Usos de Herramientas Moleculares en Agricultura: Marcadores Moleculares. Técnicas Moleculares. Técnicas Moleculares 8/13/13

Save this PDF as:
 WORD  PNG  TXT  JPG

Tamaño: px
Comenzar la demostración a partir de la página:

Download "Usos de Herramientas Moleculares en Agricultura: Marcadores Moleculares. Técnicas Moleculares. Técnicas Moleculares 8/13/13"

Transcripción

1 8/13/13 Usos de Herramientas Moleculares en Agricultura: Marcadores Moleculares CAF516 O Recursos Genéticos y Biotecnología 14 Agosto 2013 Técnicas Moleculares Aplicaciones en muchas disciplinas Generan mucha información No solución para todo En general, requiere extracción de ácidos nucleicos, proteína, o metabolito y después Amplificar Cortar por PCR con enzimas Ambos Separar fragmentos por electroforesis Técnicas Moleculares Técnica Molécula Electroforesis Southern ADN Sí Northern ARN Sí Western Proteína Sí ELISA Proteína No 1

2 Técnicas Moleculares Técnica Molécula Electroforesis PCR ADN o ARN Sí PCR-Tiempo Real ADN o ARN No Otras, Sistema Capilar o gel EF con Fluorocromo Proteína, ADN Sí, sin tinción Procesos Esenciales Extracción de Ácidos Nucleicos Electroforesis Extracción de Ácid. Nucl. Maceración de tejido en buffer Mantiene ADNasas o ARNasa inactivas Incubación 65C Fenol/Cloroformo Separación proteína y celulosa Fase acuosa se mezcla con alcohol AcidNucl se resuspenden en buffer (TE) Se añade ADNasa o ARNasas (según el caso) 2

3 Extracción de Ácid. Nucl. Maceración (LN2) Agregar Buffer - Durante o Después de Maceración Incubación 65C Alcohol, Precipitación o Enganchar, Resuspender en Buffer Mezclar con Fenol/Cloroformo, Centrifugar, Separar Fase Acuosa Electroforesis Separación de fragmentos por tamaño (peso molecular) Fragmentos pasan por un medio gelatinoso Agarosa Acrilamida Algún polimero (sistema capilar) Buffer especial (lo más nuevo, Shimadzu) Carga electrica Muchas veces requiere tinción Extracción ADN 3

4 Técnicas Moleculares: Cuantificación y Electroforesis Electroforesis separa fragmentos de ADN por tamaño Separación de fragmentos Tinción Métodos Después de Extracción Soutern, Northern, Western PCR, RT-PCR 4

5 Técnicas Moleculares Clásicas Southern Blot o hibridación Southern Detección de secuencia, marcador molecular ADN cortado con enzimas de restricción (Ej: EcoRI) Técnicas Moleculares Clásicas Southern Blot o hibridación Southern Detección de secuencia, marcador molecular ADN cortado con enzimas de restricción (Ej: EcoRI) Cortan ácidos nucleícos Corre en electrophoresis Se baña en sonda radioactiva Fragmento de ADN Revela radiografía Técnicas Moleculares Clásicas Southern Blot o hibridación Southern Detección de secuencia, marcador molecular ADN cortado con enzimas de restricción (Ej: EcoRI) Cortan ácidos nucleícos Corre en electrophoresis Se baña en sonda radioactiva Fragmento de ADN Revela radiografía 5

6 Técnicas Moleculares Clásicas Determina niveles de expresión (ARNm) Extraer ARNm del tejido de interés Separar en un gel Incubar con sondas radio-etiquetadas + ARNm = + transx = + señal 13-agos-13 Northerns Ejemplos agos Yema Latente Resultados: Northern Blots Ambos VFL y VvTFL1 son específicos al ápice VvTFL1 Se activa sólo en Sept y Oct VFL (LFY) activo en Dic, y en March 13-agos-13 6

7 Técnicas Moleculares Clásicas Western Detección de proteínas Muy parecido a northern o Southern Proteínas Separación en acrilamida Anticuerpos específicos radioactivos Autorradiografía Métodos PCR RT-PCR 7

8 8/13/13 Concepto Básico en Biol Mol PCR Reacción Produce Técnica en cadena de la polimerasa copias de segmento(s) específico(s) de ADN base para varios métodos Secuenciación Marcadores PCR moleculares tiempo real (RT-PCR) Perfiles moleculares (caracterización) Replicación (Procariotas) Ingredientes de la PCR ADN de interés ADN Iniciadores (oligonucléotidos) ADN Taq polimerasa (termoestable) (dntps); nucleótidos de A, G, T, y C TAQ Primers Buffer ph Cationes (MgCl2, K+) datp dgtp dctp dttp

9 PCR: Reacción en Cadena de la Polimerasa Paso 1: desnaturalización Cebadores Cebadores Paso 2: alineamiento Paso 3: extensión PCR: Reacción en Cadena de la Polimerasa Paso 1: desnaturalización Cebadores Cebadores Paso 2: alineamiento Paso 3: extensión PCR: Reacción en Cadena de la Polimerasa Paso 1: desnaturalización Cebadores Cebadores Paso 2: alineamiento Paso 3: extensión 9

10 PCR Electroforesis Separados en gel por corriente eléctrica Separa por pesos moleculares (tamaño) Observación de fragmentos mediante tinción Concepto Básico PCR Copias de segmentos se separan por tamaño (electroforesis) Fragmentos pequeños se movilizan más rápido 10

11 Electroforesis: 1) Geles de agarosa 2) Geles de acrilamida Animaciones PCR Electroforesis gelelectrophoresis.html RT-PCR PCR tiempo real lo está remplazando PCR-TR también remplazando ELISA Complementando métodos tradicionales de detección de patógenos y antagonistas Otras aplicaciones Mejoramiento genético 11

12 PCR-Tiempo Real Para detectar y cuantificar Virus de ARN, ADN, hongos, bacterias, nematodos Mezcla de especies 4 organismos diferentes a la vez (Modelo ABI) Extracción directa de hoja con hongo, raíz con nematodo, etc. PCR-Tiempo Real Similar a PCR convencional Excepción: excita y mide fluorescencia Esencialmente dos tipos marcadores fluorescenctes SYBR green Sonda Taqman ADN en concentración más alta, fluorescencia máxima se alcanza más pronto PCR-Tiempo Real SYBR green Intercala entre nucleotidos de ADN Cuando intercala fluorescencia Mientras amplificación ocurre, fluorescencia incrementa Sonda Taqman Oligonucleotido con un reportero y un neutralizador Amplificación desplaza sonda y separa reportero de neutralizador 12

13 SYBR green SYBR green Inactivo SYBR green Fluorescencia Taqman PCR-Tiempo Real-SYBR vs Taqman SYBR Barato No requiere diseño de sonda No requiere información de secuencia Taqman Detección multiple por reacción Diff reporteros Sin secuencia no se puede diseñar sonda 13

14 PCR-Tiempo Real Información Detecta presencia de fragmento específico Detecta diferencias de concentración de tal fragmento Genera información más rápido y seguro No requiere visualizar en gel No requiere teñir con bromuro de etidio PCR-Tiempo real Concentración ADN Curvas de Estandarización 14

