Avances en el control biológico de Botritys cinerea en chile y tomate cultivados bajo techo

Transcripción

1 Avnces en el control iológico de Botritys cinere en chile y tomte cultivdos jo techo Willims Sls Brenes Ver Sánchez Grit 2 RESUMEN. Se islron hongos con potencil ntgonist sore Botrytis cinere, los cules fueron evludos en el lortorio en cámrs húmeds usndo hojs desprendids. Los mejores ntgonists se evluron tnto en inverndero experimentl como en inverndero comercil. Los ntgonists 04 y 4 (mos del género Trichoderm) mostrron el mejor efecto y consistenci en su control sore el ptógeno; por eso, se les consideró con potencil pr el control iológico de B. cinere. Además, se encontró correlción entre l humedd reltiv máxim y l humedd reltiv mínim con l cntidd de flores infectds por el ptógeno. Esto revel l importnci del mnejo del gu dentro del inverndero como medid pr el control de enfermeddes. Se crcterizó y documentó el mnejo de enfermeddes de tomte en un finc de producción orgánic. Se relizron tres siemrs del hírido Montñ Fresc, presentándose como principles enfermeddes tizón temprno (Alternri solni) y tizón trdío (Phytophthor infestns); ést últim es l más difícil de mnejr, con niveles de infección de hst 00%. Se evluron vris opciones de mnejo, pero los mejores resultdos se otuvieron con l utilizción de extrctos de plnts y otros minerles como zufre, ceniz y core. Plrs clve: plguicids microinos, ntgonists fúngicos, moho gris, Phytophthor infestns, tizón trdío, control de enfermeddes, horticultur orgánic. AstrcT. Biologicl control of Botrytis cinere on pepper nd tomto crops under greenhouse conditions. We isolted fungi with ntgonistic potentil over Botrytis cinere, which is one of the most importnt pthogens in these nd other greenhouse plnts. The fungi were evluted in humid chmers y using detched leves. The est ones were evluted in n experimentl greenhouse nd in commercil one. Antgonists 04 nd 4 (oth elonging to Trichoderm) showed the est results nd consistency in controlling the pthogen. There ws correltion etween the mximum reltive humidity nd the minimum reltive humidity with regrd to the mount of flowers infected y the pthogen. This revels the importnce of mnging wter inside the greenhouse s wy to control these nd other diseses. We chrcterized nd documented tomto diseses in n orgnic production frm. Three sowings of the hyrid Montñ Fresc were crried out. The min diseses presented in these cses were erly light (Alternri solni) nd lte light (Phytophthor infestns); the ltter ws the most difficult to control, s it presented infection levels tht reched 00%. Severl control lterntives were evluted, ut the est results were otined when using extrcts from plnts nd other minerls such s sulfur, shes nd copper. Culturl prctices such s cutting prts of plnts, folir drying with ir, cultivtion under plstic cover nd irrigtion mngement provided good results, lso. Keywords: microil pesticides, fungl ntgonists, grey mould, Phytophthor infestns, lte light, plnt disese control, orgnic horticulture. Introducción El chile dulce (Cpsicum nnuum) y el tomte (Lycopersicon esculentum) son considerdos entre los productos hortícols de myor importnci en Cost Ric, tnto por l ctividd económic socid su producción como por su riquez nutritiv. Según SEPSA (2002), en 995 se plntron 208 h de tomte, que produjeron 839 t, mientrs que en 200 se cosechron t de 43 h plntds. Aunque los precios de mos cultivos vrín mucho en ls diferentes épocs del ño y no siguen un ptrón, los precios promedio por ño hcen que l ctividd se rentle. El precio promedio pr el chile dulce en el período fue de US$ 0,20 l unidd y el costo de producción de US$ 0,4, mientrs que pr el tomte fue de US$ 0,65 el kg y el costo de producción fue de US$ 0,44 (Sndovl 2002). En el cmpo no pueden modificrse ls condiciones climátics, por lo que el cultivo es muy riesgoso, mientrs que l producción jo techo o en miente controldo (inverndero) permite umentr l productividd medinte Vigilnci Control de Plgs, Servicio Fitosnitrio del Estdo, Ministerio de Agricultur y Gnderí. Crtgo, Cost Ric. wsls@protectnet.go.cr 2 CATIE, Turril 770, Cost Ric. snchezv@ctie.c.cr 56

