HGB Número de Canales Tamaño o Umbrales Número de CámarasC Diluyente de CámarasC

23 Moda Población n Principal RBC fl 360fl Valor medio VCM ADE TOE Dedos fl

24 MICROCITICOS HIPOCROMICOS RBC fl 360fl NORMOCITICOS NORMOCROMICOS MACROCITICOS NORMOCROMICOS fl

25 Sin estabilizante Con estabilizante

26 ANGULO BAJO 2 3 o Conteo Volumen

27 10mg/dL 15mg/dL 120fL 60fL CITOGRAMAS ERITROCITARIOS

28 Tamaño Scatter Plot Granularidad ANGULO ALTO 5 15 o HGB GRÁNULOS

29 Colorante Cámara para tincionar gránulos de peroxidasa PEROXIDASA SURFACTANTES 4 CLORO 1 NAFTOL. Reactividad Claridad Oscuridad REACCIÓN COLOREADAS NO REACCIÓN INCOLORAS CANAL PEROXIDASA

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31 Tamaño PEROXIDASA

32 REACTIVOS SURFACTANTES ÁCIDO TALICO. CANAL BASÓFILO LOBULARIDAD

33 Tamaño REFRACCIÓN

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35 OPACIDAD TAMANO

36 TAMAÑO fl 350 Mono Neutro B B Mono Neutro Baso Eos B Baso Eos 30 Linfo Linfo No Blancos No Blancos Granularidad - Opacidad

37 Monocitos Neutrófilos DISPERSOGRAMA Eosinófilos Linfocitos No leucocitos Basófilos

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40 RESPUESTA INMUNE RESPUESTA HEMATOLÓGICA RESPUESTA FISIOLÓGICA SINTOMATOLOGÍA DIAGNÓSTICO CLÍNICO

41 Linfocitos T - B Monocitos (Macrófagos Kuffer,Histiocitos,Gliales) Basófilos (Mastocitos) C.en velo (Dendríticas) Neutrófilos,Eosin filos,eosinófilos Eritrocitos - GR Plasma Leucocitos - GB Plaquetas Trombocitos Funciones celulares

42 Intracelulares Intracelulares Virus Bacterias Mycobacterias,, Salmonella, Listerias, Legionellas. Clamidias, Ricketsias Parásitos Tripanosomas,Leishmanias Hongos Histoplasma, Blastomices, Coccidioides, Paracoccidioides. Extracelulares Extracelulares Cocos piógenos ( Staphylococcus-Streptococcus ), Cocos gram negativos ( Meningococo -Gonococo), Bacilos entéricos ( E.Coli ), Bacilos gram positivos ( Clostridun ) etc. Estrictos Evasores del sistema Inmune

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45 CD 4+ CD T h 2 IL - 4 IL - 3 Mastocito IL - 5 Eosinófilos EOSINOFILIA 1-4% Factores Quimiotácticos Histamina, Heparina, Leucotrienos,, PGS MBP; ECP Neurotoxina Peroxidasa

46 fiebre tifoidea,brucelosis, Tuberculosis, subagudas. CD4+ Citotoxicidad CD8+ Hipersensibilidad retardada MONOCITOS LINFOCITOS

47 HLA ABO Transplantes Complejos Inmunes autoinmunes Enfermedad cronica Respuesta Extracelular Hipersensibilidad II Macrófagos Respuesta Intracelular Hipersensibilidad III LT-CD8 Neutrofilia Linfocitosis Alergenos Hipersensibilidad I Mastocitos Eosinofilos Eosinofilia Enfermedades Cronicas BAJA ANTIGENECIDAD Macrófagos Interleuquinas Monocitosis

48 LEUCOPENIA citosis/filia

49 Progenitor linfoide Linfocito Pro B Pre B B inmadura B madura Plasmocito HLA-DR TdT, CD34 c Ig CD19 s Ig c Ig CD10 CD79a CD22 CD5 CD38

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51 Dispersión lateral SSC Mayor a 10º (Side Scatter) Granularidad - complejidad Intensidad de Fluorescencia Relativa FL1/FL2/FL3/FL4 LASER Desvía a la luz incidente. Emite fluorescencia. Dispersión frontal FSC Menor a 10º Forward Scatter Tamaño

52 Granulocitos Gráfica de puntos Como se ubican espacialmente las poblaciones de leucocitos de sangre periférica? Complejidad interna SSC G M Detritos L L L G G Linfocitos M Tamaño relativo FSC M Monocitos

53 Negativas Low Intemediate High M2 M1

54 Marcaje con un solo Ac Control Negativo - Isotipo Gate: G1 Complejidad interna SSC Control de isotipo Qua Event % Gat % To UL Región UR LL LR Tamaño relativo FSC Fluorescencia naranja (FL2) UL LL Gráfica de puntos UR LR Fluorescencia verde (FL1) Anti-CD3 FITC

55 Anti-CD3 FITC Anti-CD4 PrCP Anti-CD8 PE Fluorescencia naranja (FL3) Anti-CD4 PE UL UR LL LR Gráfica de puntos Células marcadas UL 5% CD4- CD8+ UR 60% CD4+ CD8+ LL 25% CD4+ CD8- LR 10% CD4- CD8- Fluorescencia verde (FL3) Anti-CD8 PrCP

56 R1

57 Healthy patient 202 patient 188 IFNγ CD107a/b

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