15 PCR-Tiempo Real Aplicación de RT-PCR en detección y cuantificación de hongos Filion et al Detección y cuantificación de Fusarium solani y posible antagonista Glomus intraradices (micorriza) Extracción ADN directamente de raíz inoculada y suelo (rizósfera) PCR-tiempo real usando SYBR green Glomus controla Fusarium directamente de la raíz + Marcadores Moleculares: Las Técnicas, Sus Aplicaciones y Limitaciones Lección 5 5 Septiembre

16 + Marcadores Moleculares + Marcadores Genéticos Qué es un marcador molecular: Diferencias en el ADN Pueden visualizarse entre individuos Nacen por diferentes clases de mutaciones En general, asocia el marcador a caracteres importantes + Aplicaciones de Marcadores Mapeo genético QTLs Mapeo de genes Clonación genética basada en mapas Mapa genético Mapa físico Selección asistida por marcadores (MAS) Selecció no invasiva Análisis de diversidad genética 16

17 + Marcadores Genéticos Clasificación de marcadores Dominantes Binario, Presencia/Ausencia Codominantes Posibles alelos pueden visualizarse Número de alelos por individuo dependerá de ploidía + Marcadores Genéticos Dominantes Amplificación de regiones o loci desconocidos Generales i.e. no específicos a especie Usualmente generan muchas bandas + Marcadores Genéticos Codominantes Generan pocas bandas Específicos a especie u otras relacionadas Regiones o loci conocidos 17

18 + Marcadores Genéticos Codominantes Ventajas Análisis finos Heterocigocidad, frecuencia de alelos, equilibrio HW, etc. Comparativos Información transferible Desventajas Poca información por reacción Requiere conocimiento previo Diversidad limitada a uno o dos loci + Marcadores Genéticos Codominantes Ventajas Análisis finos Heterocigocidad, frecuencia de alelos, equilibrio HW, etc. Comparativos Información transferible Desventajas Poca información por reacción Requiere conocimiento previo Diversidad limitada a uno o dos loci Dominantes Ventajas Genera mucha información por marcador Diversidad a nivel genómico No requiere conocimiento previo Desventajas Limitación de análisis Información binaria Fragmentos que coinciden en tamaño pueden ser diferentes Información no transferible + Técnicas Moleculares: Bases de Marcadores Extracción Ácidos Nucleicos Cortes Enzimáticos PCR Combinación Cortes y PCR Secunciación 18

19 + Técnicas Moleculares: Bases de Marcadores Extracción Ácidos Nucleicos Cuantificación y Electroforesis Cortes Enzimáticos PCR Combinación Cortes y PCR Secunciación Electroforesis Electroforesis Electroforesis RT-PCR Sondas* + Marcadores Genéticos + Marcadores Genéticos 19

20 + Marcadores Genéticos + Marcadores Que Cubriremos Dominantes: ADN polimórfico amplificado al azar Amplified Fragment Length Polymorphisms (AFLP) Polimorfismos de longitud de fragmentos amplificados Inter Simple Sequence Repeat (ISSR) Secuencias Simples Inter Repetidas + Marcadores Que Cubriremos Codominantes: Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP; no PCR) Polimorfismos de longitud por restricción de fragmentos Repetición de secuencia simple Expressed Sequence Tags (EST) Etiquetas de secuencia expresada Single Nucleotide Polymorphisms (SNP) Polimorfismos de un sólo nucleotido 20

21 + Dominantes + Rapidly Amplified Polymorphic DNA (RAPD) Un imprimador funciona como forward y reverse 10 bases al azar Varios segmentos amplificados sobre regiones desconocidas + Randomly Amplified Polymorphic DNA (RAPDs) Amplificación anónima de fragmentos usando primers arbitrarios 21

22 + Randomly Amplified Polymorphic DNA (RAPDs) + Ventajas/Desventajas No requiere información previa Reporducibilidad inconsistente Fáciles y rápidos de ejecutar Genera relativamente mucha información a bajo costo Separación en agarosa Mismo primer funciona en muchos organismos Generalista + Codominantes 22

23 + Simple Sequence Repeats (SSRs) Se conocen también por microsatélites Repeticiones tandem de fragmentos de ADN (ctctctct ) Número de repeticiones varía En abundancia alrededor del genoma Específicos Usualmente una copia por genoma haploide + SSR Razón por lo que ocurren: Resbalón de la polimerasa + Simple Sequence Repeats (SSRs) 23

24 + + Ventajas/Desventajas Secuencia conservada entre miembros a nivel phylum Altamente transferibles Relativamente fáciles de ejecutar Existencia de varios alelos Transferencias no siempre son perfectas Generación de bandas inespecíficas Repetición genera resbalones Casi siempre requiere separación fina en acrilamida + Single Nucleotide Polymorphism (SNP) Cuando existe una diferencia en un sólo nucleotido en la misma posición de la secuencia Es considerado una gran fuente genética de variación fenotípica Ocurre en intrones como en exones 24

25 + Single Nucleotide Polymorphism (SNP) Métodos para detectar SNP Secuenciar RT-PCR Genotipado por secuenciación + PCR-Tiempo Real: SYBR Green o LCGreen Plus Usando sonda no marcada Montgomery et al Marcador Req. Secuencia Fragmentos Transferencia informativa RFLP No Pocos/Específicos Depende de sonda RAPD No Varios Población ISSR No Varios Población SSR Sí Pocos/Específicos Phylum AFLP No Muchos Población SNP Sí Pocos/Específicos Phyllum-Orden EST Sí Pocos/Específicos Phyllum-Orden 25

26 + Marcador Ventaja Desventaja RFLP RAPD ISSR SSR AFLP SNP EST Se descubre secuencia Genera información fácil y no requiere secuencia Genera información fácil y no requiere secuencia, más reproducibles que RAPD Transferibles, se puede hacer referencia de géneros muy distintos en una familia Genera mucha información en relativamente poco tiempo Mayoría de variación existente Está asociado a genes que codifican una proteína Genera poca información y laboriosos Problemas con reproducibildad de resultados Menos generalistas que RAPD Resbalones, poca información a nivel genoma No transferible, requiere varios pasos Requiere secuenciar, RT-PCR, u otros métodos Requiere información de genes + Como Usar Micropipetas + Como Chorrear un Gel 26

27 + Como Cargar Muestras al Gel + Como Preparar un PCR 27

7/13/2009. Breve introducción a la biología molecular y sus aplicaciones. Victoria koala. Queensland koala. Morfología vs. ADN? Phascolarctus cinereus

7/13/2009. Breve introducción a la biología molecular y sus aplicaciones. Victoria koala. Queensland koala. Morfología vs. ADN? Phascolarctus cinereus Morfología vs. ADN? Phascolarctus cinereus Queensland koala Victoria koala New South Wales koala 3 subespecies Morfológicamente: Diferencias en tamaño y color principalmente Molecularmente: Un grupo dividido

Más detalles

Detección de patógenos en alimentos, utilizando la técnica de PCR, reacción en cadena de la polimerasa.