2 el mnejo de lgunos fctores meteorológicos como tempertur, luz y humedd (Morgn 984, Slzr y Cstro 994). Sin emrgo, el cultivo en miente controldo present lgunos prolems, entre ellos plgs y enfermeddes, que l myorí de los productores controln con l plicción de grn cntidd de productos químicos. Entre ls enfermeddes más severs se encuentr el moho gris, cusd por el hongo Botrytis cinere, que tc flores, frutos y tllos de plnts de chile y tomte, cusndo serios dños l cultivo y pérdids económics los productores (Virgen et ál. 99, Eden et ál. 996). El uso continuo de productos químicos pr el control de est enfermedd h provocdo que l polción del hongo se cd vez más resistente (Eld et ál. 992, Leroux et ál. 999, Melgrejo et ál. 2002). Además, existe el riesgo de contminción, que se increment l usr plguicids en condiciones intensivs y mientes cerrdos, en primer lugr porque los trjdores están más expuestos los plguicids, y en segundo lugr porque ument l posiilidd de contminción de gus suterránes, por l concentrción de plguicids en áres pequeñs. Por otro ldo, ls hortlizs que llegn l consumidor pueden presentr myor cntidd de residuos, que en condiciones cmpo ierto serín lvdos por l lluvi. Entre ls opciones de mnejo en invernderos se h considerdo el control iológico, que unque puede ser de cción más lent ofrece l posiilidd de ser más estle, durdero y con menos dños l miente (Bord y Areláez 985). Deido lo nterior y dd l importnci que está dquiriendo el cultivo de chile y tomte en inverndero, se consideró necesrio relizr investigciones que permitn encontrr controldores iológicos de Botrytis cinere. El género Botrytis pertenece l clse Hyphomycetes, orden Monililes, y fue uno de los primeros géneros de hongos descritos. Su nomre, sí como los síntoms de l enfermedd que produce (moho gris), son conocidos desde hce muchos ños. Ls enfermeddes cusds por este hongo son prolemente ls más comunes y más mplimente distriuids en el mundo. Este ptógeno tc principlmente hortlizs, frutles, plnts ornmentles y muchos productos lmcendos; puede fectr csi tods ls prtes de l plnt (Eld 2000, Rosslenroich 2000). B. cineres es fácilmente isldo del suelo donde crece como sprofito; ddo su crecimiento en mteril en descomposición, este es posilemente l principl fuente de inóculo. L enfermedd se desrroll en ciclos secundrios sucesivos que se trslpn y se confunden (Sherf y Mc N 986). El hongo sorevive en el suelo como micelio en plnts muerts, donde form esclerosios que permnecen ltentes. Aunque no puede infectr semills, puede ser disemindo medinte semills contminds o en trozos de plnts infectds. El hongo requiere temperturs de 8 23 C pr un uen crecimiento, esporulción, lierción de espors, germinción de ls misms e infección. En el cmpo, l incidenci de l enfermedd ument cundo hy períodos prolongdos de humedd y temperturs de entre 5 y 20 C, sore todo durnte l florción y l mdurción de los frutos (Ltorre et ál. 997). Ls espors que germinn sore l plnt rr vez penetrn directmente en los tejidos que muestrn crecimiento ctivo; por lo generl, lo hcen trvés de herids, o después de her formdo micelio. Prefieren los pétlos de flores senescentes y follje moriundo de ls plnts (INFOAGRO 2003). Vrios utores considern que es posile mnejr ls condiciones microclimátics en los invernderos pr prevenir el desrrollo de ls enfermeddes. L humedd reltiv se consider entre ls principles condiciones