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1 Otras mutaciones tratables: Qué buscar y cuándo buscarlas. Ihab Abdulkader Nallib Servicio de Anatomía Patológica Hospital Clínico Universitario Santiago de Compostela

2 Directrices de determinaciones moleculares en NSCLC. Otros biomarcadores en adenocarcinomas: ROS1 MET RET Her2 BRAF Biomarcadores en carcinoma escamoso: FGFR1 PI3KCA DDR2

3 Directrices de determinaciones moleculares en NSCLC. Otros biomarcadores en adenocarcinomas: ROS1 MET RET Her2 BRAF Biomarcadores en carcinoma escamoso: FGFR1 PI3KCA DDR2

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6 Las citologías y las biopsias pequeñas pueden constituir hasta el 70% de las muestras utilizadas al diagnóstico. Minimizar el uso de non-small cell carcinoma. Usar la inmunohistoquímica juiciosamente. Reservar suficiente tejido para estudios moleculares. NCCN NSCLC Version 1:2014 El propósito de la evaluación patológica es: Clasificar. Determinar la extensión de la invasión. Evaluar márgenes. Determinar las anomalías moleculares para predecir la respuesta a EGFR- TKIs y la respuesta a inhibidores ALK.

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9 Clinical Trials Serracino et. al., Surgical Pathology. 2012; 12:

10 Priorización de la muestra

11 Directrices de determinaciones moleculares en NSCLC. Otros biomarcadores en adenocarcinomas: ROS1 MET RET Her2 BRAF Biomarcadores en carcinoma escamoso: FGFR1 PI3KCA DDR2 Inmunoterapia: PD-L1

12 Indiferenciado 5-10% CPCP 15% Adenocarcinoma 45% Epidermoide 25-30%

13 Biología ROS1: gen localizado en cromosoma 6 Receptor tirosina quinasa (TK) 2007 en NSCLC: reordenamiento de ROS1 con diferentes parejas proteínas de fusión que activan el dominio TK de ROS1 ( oncogenic drivers ) Perfil clínico-patológico Incidencia: 1-2% (4,5% Triple-negativos) Estadios avanzados Mujeres más jovenes No fumadores Adenocarcinoma (cél anillo sello/mucinoso/cribiforme); raro en no- AC Mutuamente excluyentes con ALK / EGFR / KRAS TRASLOCACIÓN DE ROS1

14 TRASLOCACIÓN DE ROS1 Metodología FISH Sondas comerciales: duales, break-apart Interpretación similar a ALK: patrón BA y IRS; cut-off=15% IHQ Clon D4D6 (Cell Signaling) Tinción difusa, fuerte-moderada Tinciones diferentes según variantes RT-PCR

15 TRASLOCACIÓN DE ROS1

16 MET Proto-oncogén localizado en el cromosoma 7q21-23 que codifica un receptor tirosina kinasa (TK) para HGF/SF (Hepatocyte growth factor/scatter factor) Activación de MET Progresión tumoral: crecimiento, invasión y metástasis Sobreexpresión: 60-80% NSCLC (70% AC; 40% SQCC); 25% SCLC Mutaciones: 12-20% NSCLC / SCLC Amplificación: 20% NSCLC resistentes a inhibidores TK anti-egfr 3-21% NSCLC no tratados con inhibidores TK anti-egfr

17 MET Metodología: Hibridación in situ fluorescente (FISH) MET not amplified (not eligible) MET amplified (low MET level) MET amplified (intermediate MET level) MET amplified (high MET level) MET/CEP7 ratio <1.8 MET/CEP7 ratio MET/CEP7 ratio >2.2 <5.0 MET/CEP7 ratio 5

18 % Change From Baseline MET Tumor Shrinkage Seen in Intermediate and High MET Cohorts Best percent change from baseline in target tumor lesions by patient Low MET Intermediate MET High MET n=2 n=6 n= c 60 c Disease progression Stable disease Partial response b Complete response b Threshold for partial response Diapositiva proporcionada por Pfizer. Camidge et al. ASCO Abstract 8001