Detección de patógenos en alimentos, utilizando la técnica de PCR, reacción en cadena de la polimerasa. Detección de patógenos en alimentos, utilizando la técnica de PCR, reacción en cadena de la polimerasa. Lic. Esp. Mariano Diego Massari 1er Congreso Bioquímico Córdoba 2011 8ª Jornada de Actualización

Más detalles

PCR. Componentes del PCR. PCR Polymerase Chain Reaction (Reacción en Cadena de la Polimerasa)

PCR. Componentes del PCR. PCR Polymerase Chain Reaction (Reacción en Cadena de la Polimerasa) PCR PCR Polymerase Chain Reaction (Reacción en Cadena de la Polimerasa) Es una técnica de biología molecular descrita en 1986 por Kary Mullis. (Nobel de química en 1993) Necesidad de pruebas de diagnóstico

Más detalles

Técnicas moleculares.

Técnicas moleculares. Técnicas moleculares. DMTV Carolina Acevedo Curso de Microbiología 2015 SÍNTESIS IN VITRO DE UNA GRAN CANTIDAD DE COPIAS DE UN SEGMENTO DE ADN EXISTENTE EN UNA MUESTRA. O sea. Amplificamos en forma exponencial

Más detalles

Detección de la secuencia Alu mediante la técnica Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR ) N. Rodríguez

Detección de la secuencia Alu mediante la técnica Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR ) N. Rodríguez Detección de la secuencia Alu mediante la técnica Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR ) N. Rodríguez 1 Objetivos Entender la técnica: Reacción de Polimerasa en Cadena (PCR por sus siglas en inglés)

Más detalles

Técnica de PCR. Beatriz Bellosillo. Servei de Patologia, Hospital del Mar, Barcelona, Spain

Técnica de PCR. Beatriz Bellosillo. Servei de Patologia, Hospital del Mar, Barcelona, Spain Técnica de PCR Beatriz Bellosillo Servei de Patologia, Hospital del Mar, Barcelona, Spain Biología Molecular Estudio de los procesos que se desarrollan en los seres vivos desde un punto de vista molecular

Más detalles

Fisiogenética Vegetal

Fisiogenética Vegetal Fisiogenética Vegetal USO DE MARCADORES MOLECULARES, aplicaciones y ejemplos Cecilia Baginsky - Tradicionalmente los marcadores moleculares utilizados en estudios genéticos y de mejoramiento eran aquellos

Más detalles

Técnicas de Biología Molecular. Dr. Luis Salazar N Depto. de Ciencias Básicas / UFRO

Técnicas de Biología Molecular. Dr. Luis Salazar N Depto. de Ciencias Básicas / UFRO Técnicas de Biología Molecular Dr. Luis Salazar N Depto. de Ciencias Básicas / UFRO 2004 Extracción de ácidos nucleicos o o DNA RNA Tipos de Muestras Sangre total (EDTA) Saliva Líquido Amniótico Bulbo

Más detalles

Práctico: Genética bacteriana 2007.

Práctico: Genética bacteriana 2007. Práctico: Genética bacteriana 2007. Actividad integrada Departamento de Genética Departamento de Bacteriología y Virología. OBJETIVOS Objetivos generales El estudiante al terminar la actividad práctica

Más detalles

DNA RECONBINANTE Depende de enzimas capaces de: Cortar Unir Replicar Transcribir inversamente el RNA Otra herramienta es el uso de Sondas específicas

DNA RECONBINANTE Depende de enzimas capaces de: Cortar Unir Replicar Transcribir inversamente el RNA Otra herramienta es el uso de Sondas específicas DNA RECONBINANTE Depende de enzimas capaces de: Cortar Unir Replicar Transcribir inversamente el RNA Otra herramienta es el uso de Sondas específicas ELEMENTOS BÁSICOS DE LA INVESTIGACIÓN EN GENES Análisis

Más detalles

ELABORACIÓN N DE MEZCLA PARA PCR. Raquel Asunción Lima Cordón

ELABORACIÓN N DE MEZCLA PARA PCR. Raquel Asunción Lima Cordón ELABORACIÓN N DE MEZCLA PARA PCR Raquel Asunción Lima Cordón PCR Polymerase Chain reaction (reacción en cadena de la polimerasa) Sintetizar muchas veces un fragmento de ADN PCR: simulación de lo que sucede

Más detalles

Técnicas de Biología Molecular

Técnicas de Biología Molecular Técnicas de Biología Molecular DNA I. Enzimas de restricción Análisis Las enzimas de restricción fueron aisladas de bacterias; su función natural es proteger contra DNA extraño II. Separación electroforética

Más detalles

Análisis en Genética 1

Análisis en Genética 1 Análisis en Genética 1 Análisis Genético FUNCION BIOLOGICA Gen o genes implicados Localización Cartografiado Función Interacciones TIPOS DE MUTACIÓN MUTACIÓN GÉNICA -El alelo de un gen sufre un cambio,

Más detalles

CURSO ACADÉMICO 2012-2013

CURSO ACADÉMICO 2012-2013 TITULACIÓN: BIOLOGÍA CURSO ACADÉMICO 2012-2013 GENÉTICA APLICADA CÓDIGO: 200810419 Departamento de adscripción: Parasitología, ecología y Genética Área de conocimiento: Genética Ciclo:2º Curso: 4º Tipo:

Más detalles

Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)

Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) Dr. Alejandro Leal Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) La reacción en cadena de la polimerasa (PCR, por sus siglas en inglés de "polymerase chain reaction") es un método de amplificación in vitro

Más detalles

METODOLOGÍAS UTILIZADAS EN INVESTIGACIÓN BÁSICA Y APLICADA REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR)

METODOLOGÍAS UTILIZADAS EN INVESTIGACIÓN BÁSICA Y APLICADA REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR) METODOLOGÍAS UTILIZADAS EN INVESTIGACIÓN BÁSICA Y APLICADA REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR) Centro de de Microscopía Electrónica Facultad de de Ciencias Médicas Universidad Nacional de de Córdoba

Más detalles

Módulo 1 Biología Molecular Genética Molecular II 2009. Módulo 1. Amplificación de un fragmento de ADN genómico por PCR

Módulo 1 Biología Molecular Genética Molecular II 2009. Módulo 1. Amplificación de un fragmento de ADN genómico por PCR Módulo 1 Amplificación de un fragmento de ADN genómico por PCR En este primer módulo se amplificará por PCR, mediante el uso de oligonucleótidos específicos, un fragmento de ADN genómico de Aspergillus

Más detalles

Easy PDF Creator is professional software to create PDF. If you wish to remove this line, buy it now.

Easy PDF Creator is professional software to create PDF. If you wish to remove this line, buy it now. Unidad Curricular: Virología y Micología Veterinaria 1 TRABAJO PRÁCTICO No. 3 AMPLIFICACIÓN DE GENES VIRALES Reacción en Cadena de la Polimerasa, conocida como PCR (por sus siglas en inglés: Polimerase

Más detalles

Materiales para la secuenciación de ADN

Materiales para la secuenciación de ADN Introduccion La Secuenciación Sanger es un método de secuenciación de ADN en el que el ADN diana se desnaturaliza y se hibrida con un cebador de oligonucleótidos, que se extiende entonces gracias a la

Más detalles

CUESTIONES. 1. Por qué la PCR convencional no es cuantitativa?