meteorológics por considerr pr el mnejo de B. cinere. Dentro del inverndero, l humedd reltiv dee mntenerse entre 50% y 60%, deido que humeddes superiores el cultivo es más susceptile l tque (Shtienerg y Eld 997, Moyno et ál. 2003). Control iológico Se hn descrito diversos hongos y cteris como controldores iológicos del moho gris. Entre los hongos más estudidos se encuentrn especies de Trichoderm y Cldosporium, prticulrmente Trichoderm hrzinum (Zimnd et ál. 996, Silv-Rieiro et ál. 200). Vrios islmientos hn resultdo eficces pr el control de este ptógeno en cultivos dentro de inverndero (Eden et ál. 996). Eden et ál. (996) encontrron un reducción de l infección en tomte hst del 00% utilizndo T. hrzinum y Cldosporium cldosporioides. En est investigción, prtes terminles de tllo de tomte de 40 mm de longitud fueron introducidos en un solución de espors del B. cinere (2 0 3 ml - ) y luego secds con ire durnte hor y sumergids en un suspensión de espors del ntgonist. El mejor nivel de protección se otuvo con un concentrción de 0 8 conidis por mililitro de gu, plicd dos hors después de inoculr el ptógeno. Similres resultdos se oservron en inverndero en plnts que hín sido podds y ls que se les plicó ls misms concentrciones de ptógeno y ntgonists. Eld y Zimnd (993) encontrron un reducción del 90% del dño cusdo por B. cinere en plnts de pepino cultivds en inverndero con l plicción de T. hrzinum. El ntgonist incrementó su cpcidd de controlr l enfermedd cundo l tempertur fue superior 20 ºC y l humedd reltiv lrededor de 80%. Sin emrgo, con humedd 57

3 reltiv cercn l 00% no se oservó efecto lguno. Ltorre et ál. (997) recomiendn que los trtmientos con este hongo sen complementdos con fungicids convencionles cundo ls condiciones mientles son ltmente fvorles pr el desrrollo de l enfermedd. Kohl et ál. (998) encontrron un resultdo similr l plicr un suspensión de conidis de Ullocldium trum o Gliocldium roseum, 0 6 ml - y ml -, respectivmente, pr el control de B. cinere en plnts de ciclmen (Cyclmen persicum L.). En cunto l uso de cteris, Mri et ál. (996) identificron 3 ceps de Bcillus myloliquefciens que fueron ctivs contr B. cinere. Mteriles y métodos El presente estudio consistió en el islmiento y multiplicción de B. cinere, sí como en el islmiento y l evlución de ntgonists en inverndero experimentl y comercil. Los trjos se relizron en el Lortorio e Inverndero de Fitoptologí de l Unidd de Fitoprotección del Centro Agronómico Tropicl de Investigción y Enseñnz (CATIE), sí como en un inverndero comercil uicdo en Sn Antonio de Snt Cruz de Turril, propiedd del señor Gerrdo Aris. Aislmiento del ptógeno y los ntgonists Se recolectron tllos infectdos con B. cinere en invernderos comerciles de chile y tomte en tres locliddes: Cervntes, L Uriet y Sn Antonio, los cules se colocron en un cámr húmed pr estimulr el crecimiento del hongo. Cundo se oservó l esporulción del ptógeno, este se isló en medio pp-dextros-gr (PDA), incudo 22 ºC con luz fluorescente ltern cd 2 hors. Se usó un mezcl de los islmientos otenidos pr evlur los ntgonists. Pr otener los ntgonists se tomron muestrs del suelo, tllos, hojs y ríces de plnts sns de cultivos donde l enfermedd est presente pr grntizr l otención de ntgonists jo un lt presión de inóculo del ptógeno. Ls muestrs se colocron en gu destild y se gitron durnte 20 minutos; el extrcto se cultivó en PDA 22 ºC, y los islmientos puros se conservron pr ls siguientes prues. Selección y evlución de ntgonists Se relizó un preselección de ntgonists cultivdos en PDA, seleccionndo principlmente hongos que l litertur report con potencil ntgonist, l myorí del género Trichoderm sp. Posteriormente, se llevó co un selección en plcs precolonizds con cultivos puros del ptógeno. Sore el crecimiento del ptógeno se