Diagnóstico de las Enfermedades Virales

Transcripción

1 Diagnóstico de las Enfermedades Virales Dra. Dora Ruchansky Prof. Adjunta Dpto.Bacteriología y Virología. Facultad de Medicina - UDELAR

2 Más de Herpesviridae HSV-1, HSV-2, VZV, CMV, EBV, HHV6, HHV7, HHV8 Arenaviridae LCMV Orthomixoviridae Virus Influenza Thogoto Flaviviridae Adenoviridae Adenovirus JEV, Murray Vallley Virus, WNV, SLV, Dengue Bunyaviridae Poliomaviridae JCV Parvoviridae Parvovirus B19 Fiebre hemorragica Crimea-Congo, Virus La Crosse, Virus de la Encefalitis California Virus del Sarampión Virus Urleano Chikungunya, EEEV, WEEV, VEEV, Reoviridae Retroviridae VIH, Paramyxoviridae Togaviridae Virus de la fiebre del Colorado Rhabdoviridae Picornaviridae Virus Polio, Coxsackie, Echovirus, Parechovirus Enterovirus 70 Chandipura virus Virus de la rabia

3 VIRUS IMPLICADOS EN INFECCIONES DEL SNC FRECUENTES Enterovirus Arbovirus* HSV-2 (asociado a herpes genital primario) HIV (en periodo de seroconversión y durante el curso de la enfermedad) MENINGITIS JEV* Enterovirus Arbovirus*: WNV EEEV WEEV VEEV SLV Murray Valley, ENCEFALITIS HSV-1(adultos) HSV-2 (neonatos) Adenovirus HIV-1 (en seroconversión) RHOMBOENCEFALITIS DEMENCIA MIELOPATIA MIELITIS WNV HSV-1 Sarampión-Subacute sclerosing panencephalitis (niños) Rubeola-Progressive rubella panencephalitis (adultos jóvenes) HIV-1 HIV-1 HTLV-1 RAROS virus Urleano LCMV HSV-1 VZV CMV EBV IA, IB Parvovirus B19 VZV CMV EBV HHV6 HHV7 Rabia Nipah Hendra Dengue* HSV-2 EBV HTLV-2 WNV VZV POLIO HSV-1 Adaptado de: Neurol Clin 26 (2008) , Practical Neurology 2007;7;

4 ESTUDIO VIROLÓGICO EN LCR Tipo de Muestra: LCR Cantidad: Adultos: a 2 ml Niños: 1,5 ml Toma de Muestra - Oportunidad Punción lumbar al momento del diagnóstico clínico, Recolección en tubo estéril y exclusiva para estudio etiológico viral. Identificación de la muestra Correcto rotulado del tubo con identificación del paciente y fecha de la toma Ficha adjunta:. Edad, Sexo, Procedencia, Fecha de inicio de síntomas, Datos clínicos, Resultado citoquímico, viajes recientes, posible exposición a reservorios animales o vectores. Diagnóstico presuntivo, Conservación de la muestra Una vez obtenida, y mientras no se realice el envío al Laboratorio, mantener refrigerada (no congelar) a 4º C. Condiciones de envío El envío debe ser bajo condiciones de refrigeración (4º C) y según pautas internacionales para transporte de muestras biológicas, se debe hacer con el sistema de triple envase. Enviar al laboratorio dentro de las 8 10 horas de obtenida la muestra..

5 ESTUDIO VIROLÓGICO EN LCR Estudio Citoquímico: Aspecto: Claro (cristal de roca) Pleocitosis linfocitaria: cel/ul* Glucorraquia: Normal Proteinorraquia: Ligeramente elevada 0,5-2 g/l *Presencia de neutrófilos en meningitis virales

6 ESTUDIO VIROLÓGICO EN LCR Metodos de Estudio: Aislamiento viral Ensayos Serológicos Detección anticuerpos específicos (producción intratecal) Técnicas de Biología Molecular PCR RT-PCR PCR REAL TIME Secuenciación

7 ESTUDIO VIROLÓGICO EN LCR Ensayo Serológico Detección temprana de IgM (producción intratecal) en respuesta a infección del SNC TECNICA DE MAC ELISA Ac. monoclonal conjugado c/ HRP Sustrato TMB Antígeno Virus San Luis IgM presente en LCR Anti-IgM la presencia de anticuerpos específicos de virus IgM en LCR es diagnóstica. Virus de San Luis Virus West Nile Virus de la Encefalitis Japonesa Dengue

8 ESTUDIO VIROLÓGICO EN LCR Técnicas de Biología Molecular La búsqueda de ácidos nucleicos virales en las muestras de LCR facilita la identificación viral en poco tiempo, con alta de la especificidad y la sensibilidad. RT-PCR* Extracción de ARN o ADN LCR PCR* Amplicones de la región genómica viral estudiada *uso de cebadores específicos de regiones consenso (ej enterovirus) o específicos (ej. SLV)

9 DETECCIÓN DE ACIDOS NUCLEICOS VIRALES EN LCR ENCEFALITIS PACIENTES INMUNODEPRIMIDOS sospecha o confirmado PACIENTES NMUNOCOMPETENTES HSV-1, HSV-2, VZV ENTEROVIRUS ARBOVIRUS* EBV / CMV HHV 6 HHV7 VIH JCV HSV-1, HSV-2, VZV ENTEROVIRUS, ARBOVIRUS* MENINGITIS HSV-2,VZV ENTEROVIRUS ARBOVIRUS* VIH HSV-2,VZV ENTEROVIRUS ARBOVIRUS* * En casos con posible exposición a vectores, y/o regiones con brotes epidémicos: Encefalitis Equina del Este, Encefalitis Equina del Oeste,Encefalitis equina venezolana, Encefalitis de St. Louis, encefalitis Japonesa, encefalitis de California,West Nile, Alfavirus, Dengue, En niños : Adenovirus, HHV-6, RSV, IA, IB, Rotavirus, Parvovirus B19

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