CUESTIONES. 1. Por qué la PCR convencional no es cuantitativa? 2º BIOQUÍMICA CUESTIONES 1. Por qué la PCR convencional no es cuantitativa? En la PCR convencional, la cuantificación del ADN de la muestra es complicada debido a que la eficacia de amplificación va disminuyendo

Más detalles

Tema 12. Estructura genética de las poblaciones. Genética CC.MM.

Tema 12. Estructura genética de las poblaciones. Genética CC.MM. Tema 12. Estructura genética de las poblaciones Genética CC.MM. Contenidos Estructura genética de las poblaciones Cuantificación de la variabilidad genética en las poblaciones Equilibrio Hardy-Weinberg

Más detalles

Identificación varietal en vid por técnicas de Biología Molecular. Lic. Luciana Garcia Lic. Carolina Chiconofri

Identificación varietal en vid por técnicas de Biología Molecular. Lic. Luciana Garcia Lic. Carolina Chiconofri Identificación varietal en vid por técnicas de Biología Molecular. Lic. Luciana Garcia Lic. Carolina Chiconofri OBJETIVO Desarrollar un banco de datos a partir de plantas de origen indudable y del uso

Más detalles

Clonación molecular. Clonar significa hacer copias idénticas

Clonación molecular. Clonar significa hacer copias idénticas INGENIERÍA GENÉTICA Clonación molecular Clonar significa hacer copias idénticas Este término originalmente fue aplicado al procedimiento de aislar una célula y permitirle reproducirse creando una población

Más detalles

P.C.R. "Técnica de amplificación enzimática de secuencias específicas de DNA"

P.C.R. Técnica de amplificación enzimática de secuencias específicas de DNA P.C.R. "Técnica de amplificación enzimática de secuencias específicas de DNA" Paso 1: Desnaturalización del DNA Paso 2: Hibridación de los "Primers" Paso 3: Extensión Paso 1: Desnaturalización del DNA

Más detalles

METODOLOGIA DEL PCR. Lic. Jorge Mato Luis. Laboratorio de Genética Molecular Hospital Clínico Quirúrgico Hermanos Ameijeiras

METODOLOGIA DEL PCR. Lic. Jorge Mato Luis. Laboratorio de Genética Molecular Hospital Clínico Quirúrgico Hermanos Ameijeiras METODOLOGIA DEL PCR Lic. Jorge Mato Luis Laboratorio de Genética Molecular Hospital Clínico Quirúrgico Hermanos Ameijeiras Desnaturalización del DNA 5 A G G T T A G T G G A C C C T T G A T 3 3 T C C A

Más detalles

3. COMPONENTES. Tampón de electroforesis concentrado 2 x 50 ml 10 X (2 envases 500ml)

3. COMPONENTES. Tampón de electroforesis concentrado 2 x 50 ml 10 X (2 envases 500ml) PCR SIMULADA Ref.PCR Simulada (4 prácticas) 1.OBJETIVO DEL EXPERIMENTO El objetivo de este experimento es introducir a los estudiantes en los principios y práctica de la Reacción en Cadena de la Polimerasa

Más detalles

Tecnología de DNA recombinante I

Tecnología de DNA recombinante I Tecnología de DNA recombinante I Base: capacidad de manipular moléculas de DNA en un tubo de ensayo Enzimas: Purificadas, con actividades conocidas y controladas DNA polimerasas Síntesis de DNA Nucleasas

Más detalles

Miguel Dita (1) Einar Martínez de la Parte (2) Monica Blanco (3)

Miguel Dita (1) Einar Martínez de la Parte (2) Monica Blanco (3) Generalidades de la PCR: MÉTODO DE DIAGNÓSTICO MOLECULAR DE Foc RT4 Miguel Dita (1) Einar Martínez de la Parte (2) Monica Blanco (3) 1) Bioversity International, Costa Rica 2) INISAV Cuba. 3) Universidad

Más detalles

TÉCNICAS GENÓMICAS. 2) Cuantificación del número de virus presentes en muestras de sangre o suero: carga vírica

TÉCNICAS GENÓMICAS. 2) Cuantificación del número de virus presentes en muestras de sangre o suero: carga vírica TÉCNICAS GENÓMICAS Utilidad/Objetivos: 1) Detección de microorganismos directamente en muestras clínicas identificando un fragmento específico del genoma del microorganismo concreto 2) Cuantificación del

Más detalles

Practica la genética Ficha didáctica del profesorado Bachillerato

Practica la genética Ficha didáctica del profesorado Bachillerato Ficha didáctica del profesorado Bachillerato www.eurekamuseoa.es Extracción de ADN Cuál es la función de cada uno de los ingredientes utilizados para realizar la disolución tampón para la visualización

Más detalles

ESTRATEGIAS PARA LA DETECCÍON Y DIAGNOSIS DE VIRUS EN PLATANOS Y BANANOS EN LA COMUNIDAD ANDINA DE NACIONES

ESTRATEGIAS PARA LA DETECCÍON Y DIAGNOSIS DE VIRUS EN PLATANOS Y BANANOS EN LA COMUNIDAD ANDINA DE NACIONES ESTRATEGIAS PARA LA DETECCÍON Y DIAGNOSIS DE VIRUS EN PLATANOS Y BANANOS EN LA COMUNIDAD ANDINA DE NACIONES CIRO BARRERA Instituto Nacional de Innovación Agraria (INIA) PERÚ Piura, Junio 2011 INTRODUCCION

Más detalles

Comprobando la calidad del DNA genómico mediante electroforesis en gel

Comprobando la calidad del DNA genómico mediante electroforesis en gel Comprobando la calidad del DNA genómico mediante electroforesis en gel GELES 1 Y 2 Agarosa 0.8 %, electroforesis a 1 V/cm Muestras: Se ha cargado muestras de DNA genómico no digerido, antes (líneas impares)

Más detalles

La PCR. La Reacción en Cadena de la Polimerasa es la herramienta más utilizada

La PCR. La Reacción en Cadena de la Polimerasa es la herramienta más utilizada La PCR La Reacción en Cadena de la Polimerasa es la herramienta más utilizada PCR- Ventajas y Usos Amplificación ilimitada de secuencias de interés. Rápida, Sencilla y Eficaz. Técnica altamente sensible

Más detalles

CAPÍTULO VI. Expresión de genes relacionados con apoptosis

CAPÍTULO VI. Expresión de genes relacionados con apoptosis CAPÍTULO VI Expresión de genes relacionados con apoptosis 1.- Introducción 2.- Protocolos para análisis genéticos 3.- Resultados en MCF-7 4.- Discusión 1.- Introducción Como se ha descrito anteriormente,

Más detalles

Investigación en genes. Tecnología del ADN recombinante

Investigación en genes. Tecnología del ADN recombinante Investigación en genes Tecnología del ADN recombinante Tecnología del ADN recombinante 1º parte: Conocimientos básicos que posibilitaron su desarrollo 2º parte: Instrumentos básicos 3º parte Ejemplos Conocimientos

Más detalles

versus PCR en Tiempo Real PCR convencional no es cuantitativo

versus PCR en Tiempo Real PCR convencional no es cuantitativo PCR convencional o PCR de punto final versus PCR en Tiempo Real PCR convencional no es cuantitativo S Lobos C - U de Chile 1 PCR clásico La cantidad de producto no está relacionada con la cantidad de DNA

Más detalles

Metodologías basadas en la identificación del ADN: PCR, hibridación, secuenciación y análisis de secuencias.