colocó un got de suspensión de espors de cd uno de los hongos previmente isldos. L metodologí permitió seleccionr únicmente 6 ceps de hongos cpces de limentrse del ptógeno y por lo tnto hiperprásitos. Ls 6 ceps que mostrron efecto hiperprsítico se evluron en grupos de cutro en ionsyos en hojs desprendids de tomte. Se colocó un hoj de tomte con cinco foliolos en un cámr húmed como unidd experimentl; en cd uno de los foliolos se colocó un got (20 Ul) de suspensión de espors de B. cinere ( 0 6 conidis ml - ). Psds 24 hors, cd hoj se sperjó con 2,5 ml de suspensión de espors del ntgonist ( 0 6 ml - ). Doce dís después se evluó el porcentje de foliolos que desrrollron l enfermedd. Los islmientos que presentron uen efecto ntgonist y fácil crecimiento se evluron en el inverndero experimentl del CATIE. Se usron plnts de chile de l vriedd cultivd Trópico Irzú. A cd plnt de 2 semns de edd se le doló un rm pr fvorecer el inicio de l infección y se sperjó tod l plnt con un suspensión de conidis ( 0 6 conidis ml - ). A ls 48 hors se le sperjó un suspensión de espors del ptógeno tod l plnt l mism concentrción. L infección se desrrolló en rms, frutos y flores, siendo este último el órgno que presentó l myor regulridd e incidenci, por lo que se eligió pr hcer ls mediciones. Se utilizron seis trtmientos, que consistieron en cutro suspensiones de ntgonists correspondientes cd cutro islmientos selecciondos, un testigo l que solo se le plicó gu y otro l que solo se le plicó B. cinere. Se evluron cutro plnts por trtmiento en un diseño irrestricto l zr y se midió como vrile de respuest el número de flores enferms por plnt por semn prtir de 0 dís después de l inoculción del ptógeno. Est etp tmién incluyó l recolección de dtos de tempertur y humedd reltiv dentro del inverndero. Se relizó un nálisis multivrido (prue de esfericidd) pr compror l independenci de ls uniddes experimentles. Luego se relizó un nálisis de vrinz como prcels divids en el tiempo pr compror l diferenci entre trtmientos y l diferenci entre ls mediciones en el tiempo. Pr estlecer l relción entre el desrrollo de l enfermedd y cd un de ests vriles meteorológics, se relizron prues de correlción con dtos meteorológicos de l mism semn, un y dos semns ntes de l medición. Los mismos trtmientos evludos en el inverndero experimentl fueron evludos en un inverndero comercil (Sn Antonio). El diseño experimentl y nálisis de los dtos fueron los mismos que en el experimento en 58

4 inverndero experimentl, excepto que no se tomron dtos de tempertur y humedd reltiv. Resultdos y discusión Selección de ntgonist De ls muestrs de tejido y suelo se otuvo más de 200 islmientos de microorgnismos, de los cules se seleccionron 60 islmientos de hongos que crecieron ien en PDA y que l litertur report con potencil como hiperprásitos, principlmente Trichoderm sp. Este género se cit en muchs investigciones como gente de control iológico de ptógenos, deido su undnci, rápido crecimiento y color oscuro, que proporcion resistenci l luz solr. Se rechzron cteris y otros microorgnismos de mnejo más difícil. Ls 60 ceps de hongos se conservron en nitrógeno líquido, pr futurs investigciones, ntes de ser evluds en plcs precolonizds, donde se seleccionron los 6 que mostrron mejor crecimiento (hiperprásitos) sore B. cinere (Cudro ). En los ioensyos en hojs desprendids los primeros síntoms de moho gris se oservron en l myorí de los trtmientos cutro dís después de que los foliolos fueron inoculdos con el ptógeno, pero se evluron los 2 dís cundo los primeros trtmientos lcnzron el 50% de incidenci, lo cul ocurrió cundo ls hojs empezron necrosrse. Los mejores ntgonists otenidos en ls cutro prues en hojs desprendids fueron 04, 4, APP60, Cudro. Ceps de hongos ntgonists de B. cinere otenidos en plcs