19 Perfil clínico-patológico MET Low MET, n=2 Intermediate MET, n=6 High MET, n=6 Total, N=14 a Median age, years (range) 52 (42 63) 55 (48 73) 67 (46 79) 61 (42 79) Male, n (%) 1 (50) 2 (33) 3 (50) 6 (43) Race, n (%) White Black 2 (100) 0 Histology Adenocarcinoma 2 (100) Other b 0 ECOG PS, n (%) Smoking status, n (%) Never smoker Ex-smoker Smoker 1 (50) 1 (50) 0 1 (50) 1 (50) 0 5 (83) 1 (17) 5 (83) 1 (17) 2 (33) 4 (67) 0 1 (17) 4 (67) 1 (17) 6 (100) 0 6 (100) 0 2 (33) 3 (50) 1 (17) 0 6 (100) 0 13 (93) 1 (7) 13 (93) 1 (7) 5 (36) 8 (57) 1 (7) 2 (14) 11 (79) 1 (7) Ou SHI et al. J Thorac Oncol 2011 Diapositiva proporcionada por Pfizer. ASCO Abstract 8001

20 TRASLOCACIÓN DE RET Biología RET: gen localizado en cromosoma 10 Receptor tirosina quinasa (TK) 1990: carcinoma de tiroides (ca. papilar: traslocación; antecedente de radiación; ca. medular: mutación germinal) en NSCLC: reordenamiento de RET con diferentes parejas, dando lugar a proteínas de fusión que activan el dominio TK de RET ( oncogenic drivers ) KIF5B el partner más frecuente en NSCLC

21 TRASLOCACIÓN DE RET Incidencia: 1-2% Estadios avanzados Edades más Jóvenes Distribución ± igual ambos sexo No fumadores y fumadores Tumores pequeños (< 3cm.) Adenocarcinoma (pobremente diferenciados y sólidos) también en no- AC (AC-SQCC, SQCC) Mutuamente excluyentes con ALK / EGFR / KRAS / HER2 / BRAF

22 Metodología TRASLOCACIÓN DE RET

23 HER2 Sobreexpresión en 20%. Amplificación en 2%. Mutación en 2% (inserciones en el exón 20). No hay asociación entre amplificación y mutación. Histología: adenocarcinoma. Predominante en no fumadores. Mujeres (asíaticas). Son mutuamente excluyentes con mutaciones EGFR y KRAS. EGF TGF-a Amphiregulin Betacellulin HB-EGF Epiregulin HER1 EGFR erbb1 HER2 erbb2 neu NRG2 Heregulins NRG3 Heregulins Betacellulin Cysteinerich domains HER3 erbb3 HER4 erbb4 Tyrosine -kinase domains

24

25 BRAF Mediador de la vía de EGFR por debajo de RAS. Mutado en 1-8% de CPCNP. Más frecuente en fumadores. Adenocarcinoma (Patrón papilar o micropapilar). Exón 15 (V600). Mecanismo de resistencia TKIs. Dabrafenib inhibidor BRAF.

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27 Directrices de determinaciones moleculares en NSCLC. Otros biomarcadores en adenocarcinomas: ROS1 MET RET Her2 BRAF Biomarcadores en carcinoma escamoso: FGFR1 PI3KCA DDR2 Inmunoterapia: PD-L1

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29 FGFR1 es un receptor tirosin quinasa implicado en la regulación de la proliferación celular y angiogénesis. Amplificado en un 17 20% de los tumores de células escamosas, representando un 3 5% de todas las anomalías moleculares descritas en cáncer de pulmón. Se asocia con el tabaquismo y con una peor supervivencia global. Es la diana de varios fármacos que se encuentran en fase de desarrollo: Compañía J&J Astra Zeneca Novartis Eli Lilly Servier FivePrime Boehringer Ingelheim program status phase I in phase II in phase II in phase I plan phase I phase I phase II

30 PI3KCA PI3K son quinasas de lípidos implicado en la regulación del crecimiento celular, proliferación y supervivencia. Las mutaciones en el gen PIK3CA se han identificado en varios tipos de cáncer. Se producen en < 5% de NSCLC. A menudo coexisten con otras mutaciones oncogénicas (EGFR, KRAS o ALK). La ampificación del gen 3q26, donde reside el gen PIK3CA es un evento frecuente en el carcinoma escamoso.

31 DDR2

32 La innovación será el fruto del esfuerzo multidisciplinar y eso llevará, a explorar sin miedo todas las fuentes, incluidas las que parecen más erróneas

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