Metodologías basadas en la identificación del ADN: PCR, hibridación, secuenciación y análisis de secuencias. Metodologías basadas en la identificación del ADN: PCR, hibridación, secuenciación y análisis de secuencias. Dra. Sonia Arduino Dep. de Clínica Estomatología Facultad de Postgrado en Ciencias de la Salud

Más detalles

Reacción en cadena de la polymerasa (PCR)

Reacción en cadena de la polymerasa (PCR) Reacción en cadena de la polymerasa (PCR) 1 PCR Que es? Es una técnica in vitro diseñada para amplificar una región específica de DNA. Es extremadamente sensible, con la capacidad de amplificar millones

Más detalles

APLICACIÓN DE LA PCR: DIAGNÓSTICO DE PARÁSITOS

APLICACIÓN DE LA PCR: DIAGNÓSTICO DE PARÁSITOS Prácticas docentes en la COD: 10-71 APLICACIÓN DE LA PCR: DIAGNÓSTICO DE PARÁSITOS FUNDAMENTO TEÓRICO La PCR es una técnica que permite llevar a cabo la síntesis in vitro de fragmentos de ADN. Está basada

Más detalles

PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGIA CLINICA

PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGIA CLINICA PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGIA CLINICA Juan Carlos Rodríguez Hospital General Universitario de Alicante E-mail: rodriguez_juadia@gva.es http://microbiologia-alicante.umh.es CASO CLINICO: Rubéola Evolución

Más detalles

3.- TECNOLOGIA EN EL DIAGNOSTICO MOLECULAR

3.- TECNOLOGIA EN EL DIAGNOSTICO MOLECULAR 3.- TECNOLOGIA EN EL DIAGNOSTICO MOLECULAR 3.1.- INTRODUCCIÓN Pocas áreas de la Biología Molecular han permanecido inalteradas con la aparición de una serie de técnicas englobadas dentro del término genérico

Más detalles

DETERMINACIÓN DEL FACTOR Rh por PCR

DETERMINACIÓN DEL FACTOR Rh por PCR Ref.PCRRh DETERMINACIÓN DEL FACTOR Rh por PCR 1.OBJETIVO DEL EXPERIMENTO El objetivo de este experimento es introducir a los estudiantes en los principios y práctica de la Reacción en Cadena de la Polimerasa

Más detalles

Reacción en cadena de la Polimerasa (PCR)

Reacción en cadena de la Polimerasa (PCR) Explicación de TP Nº 2 Reacción en cadena de la Polimerasa (PCR) Química Biológica Patológica Dra. Mariana L. Ferramola Dra. Gabriela Lacoste 2015 Definición de PCR Es la amplificación enzimática de un

Más detalles

BIOTECNOLOGÍA. 1.- Ingeniería Genética, ADN recombinante

BIOTECNOLOGÍA. 1.- Ingeniería Genética, ADN recombinante BIOTECNOLOGÍA 1.- Ingeniería Genética, ADN recombinante Técnica del ADN recombinante: es la más usada en ingeniería genética, esta basada en el uso de las enzimas de restricción o endonucleasas de restricción

Más detalles

Guía de PCR en tiempo real

Guía de PCR en tiempo real Guía de PCR en tiempo real Michelle C. Chirinos-Arias michelle.christine16@gmail.com Índice Introducción. 2 Algunos conceptos. 2 PCR (reacción en cadena de la polimerasa)... 2 PCR en tiempo real (qpcr)..

Más detalles

DIAGNOSTICO VIROLOGICO MOLECULAR. Dr. Gerardo Andino

DIAGNOSTICO VIROLOGICO MOLECULAR. Dr. Gerardo Andino DIAGNOSTICO VIROLOGICO MOLECULAR Dr. Gerardo Andino DIAGNÓSTICO MOLECULAR La tecnología empleada para la detección de genomas virales mediante la amplificación de secuencias específicas (PCR y reacciones

Más detalles

CUADERNO DE PRÁCTICAS GENETICA MOLECULAR HUMANA. Grado en Medicina

CUADERNO DE PRÁCTICAS GENETICA MOLECULAR HUMANA. Grado en Medicina DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA Y BIOLOGÍA MOLECULAR III FACULTAD DE MEDICINA UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID CUADERNO DE PRÁCTICAS GENETICA MOLECULAR HUMANA Grado en Medicina CURSO ACADÉMICO 2014/2015 INDICE

Más detalles

Tema 11. Herramientas de la genética molecular

Tema 11. Herramientas de la genética molecular Tema 11. Herramientas de la genética molecular Genética CC. Mar 2004-05 Objetivos Técnicas de clonación Construcción de genotecas e identificación de secuencias Mapas de restricción Amplificación (PCR)

Más detalles

Análisis de paternidad y parentesco en alpacas (Vicugna pacos) mediante marcadores moleculares

Análisis de paternidad y parentesco en alpacas (Vicugna pacos) mediante marcadores moleculares Análisis de paternidad y parentesco en alpacas (Vicugna pacos) mediante marcadores moleculares MSc. Juan Agapito Panta Laboratorio de Genómica y Biología Molecular Instituto Peruano de Energía Nuclear

Más detalles

Tecnologías basadas en la PCR

Tecnologías basadas en la PCR Tecnologías de marcadores moleculares para estudios de diversidad genética de plantas: Módulo de aprendizaje Tecnologías basadas en el ADN Tecnologías basadas en la PCR Fundamentos de la PCR Derechos de

Más detalles

Diagnóstico Virológico PCR y pruebas rápidas: Gripe A. Carlos Artaza Alvarez MIR 4 Hospital Universitario Fundación Alcorcón

Diagnóstico Virológico PCR y pruebas rápidas: Gripe A. Carlos Artaza Alvarez MIR 4 Hospital Universitario Fundación Alcorcón Diagnóstico Virológico PCR y pruebas rápidas: Gripe A. Carlos Artaza Alvarez MIR 4 Hospital Universitario Fundación Alcorcón Reacción en Cadena de la INTRODUCCION: Polimerasa (RCP) Década de los 70: Grandes

Más detalles

Enzimas de restricción

Enzimas de restricción BIOTECNOLOGIA Enzimas de restricción Endonucleasas que reconocen dianas específicas en el ADN Protegen a cada cepa de bacterias de otro ADN que no pertenece al sistema El ADN propio está protegido porque

Más detalles

Metodología y aplicaciones de la amplificación de material genético: Introducción a la bioinformática.