precolonizds Antgonist Origen Procedenci 44 Hoj de tomte Torito 43 Tllo de tomte CATIE 4 Suelo CATIE 9 Tllo de tomte L Uriet 2602 Suelo Colordo 0408 Suelo Sn Antonio 042 Tllo de chile Sn Rmón 0403 Tllo de tomte Torito APP60 No disponile CATIE 07 Hoj de Chile CATIE 04 Tllo de Chile Sn Antonio 4 Suelo CATIE 407 Suelo Torito 0406 Suelo Sn Rmón 02 Tllo de chile Uriet 05 No disponile CATIE Nots: Todos los ntgonists pertenecen l género Trichoderm, excepto el 9, que pertenece l género Fusrium. CATIE = Colección de ntgonists del CATIE; todos los demás sitios se encuentrn en el cntón de Turril. Cudro 2. Mejores ntgonists de Botrytis cinere inoculd en hojs desprendids Antgonist Incidenci (%) 04 0 APP , 02 y 407 (Cudro 2). De los seis (todos del género Trichoderm), los cutro primeros fueron evludos tnto en inverndero experimentl como en inverndero comercil. L selección se hizo tomndo en cuent los menores porcentjes de infección oservdos. El único Fusrium sp. (9) evludo no presentó un uen efecto ntgonist sore B. cinere; no ostnte, miemros de este género hn sido citdos con potencil ntgonist sore B. cinere (Pulitz y Bélnger 200, Sánchez et l. 998). En el ioensyo relizdo en el inverndero experimentl el moho gris se desrrolló y esporuló muy ien en rms dolds que, unque presentn un lesión extens, conservn un prte del tejido sno y dherido, resultdo que coincide con lo oservdo por Kohl et ál Según Utkhede y Mthur (2002), B. cinere se desrroll como sprofito en hojs y flores senescentes de ls plnts de tomte y chile y, si ls condiciones de nutrientes son decuds, produce el micelio que invde prtes sns de l plnt. Este es un specto de mnejo que los productores deen tomr en cuent, y que durnte ls lores de cultivo dentro del inverndero se producen herids en ls plnts, principlmente tllos doldos, que posteriormente son tcdos por el hongo, desde donde este se dispers e infect otrs plnts. L menor cntidd de flores enferms correspondió l testigo soluto (solmente gu) (Figur A); lo cul reflej cntiddes muy js de inóculo nturl. Los trtmientos con ls ceps 04 y 4 presentron diferencis significtivs frente l testigo, de 37 y 38%, respectivmente. A su vez, el islmiento 04 mostró un porcentje de incidenci menor en hojs desprendids. En el ioensyo en inverndero comercil huo poc presenci de l enfermedd, pesr de que se hizo l inoculción rtificil, lo que conduce suponer que ls condiciones meteorológics no fvorecieron l ptógeno. El myor dño fue de,5 flores por plnt de 3 flores que l plnt tení en totl, lo que represent un %. Es posile que l humedd reltiv fuer inferior 95% y l tempertur superior 20 C durnte períodos prolongdos. El menor número de flores enferms oservds en el experimento en inverndero comercil (Figur B) se 59

5 otuvo con el testigo de gu y con los trtmientos 04 y 4, diferencis que fueron significtivs con el testigo donde se plicó únicmente B. cinere. En este experimento, el mejor ntgonist fue el 4, con el cul se redujo l cntidd de flores enferms en un 29%, seguido de 04, que mostró un 23% de reducción de l enfermedd. En el inverndero comercil (Figur 2A) l enfermedd se desrrolló prtir de l primer semn de medición (que correspondió los 0 dís de plicdo el ptógeno), umentó durnte l segund semn y se estilizó durnte ls siguientes. Se oservron diferencis estdísticmente significtivs entre l primer semn y el resto de evluciones. A diferenci del experimento en el inverndero del CATIE (Figur 2A), donde l enfermedd se mntuvo prtir de l segund semn; esto oedece mejores condiciones de humedd y tempertur pr el desrrollo del ptógeno, y que ls plnts en mos invernderos tenín ls misms condiciones de edd, mnejo y trtmientos. Además, se oserv que l enfermedd se redujo completmente, lo cul está directmente correlciondo con l reducción de l humedd reltiv de 