Metodología y aplicaciones de la amplificación de material genético: Introducción a la bioinformática. Departamento de Bioquímica Médica y Biología Molecular Práctica 3 Metodología y aplicaciones de la amplificación de material genético: Introducción a la bioinformática. Curso 1 Medicina (Abril) 2012 BIOQUÍMICA

Más detalles

EDUCACION CONTINUADA. Introducción. Caso clínico nº 1

EDUCACION CONTINUADA. Introducción. Caso clínico nº 1 EDUCACION CONTINUADA L. Castaño, J.R. Bilbao, I. Urrutia An Esp Pediatr 1997;46:513-518. Introducción a la biología molecular y aplicación a la pediatría (5): Casos clínicos. Alteraciones genéticas en

Más detalles

Tipos de Muestras. Técnicas de Biología Molecular. Extracción de ácidos nucleicos. Extracción de DNA genómico. Muestra de sangre en papel filtro

Tipos de Muestras. Técnicas de Biología Molecular. Extracción de ácidos nucleicos. Extracción de DNA genómico. Muestra de sangre en papel filtro Técnicas de Biología Molecular Dr. Luis Salazar N Depto. de Ciencias Básicas / UFRO 2004 Tipos de Muestras Extracción de ácidos nucleicos o DNA o RNA Sangre total (EDTA) Saliva Líquido Amniótico Bulbo

Más detalles

LECCIÓN 3. Caracterización mediante marcadores moleculares - ADN. Lección 3 1

LECCIÓN 3. Caracterización mediante marcadores moleculares - ADN. Lección 3 1 LECCIÓN 3. Caracterización mediante marcadores moleculares - ADN. Lección 3 1 Nociones generales sobre Marcadores Moleculares -ADN Analizan directamente la molécula de ADN. Detectan ciertas variaciones

Más detalles

PCR gen 18S ARNr humano

PCR gen 18S ARNr humano PCR gen 18S ARNr humano Ref.PCR18S 1.OBJETIVO DEL EXPERIMENTO El objetivo de este experimento es introducir a los estudiantes en los principios y práctica de la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)

Más detalles

Marcadores moleculares (MM)

Marcadores moleculares (MM) Marcadores moleculares (MM) Un marcador genético o marcador molecular es un segmento de ADN situado en un lugar específico del genoma (locus) y cuya herencia genética se puede rastrear. Puede ser un gen

Más detalles

ELECTROFORESIS. Agarosa. Poliacrilamida

ELECTROFORESIS. Agarosa. Poliacrilamida ELECTROFORESIS DE ADN ELECTROFORESIS Agarosa Poliacrilamida Finalidad de la electroforesis Separar Identificar Purificar 1 2 3 4 5 Tinción del ADN Bromuro de etidio Absorbancia a 302 y 366 y emisión a

Más detalles

UNIÓN INTERNACIONAL PARA LA PROTECCIÓN DE LAS OBTENCIONES VEGETALES

UNIÓN INTERNACIONAL PARA LA PROTECCIÓN DE LAS OBTENCIONES VEGETALES S Directrices del BMT (proj.5) ORIGINAL: Inglés FECHA: 25 de febrero de 2006 UNIÓN INTERNACIONAL PARA LA PROTECCIÓN DE LAS OBTENCIONES VEGETALES GINEBRA PROYECTO DIRECTRICES PARA LOS PERFILES DE ADN: SELECCIÓN

Más detalles

Nuevos paneles de PCR Real Time: El diagnóstico molecular más rápido, fiable y eficaz

Nuevos paneles de PCR Real Time: El diagnóstico molecular más rápido, fiable y eficaz IDEXX VetLab Suite IDEXX SNAP Tests Laboratorio de Referencia IDEXX Nuevos paneles de PCR Real Time: El diagnóstico molecular más rápido, fiable y eficaz Obtenga respuestas definitivas con la IDEXX RealPCR

Más detalles

AQUAGESTION. ISAv: Un acercamiento actualizado en la detección de sus variantes en la región. Departamento de Desarrollo y Laboratorio Diagnóstico.

AQUAGESTION. ISAv: Un acercamiento actualizado en la detección de sus variantes en la región. Departamento de Desarrollo y Laboratorio Diagnóstico. AQUAGESTION ISAv: Un acercamiento actualizado en la detección de sus variantes en la región. Departamento de Desarrollo y Laboratorio Diagnóstico. Noviembre 2011 ACTUALIDAD Este año Sernapesca confirma

Más detalles

2. NIVEL MEDIO 1. NIVEL BASICO BIOLOGIA MOLECULAR 2.1 DNA SALIVA

2. NIVEL MEDIO 1. NIVEL BASICO BIOLOGIA MOLECULAR 2.1 DNA SALIVA BIOLOGIA MOLECULAR Hemos elaborado un programa en 3 niveles, en función del tipo de estudiante y las posibilidades del centro educativo: 1. NIVEL BASICO 2. NIVEL MEDIO DANAEXTRACTOR KIT Práctica que constituye

Más detalles

4Genética forense 1. QUÉ ES LA GENÉTICA FORENSE? tema

4Genética forense 1. QUÉ ES LA GENÉTICA FORENSE? tema tema 4Genética forense 1. QUÉ ES LA GENÉTICA FORENSE? Con la denominación de genética forense se define el uso de ciertas técnicas empleadas en genética para la identificación de los individuos en base

Más detalles

TEST de PATERNIDAD. Ref.PCR paternidad (4 prácticas) 1.OBJETIVO DEL EXPERIMENTO

TEST de PATERNIDAD. Ref.PCR paternidad (4 prácticas) 1.OBJETIVO DEL EXPERIMENTO Ref.PCR paternidad (4 prácticas) 1.OBJETIVO DEL EXPERIMENTO TEST de PATERNIDAD Este experimento introduce a los alumnos en el uso del ADN y la PCR para simular una determinación de paternidad. Los estudiantes

Más detalles

TÉCNICAS MOLECULARES DE DETECCIÓN DE PATÓGENOS Y DE SUS FACTORES DE VIRULENCIA

TÉCNICAS MOLECULARES DE DETECCIÓN DE PATÓGENOS Y DE SUS FACTORES DE VIRULENCIA TÉCNICAS MOLECULARES DE DETECCIÓN DE PATÓGENOS Y DE SUS FACTORES DE VIRULENCIA TÉCNICAS MOLECULARES:VENTAJAS 1- RAPIDEZ 2- SENSIBILIDAD 3- NO NECESITAN MICROORGANISMO VIABLE 4- DETECTAN MICRORGANISMOS

Más detalles

EL EMPLEO DE ANÁLISIS BIOQUÍMICOS Y MOLECULARES EN EL EXAMEN DHE MOLECULARES EN EL EXAMEN DHE

EL EMPLEO DE ANÁLISIS BIOQUÍMICOS Y MOLECULARES EN EL EXAMEN DHE MOLECULARES EN EL EXAMEN DHE X Curso de Formación sobre la Protección de las Obtenciones Vegetales para Países Iberoamericanos Montevideo (URUGUAY) 12 al 16 de Diciembre de 2011 EL EMPLEO DE ANÁLISIS BIOQUÍMICOS Y MOLECULARES EN EL

Más detalles

Genoma y Ensamblado Seminario de Modelos y Métodos cuantitativos (Bioinformática)

Genoma y Ensamblado Seminario de Modelos y Métodos cuantitativos (Bioinformática) Genoma y Ensamblado Seminario de Modelos y Métodos cuantitativos (Bioinformática) Rodrigo Fernández Cristián Maureira Gabriel Zamora Universidad Técnica Federico Santa María 18 de noviembre de 2010 Genoma

Más detalles

TEMA 7. TÉCNICAS EN BIOLOGÍA MOLECULAR: DETECCIÓN E IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS

TEMA 7. TÉCNICAS EN BIOLOGÍA MOLECULAR: DETECCIÓN E IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS TEMA 7. TÉCNICAS EN BIOLOGÍA MOLECULAR: DETECCIÓN E IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS I. TÉCNICAS EN BIOLOGÍA MOLECULAR: ESQUEMA DE TÉCNICAS UTILIZADAS 1. TECNICAS DE HIBRIDACIÓN CON SONDAS DE ACIDOS NUCLEICOS.