97 9%. Si se comprn estos resultdos con los otenidos en los ioensyos de hojs desprendids, se puede oservr que el islmiento 04, que presentó ls incidencis más No. de flores enferms No. de flores enferms,2 0,8 0,6 0,4 0,2 0,8,6,4,2 0,8 0,6 0,4 0,2 0 T.B T.A 07 APP c Trtmientos Figur.. Número totl de flores enferms (B. cinere) por trtmiento: cutro ceps de ntgonist (07, APP 60, 4 y 04), un testigo donde se plicó únicmente gu (TA) y un testigo donde se plicó únicmente el ptógeno (TB), A en el experimento relizdo en el inverndero experimentl de CATIE; B en el experimento relizdo en el inverndero comercil de Sn Antonio. T.B T.A 07 APP Trtmientos c A B js en ls hojs, tmién presentó los números más jos de flores enferms en ls prues de inverndero. Este resultdo permite suponer que tiene potencil como ntgonist (posilemente hiperprásito). Además, demuestr que es fctile encontrr ntgonists de B. cinere medinte el método propuesto. L persistenci del efecto ntgonist durnte tres semns en el inverndero experimentl y durnte dos semns en el inverndero comercil sugiere que estos controldores deen ser plicdos repetids veces, tl como ocurre con los fungicids comerciles. Su supervivenci en l superficie de ls hojs depende tnto de su de cpcidd de colonizr l plnt, como de ls condiciones mientles y de mnejo. Moyno et ál. (2003) plicron un producto se de T. hrzinum (T 39) en hojs de tomte, y encontrron que l polción fue lt en los primeros dís después de cd plicción, pero luego decreció tl punto que 20 dís después de l plicción solmente qued un 6%. El desrrollo de l enfermedd fue myor en el inverndero comercil que en el experimentl (Figur 2B), especilmente en ls semns finles. Es posile que l presión de inóculo más lt redujer el efecto de los ntgonists dos semns, en comprción con ls tres semns que tuvieron en el experimentl. Aunque l myorí de los experimentos con ntgonists pr B. cinere se hn relizdo utilizndo 0 6 espors ml -, que demás presentó el mejor control en ls prues preliminres de est investigción, es posile que l umentr l concentrción de los ntgonists se oserve un mejor contr el ptógeno y que el período de control umente. Sutton et ál. (2002) encontrron un correlción negtiv entre l concentrción de Clonostchys rose y l esporulción de B. cinere en tllos de tomte en cultivo hidropónico en inverndero. Sin emrgo, umentr l dosis del ntgonist nivel experimentl contrst con lo propuesto por lgunos utores, quienes considern que pr selección de ntgonists, ls condiciones deen ser fvorles l ptógeno, pr que los ntgonists selecciondos sen los mejores. Se oservó demás que el grdo de control de lgunos ntgonists evludos vrió de un semn otr. Esto puede triuirse los requerimientos que cd ntgonist posee pr su estlecimiento sore l plnt (Shtienerg y Eld 997). El efecto de fctores climáticos sore el desrrollo de l enfermedd L disminución de l enfermedd fue myor que l disminución en l humedd reltiv máxim y mínim. Esto se explic si se consider que ls condiciones óptims pr 60

6 No. de flores enferms No.de flores enferms 2,00,50,00 0,50 0,00 2,00,50,00 0, Semns T. B T. A 07 A PP , Semns T. B T. A 07 A PP Figur 2. Número de flores enferms por B. cinere por semn en los trtmientos evludos: (A) en el inverndero experimentl de CATIE; (B) en inverndero comercil de Sn Antonio. B. cinere son de entre 96 y 00% de humedd reltiv, por lo que cmios en ese rngo provocn reducciones grndes en l severidd de l enfermedd. Moyno et ál. (2002) considern que un humedd reltiv inferior 96% y un tempertur superior 26 C son condiciones suóptims pr B. cinere y mencionron que, en estos csos, el progreso de l enfermedd es lento o nulo. L humedd reltiv y l tempertur tienen un relción invers, de mner que en quells semns en que l incidenci de l enfermedd es lt (l igul que l humedd reltiv), l tempertur es j, unque l correlción no fue significtiv (Figur 3). Según Jrvis (992), l j humedd reltiv durnte el dí se explic por el rápido umento de l tempertur en l mñn sin que el ire sor humedd con l mism velocidd. Por l noche ocurre lo contrrio. Jrvis (992) encontró que l tempertur de ls hojs, flores y frutos puede diferir significtivmente de l tempertur del ire, y cundo l tempertur de ests prtes de l plnt es j pueden ser fectds por los ptógenos. Los cmios de tempertur tmién desempeñn un ppel importnte en l condensción sore flores y frutos y, por lo tnto, en el desrrollo de enfermeddes como ls provocds por B. cinere. De Vis (999) mencion que los otones florles y los frutos de chile y tomte son cuerpos fríos sore los cules se condens gu cundo j l tempertur, condición que es óptim pr l germinción A B de espors de B. cinere. Ninguno de estos fctores fue medido en este experimento. Durnte ls cinco semns de evlución, tnto l tempertur como l humedd reltiv siguieron un ptrón en el cul l tempertur fue máxim en el dí y jó durnte l trde, l noche y hst ls primers hors de l mñn, pero su promedio fue 25 C, lo cul no fvorece el desrrollo de l enfermedd. El promedio de humedd reltiv fue de 70%, oteniendo el mínimo en un solo momento lrededor de medio dí, y ls máxims rcron períodos lrgos durnte l noche hst ls primers hors de l mñn y vriron entre 9 y 97%. Por eso, considermos que l vrición en l enfermedd fue consecuenci principlmente de l humedd reltiv. Los ntgonists 04 y 4 (mos del género Trichoderm) mostrron potencil como gentes de control iológico B. cinere. Sin emrgo, en futurs investigciones se deen evlur diferentes concentrciones y mezcls de ls ceps, sí como formulciones y sustrtos que mejoren el efecto de estos ntgonists. L metodologí utilizd en este experimento fue eficz pr l selección y evlución de ntgonists de B. cinere, principlmente hiperprásitos isldos de ls hojs de l plnt, pero ddo que el efecto de l enfermedd es sore flores y por lo tnto incide directmente sore l producción, se recomiend que en futurs evluciones se evlúe l producción. L correlción positiv entre l humedd reltiv máxim y l humedd reltiv mínim con l cntidd de flores infectds por el ptógeno sugiere l importnci de mnejr el riego dentro del inverndero, usndo el mínimo de gu, como estrtegi en el mnejo de est enfermedd, l igul que l importnci de repetir los ioensyos en diferentes épocs del ño pr evlur l eficci de los ntgonists jo diferente condiciones mientles. No.de flores enferms,2 0,8 0,6 0,4 0, Humedd reltiv máxim (%) y = 0,x - 8,62 R 2 = 0,796 Figur. 3. Relción entre l humedd reltiv máxim de l mism semn y l cntidd de flores enferms por Botryitis cinere en plnts de chile en inverndero experimentl. 6

7 En condiciones de inverndero, el efecto de los ntgonists evludos se redujo trnscurrids tres semns, lo cul sugiere que se deen relizr plicciones sucesivs pr mntener los niveles de control durnte todo el ciclo de cultivo. Se oservó que B. cinere provech muy ien ls herids, prticulrmente ls rms dolds, como puert de entrd l plnt. Por lo tnto se recomiend evitr lesiones durnte ls lores de cultivo. Por último, se recomiend evlur l comptiilidd de l plicción de los ntgonists 04 y 4 y los fungicids químicos de uso frecuente, pues en l producción convencionl puede ser necesrio integrr el control iológico con otros métodos de mnejo, incluyendo l utilizción de productos químicos. Litertur citd Bord, F; Areláez, G Control del mrchitmiento vsculr del pepino ocsiondo por Fusrium oxysporum Schl. Con el islmiento T-95 de Trichoderm hrzinum Rifi. Fitoptologí Colomin (2):0-5. De Vis, R Fctores en el control de clim en invernderos. In Clim, Fisiologí y Producción de Cultivos Bjo Inverndero. 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