Más detalles

Caracterización morfo-agronómica y molecular de frijoles criollos de color rojo claro en Nicaragua y de frijoles negros en Ipala, Guatemala

Caracterización morfo-agronómica y molecular de frijoles criollos de color rojo claro en Nicaragua y de frijoles negros en Ipala, Guatemala Caracterización morfo-agronómica y molecular de frijoles criollos de color rojo claro en Nicaragua y de frijoles negros en Ipala, Guatemala IICA/Red SICTA-CIAT INFORME DE AVANCE Gerardo Gallego - Harold

Más detalles

MICROBIOLOGÍA DE LOS ALIMENTOS 2015 INGENIERÍA EN ALIMENTOS LICENCIATURA EN BIOQUÍMICA TRABAJO PRÁCTICO N 1 REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR)

MICROBIOLOGÍA DE LOS ALIMENTOS 2015 INGENIERÍA EN ALIMENTOS LICENCIATURA EN BIOQUÍMICA TRABAJO PRÁCTICO N 1 REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR) MICROBIOLOGÍA DE LOS ALIMENTOS 2015 INGENIERÍA EN ALIMENTOS LICENCIATURA EN BIOQUÍMICA TRABAJO PRÁCTICO N 1 REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR) OBJETIVOS - Definir PCR, conocer los reactivos que

Más detalles

Secretaría de Posgrado del Instituto de Ecología, A.C. Propuesta de Curso

Secretaría de Posgrado del Instituto de Ecología, A.C. Propuesta de Curso Secretaría de Posgrado del Instituto de Ecología, A.C. Propuesta de Curso NOTA: Los puntos en negritas son indispensables en este momento para poder hacer buena difusión de sus cursos y llevar a cabo la

Más detalles

Marcadores moleculares basados en PCR: Marcadores SSR o STR. Microsatélites

Marcadores moleculares basados en PCR: Marcadores SSR o STR. Microsatélites Marcadores moleculares basados en PCR: Marcadores SSR o STR (Simple Sequence Repeats or Short Tandem Repeats). Microsatélites Apellidos, nombre Departamento Centro Picó Sirvent, María Belén (mpicosi@btc.upv.es)

Más detalles

Problema 1: Southern Blot. Problema 2: Paternidad.

Problema 1: Southern Blot. Problema 2: Paternidad. Problema 1: Southern Blot. En el análisis de DNA Fingerprint mediante la técnica de "Southern" Blot: A- El RNA celular es separado electroforéticamente y transferido a una membrana. Luego la membrana se

Más detalles

CLASE DE RESOLUCIÓN DE PROBLEMAS DE PCR LIC. BIOTECNOLOGÍA 2015

CLASE DE RESOLUCIÓN DE PROBLEMAS DE PCR LIC. BIOTECNOLOGÍA 2015 CLASE DE RESOLUCIÓN DE PROBLEMAS DE PCR LIC. BIOTECNOLOGÍA 2015 DEFINICIÓN PCR: Constituye la técnica más importante para amplificar ácidos nucleicos in vitro. Ambas hebras del DNA de interés son replicadas

Más detalles

Cultura Cientí fica 1 Bachillerato

Cultura Cientí fica 1 Bachillerato Cultura Cientí fica 1 Bachillerato 3. La revolución genética: biotecnología Actividades de consolidación 1. Cualquier molécula de ADN formada por la unión de segmentos de ADN de origen diferente es: a)

Más detalles

5. DETECCION DE GENES DE VIRULENCIA MEDIANTE HIBRIDACIÓN CON SONDAS DE ADN

5. DETECCION DE GENES DE VIRULENCIA MEDIANTE HIBRIDACIÓN CON SONDAS DE ADN 5. DETECCION DE GENES DE VIRULENCIA MEDIANTE HIBRIDACIÓN CON SONDAS DE ADN Materiales - Eppendorf de 1,5 ml estériles - Eppendorf de pared fina para PCR - Puntas de pipeta estériles desechables - Guantes

Más detalles

DETECCIÓN DE C. jejuni EN HAMBURGUESA DE POLLO POR PCR TRADICIONAL PRT-712.04-082

DETECCIÓN DE C. jejuni EN HAMBURGUESA DE POLLO POR PCR TRADICIONAL PRT-712.04-082 Página 1 de 5 1. OBJETIVO Detectar la presencia de Campylobacter jejuni en hamburguesa de pollo mediante técnica de PCR. 2. CAMPO DE APLICACIÓN Y ALCANCE Aplicar este procedimiento a muestras de hamburguesa

Más detalles

EL MATERIAL GENÉTICO:

EL MATERIAL GENÉTICO: LA HUELLA GENÉTICA: PRUEBAS DE PATERNIDAD E IDENTIFICACIÓN INTRODUCCIÓN: En éstos últimos años, se ha popularizado a través de los medios de comunicación la expresión: identificación través de pruebas

Más detalles

Tipos de Muestras. Técnicas de Biología Molecular. Extracción de ácidos nucleicos. Extracción de DNA genómico. Muestra de sangre en papel filtro

Tipos de Muestras. Técnicas de Biología Molecular. Extracción de ácidos nucleicos. Extracción de DNA genómico. Muestra de sangre en papel filtro Técnicas de Biología Molecular Dr. Luis Salazar N Depto. de Ciencias Básicas / UFRO 2004 Tipos de Muestras Extracción de ácidos nucleicos o DNA o RNA Sangre total (EDTA) Saliva Líquido Amniótico Bulbo

Más detalles

Enfermedades genéticas

Enfermedades genéticas Enfermedades genéticas Desórdenes genéticos Mutaciones Rearreglos genómicos Variación en número de cromosomas Monogenéticas, heredables en forma mendeliana. Enfermedades genéticas Poligenéticas o complejas,

Más detalles

- Clonar un gen (molde ADN o ARN)

- Clonar un gen (molde ADN o ARN) APLICACIONES PCR Aplicaciones de la PCR - Clonar un gen (molde ADN o ARN) - Secuencia conocida - Genes homólogos en especies próximas (primers degenerados) - Información de secuencia proteica (primers

Más detalles

Tema 1. El análisis genético

Tema 1. El análisis genético Tema 1 El análisis genético Gen Genoma Genética Genómica Genómica estructural Genómica funcionall Mapas genéticos Mapas físicos EXPRESIÓN Transcriptoma Proteoma Interactoma FUNCIÓN Genética inversa ANÁLISIS

Más detalles

Aplicaciones de las Técnicas de Detección de Ácidos Nucléicos en Medicina Transfusional

Aplicaciones de las Técnicas de Detección de Ácidos Nucléicos en Medicina Transfusional Aplicaciones de las Técnicas de Detección de Ácidos Nucléicos en Medicina Transfusional BIOQ. LILIANA DI TULLIO BUDASSI FAC. CS.BIOQUÍMICAS Y FARMACÉUTICAS UNIVERSIDAD NACIONAL DE ROSARIO lilianadt2003@yahoo.com.ar

Más detalles

N 1 Reacción n en Cadena de la Polimerasa

N 1 Reacción n en Cadena de la Polimerasa Trabajo Práctico N 1 Reacción n en Cadena de la Polimerasa Definición n e importancia. Usos y aplicaciones. Optimización. Tipos de PCR. Electroforesis. Fundamentos. Asociado al Programa Teórico: Tema 2.

Más detalles

5. MATERIALES Y MÉTODOS

5. MATERIALES Y MÉTODOS 5. MATERIALES Y MÉTODOS 5.1 Equipos Los siguientes termocicladores se emplearon para la amplificación por PCR: - Perkin Elmer, GeneAmp PCR System 2400. - Perkin Elmer, GeneAmp PCR System 9600. - Applied

Más detalles

3/22/2010. Iván Ferrer Rodríguez, PhD Catedrático. En el 1983, Kary Mullis dio a conocer la Técnica de reacción en cadena de la Polimerasa o PCR.

3/22/2010. Iván Ferrer Rodríguez, PhD Catedrático. En el 1983, Kary Mullis dio a conocer la Técnica de reacción en cadena de la Polimerasa o PCR. Iván Ferrer Rodríguez, PhD Catedrático En el 1983, Kary Mullis dio a conocer la Técnica de reacción en cadena de la Polimerasa o PCR. Síntesis "in vitro" de secuencias específicas de ADN son amplificadas.

Más detalles

Actualización en nuevas técnicas de diagnóstico genético molecular disponibles en Chile

Actualización en nuevas técnicas de diagnóstico genético molecular disponibles en Chile Actualización en nuevas técnicas de diagnóstico genético molecular disponibles en Chile Dra. Teresa Aravena Clínica INDISA Hospital Clínico de la Universidad de Chile Hospital Dr. Sótero del Río Exámenes

Más detalles

Métodos de análisis biomédicos

Métodos de análisis biomédicos Métodos de análisis biomédicos 1 Métodos de análisis biomédicos Comprenden métodos de análisis a nivel de DNA, RNA y proteínas que permitan tener un mayor conocimiento de una enfermedad dada, que puedan

Más detalles

PCR. Técnica inventada por Kary Mullis :1987. Premio Nobel 1993. Amplifica una ÚNICA secuencia a partir de una mezcla compleja de ADN

PCR. Técnica inventada por Kary Mullis :1987. Premio Nobel 1993. Amplifica una ÚNICA secuencia a partir de una mezcla compleja de ADN PCR PCR Técnica inventada por Kary Mullis :1987 Premio Nobel 1993 Amplifica una ÚNICA secuencia a partir de una mezcla compleja de ADN Aprovecha los requerimientos de la replicación Templete ADN Nucleótidos

Más detalles

CAPÍTULO III. Metodología e instrumentación de análisis celular

CAPÍTULO III. Metodología e instrumentación de análisis celular CAPÍTULO III Metodología e instrumentación de análisis celular 1.- Hemocitómetro y test de exclusión de colorante Trypan blue 2.- Citometría de flujo 3.- PCR 4.- Electroforesis en gel 5.- Secuenciación

Más detalles

MATERIALES Y MÉTODOS. Cepas Utilizadas

MATERIALES Y MÉTODOS. Cepas Utilizadas MATERIALES Y MÉTODOS Cepas Utilizadas Para el presente trabajo se utilizaron tres cepas Tipo: Mycobacterium aviumintracellulare (proporcionada al Laboratorio Estatal de Salud Pública por el Instituto Nacional

Más detalles

Biotina: se usa uno de los dntps biotinilado. Detección: Streptavidina conjugada con enzima (ALP) o anti-biotina. Usos: NB, SB, hibridación in situ

Biotina: se usa uno de los dntps biotinilado. Detección: Streptavidina conjugada con enzima (ALP) o anti-biotina. Usos: NB, SB, hibridación in situ Northern blot Marcación no radioactiva: Digoxigenina: se usa uno de los dntps marcado con digoxigenina Detección: Anticuerpo conjugado con enzima (ALP) o fluorocromo Biotina: se usa uno de los dntps

Más detalles

AUTOR: JORGE CONTRERAS PINEDA 1. Titulo:

AUTOR: JORGE CONTRERAS PINEDA 1. Titulo: Página 1 de 1 1. Titulo: Electroforesis de DNA 2. Objetivo Conocer los principios básicos de la electroforesis horizontal en geles de agarosa y aplicarlo para la separación de DNA humano, plasmídico, recombinante

Más detalles

Héctor Rocha L. Principios de Medicina Molecular

Héctor Rocha L. Principios de Medicina Molecular 796 GENES 1 1) HERRAMIENTAS DE LA BIOLOGÍA CELULAR 800 a) EMPLEO DE ALGUNAS ENZIMAS 802 b) AMPLIFICACIÓN POR CLONACIÓN 803 c) BIBLIOTECAS DE GENES 806 d) ANÁLISIS DE LOS PRODUCTOS CLONADOS 806 e) AMPLIFICACIÓN

Más detalles

Regeneración in vitro

Regeneración in vitro Regeneración in vitro A. K. Neelakandan K. Wang (2012) Recent progress in the understanding of @ssue culture- induced genome level changes in plants and poten@al applica@ons.plant Cell Rep 31:597 620 Variación

Más detalles

TRABAJO PRÁCTICO Nº 5: ÁCIDOS NUCLEICOS DESCRIPCIÓN DE LOS MÉTODOS A UTILIZAR

TRABAJO PRÁCTICO Nº 5: ÁCIDOS NUCLEICOS DESCRIPCIÓN DE LOS MÉTODOS A UTILIZAR TRABAJO PRÁCTICO Nº 5: ÁCIDOS NUCLEICOS DOCENTES: Andrés Ciocchini, Gabriela Niemirowicz. DESCRIPCIÓN DE LOS MÉTODOS A UTILIZAR Purificación de ácido desoxiribonucleico (ADN) por partición diferencial

Más detalles

FUNDAMENTOS DE LA TÉCNICA PCR

FUNDAMENTOS DE LA TÉCNICA PCR FUNDAMENTOS DE LA TÉCNICA PCR 1 2 PCR Qué es? REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA Técnica que nos permite amplificar selectivamente un segmento específico de DNA, hasta obtener una cantidad suficiente

Más detalles

ADN y RNA caracterización y métodos de estudio

ADN y RNA caracterización y métodos de estudio ADN y RNA caracterización y métodos de estudio Separación por centrifugación de equilibrio en gradiente de densidad de en CsCl Separación por centrifugación de equilibrio en gradiente de densidad de en

Más detalles

PROBLEMAS MÁS FRECUENTES Y POSIBLES SOLUCIONES

PROBLEMAS MÁS FRECUENTES Y POSIBLES SOLUCIONES PROBLEMAS MÁS FRECUENTES Y POSIBLES SOLUCIONES NO SE PRODUCE REACCIÓN O ÉSTA DECAE POCO DESPUÉS DE COMENZAR No hay ADN o hay menos del necesario No hay cebador o la concentración es inferior a la necesaria.

Más detalles